本發(fā)明涉及有機(jī)發(fā)光材料，具體為一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、近紅外光學(xué)探針由于具有高靈敏度、低干擾性、良好的穿透深度和分辨率等優(yōu)點(diǎn)，通過(guò)與分光光度計(jì)、熒光光譜儀、共聚焦激光掃描顯微鏡和動(dòng)物熒光/光聲成像系統(tǒng)結(jié)合的方式，可以準(zhǔn)確、全面地分析各種生理和病理過(guò)程，已成為檢測(cè)生物樣本中各項(xiàng)指標(biāo)和生物分子的重要工具之一。onoo-廣泛存在于很多病變器官中，如肝損傷、糖尿病等都會(huì)有onoo-的變化，但大部分近紅外熒光/光聲探針還不能高特異性的檢測(cè)過(guò)氧亞硝基(onoo-)。

2、另外，目前現(xiàn)有檢測(cè)onoo-的近紅外光學(xué)探針主要以花菁和氟硼二吡咯化合物(bodipy)染料為主，它們?cè)跈z測(cè)時(shí)可能會(huì)受到h2o2、·oh、clo-,1o2等這些活性氧的干擾。此外，這些染料還可能存在穩(wěn)定性低、特異性差和成本高的問(wèn)題，不利于大范圍推廣應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是為了克服上述問(wèn)題或者至少部分地解決上述問(wèn)題，而提出的一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針及其制備方法和應(yīng)用。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，包括以下步驟：

3、s1、將16,17-二羥基蒽酮紫和無(wú)水碳酸鉀分散在n,n-二甲基甲酰胺中，在20-80℃下攪拌0.25-1h后，將4-溴甲基苯硼酸頻那醇酯快速加入,升溫至120℃反應(yīng)12h；

4、s2、反應(yīng)結(jié)束后，將s1的反應(yīng)溶液緩慢滴入甲醇中，沉降24h后抽濾，用甲醇和水洗滌，并用二氯甲烷萃取三次，收集有機(jī)層旋蒸、干燥，并通過(guò)硅膠柱層析法純化，得到蒽酮紫衍生物vtp；

5、s3、將預(yù)設(shè)濃度的蒽酮紫衍生物vtp的四氫呋喃溶液和兩親性表面活性劑的四氫呋喃溶液混合均勻；

6、s4、在超聲的條件下，將s3的混合溶液快速注入預(yù)設(shè)體積的水中，保持超聲處理直至納米顆粒完全形成；

7、s5、在加熱的條件下，用氮?dú)獯等ニ芤褐械乃臍溥秽?jīng)超濾純化后得到具有近紅外熒光和光聲雙比率檢測(cè)能力的水溶性探針，用于onoo-的特異性檢測(cè)。

8、在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，在所述s1中，16,17-二羥基蒽酮紫在n,n-二甲基甲酰胺中的濃度為100mm，16,17-二羥基蒽酮紫、無(wú)水碳酸鉀和4-溴甲基苯硼酸頻那醇酯的摩爾比為1:2～8:2～6。

9、在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，在所述s2中，甲醇體積為反應(yīng)溶液體積的20倍。

10、在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，在所述s3中，蒽酮紫衍生物vtp和兩親性表面活性劑的濃度分別為1mg/ml和20mg/ml，兩者的體積比為2:5；兩親性表面活性劑包括但不限于非離子型、陽(yáng)離子型、陰離子型和兩性離子型表面活性劑，如f127、dspe-peg、

11、在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，在所述步驟s4中，水的預(yù)設(shè)體積為9ml，超聲時(shí)間2-3min，混合溶液的用量為1.4ml。

12、在一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例中，在所述步驟s5中，加熱溫度為50℃。

13、一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針，根據(jù)所述的雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法制得，所述探針包括蒽酮紫衍生物vtp和兩親性表面活性劑，所述探針在660nm和808nm兩個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)下熒光強(qiáng)度的變化構(gòu)建了基于熒光的激發(fā)比率型探針；所述探針利用響應(yīng)前后吸收光譜的變化實(shí)現(xiàn)比率型的光聲檢測(cè)。

14、一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的應(yīng)用，根據(jù)所述的雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法制得的所述探針應(yīng)用于光學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，特別是用于檢測(cè)生物樣本中的過(guò)氧亞硝基(onoo-)；所述探針能夠特異性地檢測(cè)onoo-，排除包括h2o2、·oh、clo-,1o2的活性氧的干擾；所述探針在水溶液中對(duì)h2o2沒(méi)有明顯的響應(yīng)，僅在堿性且加熱的條件下能夠產(chǎn)生響應(yīng)；

15、所述探針還能夠用于肝損傷、糖尿病等病變器官中onoo-的檢測(cè)，通過(guò)熒光和光聲雙比率成像技術(shù)實(shí)現(xiàn)高靈敏度和高特異性的檢測(cè)。

16、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：本發(fā)明解決了大部分近紅外熒光或光聲有機(jī)探針?lè)€(wěn)定性低、特異性差和成本高的問(wèn)題，具有很好的水溶性和生物相容性，且在正常生理環(huán)境下能排除其它活性氧自由基的干擾，特異性地檢測(cè)onoo-。

技術(shù)特征：

1.一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，其特征在于：在所述s1中，16,17-二羥基蒽酮紫在n,n-二甲基甲酰胺中的濃度為100mm，16,17-二羥基蒽酮紫、無(wú)水碳酸鉀和4-溴甲基苯硼酸頻那醇酯的摩爾比為1:2～8:2～6。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，其特征在于：在所述s2中，甲醇體積為反應(yīng)溶液體積的20倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，其特征在于：在所述s3中，蒽酮紫衍生物vtp和兩親性表面活性劑的濃度分別為1mg/ml和20mg/ml，兩者的體積比為2:5；兩親性表面活性劑包括但不限于非離子型、陽(yáng)離子型、陰離子型和兩性離子型表面活性劑。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，其特征在于：在所述步驟s4中，水的預(yù)設(shè)體積為9ml，超聲時(shí)間2-3min，混合溶液的用量為1.4ml。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法，其特征在于：在所述步驟s5中，加熱溫度為50℃。

7.一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針，其特征在于：根據(jù)權(quán)利要求1至6任意一項(xiàng)所述的雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法制得，所述探針包括蒽酮紫衍生物vtp和兩親性表面活性劑，所述探針在660nm和808nm兩個(gè)激發(fā)波長(zhǎng)下熒光強(qiáng)度的變化構(gòu)建了基于熒光的激發(fā)比率型探針；所述探針利用響應(yīng)前后吸收光譜的變化實(shí)現(xiàn)比率型的光聲檢測(cè)。

8.一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的應(yīng)用，其特征在于：根據(jù)權(quán)利要求1至6任意一項(xiàng)所述的雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針的制備方法制得的所述探針應(yīng)用于光學(xué)檢測(cè)領(lǐng)域，特別是用于檢測(cè)生物樣本中的過(guò)氧亞硝基(onoo-)；所述探針能夠特異性地檢測(cè)onoo-，排除包括h2o2、·oh、clo-,1o2的活性氧的干擾；所述探針在水溶液中對(duì)h2o2沒(méi)有明顯的響應(yīng)，僅在堿性且加熱的條件下能夠產(chǎn)生響應(yīng)；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種雙比率型光學(xué)檢測(cè)探針及其制備方法和應(yīng)用，包括以下步驟：將16,17?二羥基蒽酮紫和無(wú)水碳酸鉀分散在N,N?二甲基甲酰胺中，攪拌后，將4?溴甲基苯硼酸頻那醇酯快速加入,升溫至120℃反應(yīng)12h；將反應(yīng)溶液緩慢滴入甲醇中，沉降24h后抽濾、洗滌，并萃取三次，收集有機(jī)層旋蒸、干燥，并通過(guò)硅膠柱層析法純化，得到蒽酮紫衍生物VTP；將預(yù)設(shè)濃度的蒽酮紫衍生物VTP的四氫呋喃溶液和兩親性表面活性劑的四氫呋喃溶液混合均勻，并注射入預(yù)設(shè)體積的水中，純化后得到水溶性光學(xué)探針。本發(fā)明解決了大部分近紅外熒光或光聲有機(jī)探針?lè)€(wěn)定性低、特異性差和成本高的問(wèn)題，具有很好的水溶性和生物相容性，且在正常生理環(huán)境下能排除其它活性氧自由基的干擾。

技術(shù)研發(fā)人員：陸峰,張雨琦,葛寅睿,黃玥,范曲立
受保護(hù)的技術(shù)使用者：南京郵電大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6