一、本發(fā)明涉及醫(yī)藥，特別是一種從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

0、二、背景技術(shù)

1、神經(jīng)退行性疾病是一種大腦和脊髓的細(xì)胞神經(jīng)元結(jié)構(gòu)和功能逐漸喪失的疾病狀態(tài)，包括阿爾茨海默癥、帕金森病、亨廷頓病、肌萎縮性側(cè)索硬化、不同類型脊髓小腦共濟(jì)失調(diào)等，嚴(yán)重威脅人類的生命健康和生活質(zhì)量。其發(fā)病機(jī)制至今尚不明確，現(xiàn)有的治療藥物只能在一定程度上改善癥狀，不能從根本上阻止或逆轉(zhuǎn)疾病進(jìn)展，因此尋找新的治療藥物迫在眉睫。研究表明，神經(jīng)炎癥是神經(jīng)退行性疾病發(fā)展的關(guān)鍵驅(qū)動因素，并且貫穿了神經(jīng)退行性疾病的整個發(fā)病過程，是神經(jīng)元損傷或凋亡的直接原因，通過干預(yù)神經(jīng)炎癥來治療神經(jīng)退行性疾病被寄予厚望，因此尋找抗神經(jīng)炎癥作用的化合物對于神經(jīng)退行性疾病治療藥物的研發(fā)具有重要意義。

2、羊角棉(alstonia?mairei?lévl.)為夾竹桃科(apocynaceae)雞骨常山屬(alstonia)植物，是我國特有種，分布于云南、貴州、四川等地。其根、葉可供藥用，具有清熱解毒、止痛止血、排膿生肌等功效，外用可治療外傷出血和瘡毒等?，F(xiàn)代化學(xué)及藥理學(xué)研究表明，羊角棉中含有單萜吲哚生物堿、黃酮、三萜、香豆素等類型的化學(xué)成分，具有抗炎、抗腫瘤、乙酰膽堿酯酶抑制、抗氧化、神經(jīng)保護(hù)等多種生物活性，但是從羊角棉中提取抗神經(jīng)炎癥作用的化合物目前還未見有相關(guān)報道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

0、三、
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

1、針對上述情況，為解決現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的就是提供一種從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物及其制備方法與應(yīng)用，可有效解決羊角棉的藥用問題。

2、本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，所述的從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物結(jié)構(gòu)式如下所示：

3、

4、本發(fā)明所述的3個單萜吲哚生物堿類化合物的提取方法，包括以下步驟：

5、1)將干燥的羊角棉枝葉粉碎，用甲醇或者體積分?jǐn)?shù)為70～95％的乙醇浸漬提取或者加熱回流提取，提取液減壓濃縮干燥，將得到的醇提物分散于鹽酸水溶液中，調(diào)節(jié)ph為2～3，加入等體積的乙酸乙酯或二氯甲烷或氯仿進(jìn)行萃取，取酸水層，用氨水調(diào)ph至9-11，再加入等體積的乙酸乙酯或二氯甲烷或氯仿萃取，得到的有機(jī)相萃取物即為總生物堿，總生物堿用氧化鋁柱色譜粗分，以二氯甲烷-甲醇溶劑系統(tǒng)按100：0～0：100梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到14個組份fa～fn；

6、2)將步驟1)得到的組份fa采用氧化鋁柱色譜分離，以石油醚-丙酮溶劑系統(tǒng)按100：0～0：100梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到16個組份fa1～fa16；

7、3)將步驟2)得到的組份fa6過凝膠柱色譜，以石油醚：二氯甲烷：甲醇＝5：5：1的混合溶劑為洗脫劑等度洗脫，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到4個組份fa6-1～fa6-4；

8、4)將步驟3)得到的組份fa6-1，采用反相制備型高效液相色譜分離純化，流動相為乙腈-水系統(tǒng)，洗脫條件為0～40min，30％～100％乙腈，收集保留時間為13.6min的主峰fa6-1-1，得到化合物1，即alstonmairine?a；

9、5)將步驟1)得到的組份fe采用ods柱色譜分離，以甲醇-水溶劑系統(tǒng)按20：80-100：0梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到9個組份fe1～fe9；

10、6)將步驟5)得到的組份fe6過sephadex?lh-20柱色譜，以甲醇為溶劑等度洗脫，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到7個組份fe6-1～fe6-7；

11、7)將步驟6)得到的組份fe6-2經(jīng)反相制備型高效液相分離純化，流動相為乙腈-水系統(tǒng)，洗脫條件為0～35min，16％～60％乙腈，收集保留時間為22.1min的主峰fe6-2-2，得到化合物2，即alstonmairine?b；

12、8)將步驟5)得到的組份fe5采用氧化鋁柱色譜分離，以石油醚-丙酮溶劑系統(tǒng)按100：5～0：100梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到12個組份fe5-1～fe5-12；

13、9)將步驟8)得到的組份fe5-9經(jīng)反相制備型高效液相分離純化，流動相為乙腈-水系統(tǒng)，洗脫條件為35％乙腈等度洗脫，收集保留時間為12.3min的主峰fe5-9-2，得到化合物3，即alstonmairine?c。

14、本發(fā)明所述的從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物在制備抗神經(jīng)炎癥藥物中的應(yīng)用。

15、本發(fā)明所述的提取方法制備的化合物1、2、3在制備抗神經(jīng)炎癥藥物中的應(yīng)用。

16、本發(fā)明制備原料豐富易得，制備方法簡單易行，從羊角棉中提取得到的3個新化合物能抑制脂多糖(lps)誘導(dǎo)的n9小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥損傷，具有顯著的抗神經(jīng)炎癥作用，具有進(jìn)一步開發(fā)為神經(jīng)退行性疾病的預(yù)防和治療藥物的前景，是從羊角棉中提取的化合物上的創(chuàng)新。

技術(shù)特征：

1.一種從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物，其特征在于，所述的3個單萜吲哚生物堿類化合物結(jié)構(gòu)式如下所示：

2.權(quán)利要求1所述的從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物的提取方法，其特征在于，包括以下步驟：1)將干燥的羊角棉枝葉7.8kg粉碎，用8倍量90％的乙醇加熱回流提取3次，每次2h，合并提取液并減壓濃縮干燥，將得到的醇提物分散于1％的鹽酸水溶液中，調(diào)節(jié)ph為2～3，加入等體積的乙酸乙酯萃取3～5次，取酸水層，用氨水調(diào)ph至10，再加入等體積的乙酸乙酯萃取3～5次，得到的有機(jī)相萃取物即為總生物堿，總生物堿用氧化鋁柱色譜粗分，以二氯甲烷-甲醇溶劑系統(tǒng)按100：0、100：1、100：2、100：3、100：5、100：8、10：1、5：1、3：1、2：1、1：1、0：100梯度洗脫，收集洗脫液，經(jīng)薄層檢識合并相同流份，得到14個組份fa～fn；

4.權(quán)利要求1所述的從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物在制備抗神經(jīng)炎癥藥物中的應(yīng)用。

5.權(quán)利要求2或3所述的提取方法制備的化合物1、2、3在制備抗神經(jīng)炎癥藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物及其制備方法與應(yīng)用，可有效解決羊角棉的藥用問題，其解決的技術(shù)方案是，所述的從羊角棉中提取的3個單萜吲哚生物堿類化合物結(jié)構(gòu)式如下所示：本發(fā)明制備原料豐富易得，制備方法簡單易行，從羊角棉中提取得到的3個新化合物能抑制脂多糖誘導(dǎo)的N9小膠質(zhì)細(xì)胞炎癥損傷，具有顯著的抗神經(jīng)炎癥作用，具有進(jìn)一步開發(fā)為神經(jīng)退行性疾病的預(yù)防和治療藥物的前景，是從羊角棉中提取的化合物上的創(chuàng)新。

技術(shù)研發(fā)人員：司盈盈,趙珍珠,曾夢楠,王立柯,孫彥君,王彥志,趙璇
受保護(hù)的技術(shù)使用者：河南中醫(yī)藥大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2