本發(fā)明屬于生物與醫(yī)藥，涉及小分子藥物開(kāi)發(fā)領(lǐng)域，尤其是一種以甘醇鏈為連接鏈的具有抗mash活性的acly靶向protac嵌合體、方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、masld是指除大量飲酒，且排除病毒性及其他肝損傷因素引起的肝臟中脂肪過(guò)度沉積，如果治療不及時(shí)會(huì)發(fā)展成mash。而mash治療不及時(shí)會(huì)發(fā)展成肝硬化，甚至?xí)l(fā)展成肝癌。其發(fā)病率極高，嚴(yán)重威脅人類的生命健康，然而針對(duì)mash目前只有resmetirom一款上市藥物，mash患病機(jī)制復(fù)雜，單一靶點(diǎn)治療藥物并不足以應(yīng)對(duì)整個(gè)市場(chǎng)。開(kāi)發(fā)一個(gè)高效、安全的治療mash藥物是目前迫在眉睫的任務(wù)，面臨巨大挑戰(zhàn)。

2、研究證明大多mash患者的過(guò)度脂肪積累來(lái)源于脂肪從頭合成的過(guò)程，脂肪從頭合成原料乙酰輔酶a來(lái)源于糖酵解生成的丙酮酸，丙酮酸在胞質(zhì)中通過(guò)糖酵解生成乙酰coa，乙酰coa進(jìn)入線粒體通過(guò)三羧酸循環(huán)生成檸檬酸，檸檬酸通過(guò)丙酮酸—檸檬酸穿梭機(jī)制進(jìn)入胞質(zhì)，進(jìn)入胞質(zhì)后通過(guò)三磷酸腺苷檸檬酸裂解酶(atpcitratelyase,acly)產(chǎn)生乙酰coa。乙酰輔酶a作為脂肪酸和膽固醇生物合成的基本底物，是治療mash及血脂異常的重要靶點(diǎn)，可以選擇acly作為靶點(diǎn)來(lái)抑制乙酰輔酶a的生成進(jìn)而治療mash。

3、蛋白降解靶向嵌合體(proteolysis-targeting?chimeras，protacs)是一種新型的小分子類蛋白靶向降解技術(shù)，由三部分組成，包括靶蛋白(proteinofinterest，poi)配體、e3連接酶配體(可以招募蛋白降解體系的結(jié)構(gòu))及連接二者的連接子。當(dāng)protac分子進(jìn)入細(xì)胞后，中間的連接鏈適當(dāng)?shù)卣郫B彎曲，讓其兩端分別深入兩受體疏水空腔內(nèi)部，拉近e3泛素連接酶與靶蛋白的距離，形成特異性的蛋白蛋白相互作用，在atp供能時(shí)，e3連接酶配體將其攜帶的泛素傳遞給底物蛋白，使底物蛋白泛素化，當(dāng)三元復(fù)合物解離后，被泛素化的蛋白會(huì)被蛋白酶體識(shí)別，即ups系統(tǒng)，從而實(shí)現(xiàn)靶蛋白的降解。protac藥物與傳統(tǒng)小分子藥物相比具有很多優(yōu)勢(shì)，如細(xì)胞毒性小、理論上可以克服耐藥性等。目前暫未見(jiàn)到將protac技術(shù)應(yīng)用到mash的相關(guān)報(bào)道。

4、由此，基于protac技術(shù)的acly蛋白降解劑作為治療mash的藥物研發(fā)具有良好前景，為mash治療帶來(lái)新希望，同時(shí)拓寬protac技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域，有必要對(duì)其進(jìn)行研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足之處，提供一種以甘醇鏈為連接鏈的具有抗mash活性的acly靶向protac嵌合體、方法和應(yīng)用。

2、本發(fā)明解決其技術(shù)問(wèn)題所采用的技術(shù)方案是：

3、一種以甘醇鏈為連接鏈的具有抗mash活性的acly靶向protac嵌合體，其結(jié)構(gòu)通式為式1：

4、

5、式中，r為-(ch2-o-ch2)n-，n為2～6。

6、所述protac嵌合體的結(jié)構(gòu)具體為：

7、

8、一種如上所述的protac嵌合體的制備方法，通過(guò)式2化合物和式3化合物反應(yīng)制得：

9、

10、式2中，r為-(ch2-o-ch2)n-，n為2～6。

11、進(jìn)一步地，所述式2通過(guò)式4和式5反應(yīng)制得：

12、

13、式4中，r為-(ch2-o-ch2)n-，n為2～6。

14、式3通過(guò)式9和式10反應(yīng)制得：

15、

16、進(jìn)一步地，所述式4通過(guò)式6和式7反應(yīng)制得：

17、

18、式6中，r為-(ch2-o-ch2)n-，n為2～6。

19、式9通過(guò)式11和式12反應(yīng)制得：

20、

21、進(jìn)一步地，所述式6通過(guò)式5和式8反應(yīng)制得：

22、

23、式8中，r為-(ch2-o-ch2)n-，n為2～6。

24、進(jìn)一步地，式10通過(guò)式13和式14反應(yīng)制得：

25、

26、進(jìn)一步地，反應(yīng)式如下：

27、

28、式中，r為-(ch2-o-ch2)n-，n為2～6。

29、的制備方法如下：

30、

31、如上所述的protac嵌合體在制備靶向降解acly藥物中的應(yīng)用。

32、進(jìn)一步地，所述靶向降解acly藥物為抗非酒精性脂肪性肝炎藥物；

33、或者，所述藥物為在人肝癌細(xì)胞hepg2、人正常肝細(xì)胞l02、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞huvec中低毒的藥物；

34、或者，將所述protac嵌合體和輔料聯(lián)合，制得藥學(xué)上可接受的相應(yīng)藥物制劑。

35、本發(fā)明取得的優(yōu)點(diǎn)和積極效果為：

36、1、本發(fā)明合成的protac化合物為新化合物，在以l02及hepg2建立的高脂模型中，合成的protac化合物具有降低tg含量的活性，且與彈頭相比，合成的protac化合物在人肝癌細(xì)胞hepg2、人正常肝細(xì)胞l02、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞huvec中具有低毒活性，是一種具有低毒高效的新型抗非酒精性脂肪性肝炎的藥物。在開(kāi)發(fā)高效的治療抗非酒精性脂肪性肝炎的同時(shí)拓寬了protac技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域。

37、2、本發(fā)明提供一類依據(jù)protac技術(shù)合成acly蛋白靶向嵌合體，發(fā)現(xiàn)了一類結(jié)構(gòu)全新、具有如式1所示結(jié)構(gòu)的靶向acly蛋白的protac降解劑，其具有良好的降脂活性及acly蛋白降解活性，為新一代低毒高效的新型抗mash藥物。

38、3、本發(fā)明基于蛋白水解靶向嵌合體(protacs)的技術(shù)來(lái)開(kāi)發(fā)一類治療非酒精性脂肪肝炎(mash)的藥物，protacs化合物通過(guò)以甘醇鏈為連接鏈將acly抑制劑與e3泛素連接酶進(jìn)行連接，合理設(shè)計(jì)得到。本發(fā)明的protacs化合物能夠降低彈頭的細(xì)胞毒性，抑制tg含量的同時(shí)減緩肝臟炎癥損傷并且降低acly蛋白表達(dá)，具有治療或緩解非酒精性脂肪性肝炎的作用。

技術(shù)特征：

1.一種以甘醇鏈為連接鏈的具有抗mash活性的acly靶向protac嵌合體，其特征在于：其結(jié)構(gòu)通式為式1：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的protac嵌合體，其特征在于：所述嵌合體的具體結(jié)構(gòu)為：

3.如權(quán)利要求1或2所述的protac嵌合體的制備方法，其特征在于：所述protacs化合物合成路線如下所示。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于：b2oh合成步驟如下：

5.如權(quán)利要求1或2所述的protac嵌合體在制備靶向降解acly藥物中的應(yīng)用。

6.如權(quán)利要求1或2所述的protac嵌合體在制備抗mash藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物與醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，公開(kāi)了一種以甘醇鏈為連接鏈的具有抗MASH活性的ACLY靶向PROTAC嵌合體，其結(jié)構(gòu)通式為式1：R為?(CH<subgt;2</subgt;?O?CH<subgt;2</subgt;)<subgt;n</subgt;?，n為2～6。本發(fā)明合成的PROTAC化合物為新化合物，在以L02及HepG2建立的高脂模型中，合成的PROTAC化合物具有降低TG含量的活性，且與彈頭相比，合成的PROTAC化合物在人肝癌細(xì)胞HepG2、人正常肝細(xì)胞L02、人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞HUVEC中具有低毒活性，是一種具有低毒高效的新型抗非酒精性脂肪性肝炎的藥物。在開(kāi)發(fā)高效的治療抗非酒精性脂肪性肝炎的同時(shí)拓寬了PROTAC技術(shù)的應(yīng)用領(lǐng)域。

技術(shù)研發(fā)人員：滕玉鷗,王瑾瑤,王家文,白蘇樂(lè),于佳佳,薛亞明,劉振,向岑
受保護(hù)的技術(shù)使用者：天津科技大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6