本發(fā)明涉及藥物合成，具體涉及一種替爾泊肽的合成方法。

背景技術(shù)：

1、替爾泊肽(tirzepatide)是由禮來公司研發(fā)的glp-1和gip雙靶點(diǎn)激動劑。2022年5月由fda批準(zhǔn)在美國上市，用于改善成年人2型糖尿病患者的血糖(商品名為mounjaro)；并于2023年11月獲得美國fda批準(zhǔn)作為減肥藥上市(商品名為zepbound)，用于肥胖或超重的治療。在國內(nèi)，替爾泊肽分別于2024年5月和7月被批準(zhǔn)用于2型糖尿病和肥胖癥的治療。僅在2024年上半年，該藥物的全球銷售額就高達(dá)66.58億美元，并且持續(xù)放量。該藥物市場需求巨大，截止到2024年8月，仍被fda列為緊缺型藥物。因此迫切需要更加快速高效的合成方法以滿足巨大的市場需求。

2、其結(jié)構(gòu)(肽序)：nh2-tyr-aib-glu-gly-thr-ser-asp-tyr-ser-ile-aib-leu-asp-lys-ile-ala-asn-lys(aeea-aeea-γ-glu-eicosanedioic?acid)-ala-phe-val-asn-trp-leu-ile-ala-gly-gly-pro-ser-ser-gly-ala-pro-pro-pro-ser-conh2。

3、其中，aeea為特殊氨基酸:2-(2-(2-氨基乙氧基)乙氧基)乙酸。

4、現(xiàn)有替爾泊肽的合成工藝大致分為兩大類：

5、第一類是fmoc固相合成方式：這類合成方法報(bào)道比較多，有依次順序進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)fmoc固相，lys脫除保護(hù)基進(jìn)行側(cè)鏈繼續(xù)偶聯(lián)合成；也有片段縮合。均存在合成周期長或損失大的問題。

6、第二類是液相拼接方式：禮來公司在申請?zhí)枮閏n113330024a的專利中，使用液相拼接的方式進(jìn)行替爾泊肽的合成，合成產(chǎn)率較低。

7、可以看出，提供一種能夠克服上述問題的替爾泊肽的合成方法是非常必要的。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種替爾泊肽的合成方法。

2、為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

3、本發(fā)明提供一種替爾泊肽的合成方法，該方法包括先分別合成全保護(hù)肽段1-17和全保護(hù)肽段18-39，隨后對所述全保護(hù)肽段1-17和全保護(hù)肽段18-39進(jìn)行液相拼接和脫保護(hù)處理，得到替爾泊肽粗肽。

4、進(jìn)一步的，該方法包括以下步驟：1)使用2-ctc樹脂為固相載體，使用fmoc固相合成策略，依次偶聯(lián)氨基酸，得到全保護(hù)的肽樹脂1-17，所述肽樹脂1-17經(jīng)軟裂解得到全保護(hù)肽段1-17；2)使用sieber樹脂為固相載體，使用fmoc固相合成策略，依次偶聯(lián)氨基酸，得到全保護(hù)的肽樹脂18-39，所述肽樹脂18-39經(jīng)軟裂解得到全保護(hù)肽段18-39；3)所述全保護(hù)肽段1-17和全保護(hù)肽段18-39經(jīng)過液相拼接得到全保護(hù)肽1-39，隨后經(jīng)過脫保護(hù)、沉降、洗滌和干燥處理，得到所述替爾泊肽粗肽。

5、進(jìn)一步的，所述步驟1)具體包括：在固相合成管中加入2-ctc樹脂，加入dmf，樹脂溶脹5分鐘；5分鐘后抽掉dmf，將fmoc-ile-oh溶于dmf，加入dipea，室溫反應(yīng)2h，抽掉溶劑，dmf洗滌三次；20％哌啶脫保護(hù)兩次，每次10min，dmf洗滌六次；隨后依次進(jìn)行后續(xù)氨基酸的縮合，得到肽樹脂1-17；所述肽樹脂1-17經(jīng)20％tfe/dcm軟裂解2h，濃縮，沉降，干燥得所述全保護(hù)肽段1-17。

6、進(jìn)一步的，所述步驟1)中2-ctc樹脂的取代度為0.5～1.3mmol/g，優(yōu)選為0.9～1.2mmol/g；可選的，所述步驟1)中縮合所用的縮合劑組合為dic/hobt，oxyma/dic，pybop/hobt/dipea，優(yōu)選為dic/hobt。

7、進(jìn)一步的，所述步驟2)具體包括：在固相合成管中加入sieber樹脂，加入dmf，樹脂溶脹5分鐘；5分鐘后抽掉dmf，20％哌啶脫保護(hù)兩次，每次10min，dmf洗滌六次；隨后依次進(jìn)行后續(xù)氨基酸的縮合，得到肽樹脂18-39；其中k20位置使用的是fmoc-lys(aeea-aeea-γ-glu(α-otbu)-eicosanedioic?acid(mon-tbu))-oh；所述肽樹脂18-39經(jīng)5％tfa/dcm軟裂解2h，濃縮，沉降，干燥得所述全保護(hù)肽段18-39。

8、進(jìn)一步的，所述步驟2)中sieber樹脂的取代度為0.3～0.9mmol/g，優(yōu)選為0.5～0.8mmol/g；可選的，所述步驟2)中縮合所用的縮合劑組合為dic/hobt，oxyma/dic，pybop/hobt/dipea，優(yōu)選為dic/hobt。

9、進(jìn)一步的，所述步驟3)具體包括：將全保護(hù)肽段1-17和全保護(hù)肽段18-39溶解于反應(yīng)溶劑中，加入縮合試劑，室溫反應(yīng)完成后，析出過濾干燥得到全保護(hù)粗肽1-39；將所述全保護(hù)粗肽1-39經(jīng)脫保護(hù)、過濾、沉降、洗滌和干燥，得到所述替爾泊肽粗肽。

10、進(jìn)一步的，所述步驟3)中縮合試劑為pybop/hobt/dipea，hatu/hobt/dipea，tbtu/hobt/dipea，hbtu/hobt/dipea，優(yōu)選為hbtu/hobt/dipea。

11、進(jìn)一步的，所述步驟3)中脫保護(hù)所用的裂解液體系為tfa/tips/edt/h2o＝91/3/3/3，裂解時間為2h；所述步驟3)沉降方式為8倍體系的甲基叔丁基醚加入到反應(yīng)體系中，可選的過濾方式為濾布過濾。

12、相較于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供的技術(shù)方案至少具有以下優(yōu)點(diǎn)：

13、本發(fā)明提供一種tirzepatide的合成方法，該本發(fā)明提供一種替爾泊肽的合成方法，該合成方法至少有三方面優(yōu)點(diǎn)：1)合成周期短，兩個肽段可同步進(jìn)行合成。2)有利于大規(guī)模制備，相比于fmoc固相合成方式，有限的合成釜體積內(nèi)可合成更多的肽段。3)獲得的替爾泊肽收率及純度均較高。

技術(shù)特征：

1.一種替爾泊肽的合成方法，其特征在于，該方法包括先分別合成全保護(hù)肽段1-17和全保護(hù)肽段18-39，隨后對所述全保護(hù)肽段1-17和全保護(hù)肽段18-39進(jìn)行液相拼接和脫保護(hù)處理，得到替爾泊肽粗肽。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟1)具體包括：

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟1)中2-ctc樹脂的取代度為0.5～1.3mmol/g，優(yōu)選為0.9～1.2mmol/g；

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟2)具體包括：

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟2)中sieber樹脂的取代度為0.3～0.9mmol/g，優(yōu)選為0.5～0.8mmol/g；

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟3)具體包括：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟3)中縮合試劑為pybop/hobt/dipea，hatu/hobt/dipea，tbtu/hobt/dipea，hbtu/hobt/dipea，優(yōu)選為hbtu/hobt/dipea。

9.根據(jù)權(quán)利要求7所述的替爾泊肽的合成方法，其特征在于，所述步驟3)中脫保護(hù)所用的裂解液體系為tfa/tips/edt/h2o＝91/3/3/3，裂解時間為2h；

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明提供了一種采取固液結(jié)合策略合成替爾泊肽的方法。首先分別合成全保護(hù)肽段(1?17)和(18?39)，隨后進(jìn)行液相拼接和脫保護(hù)得到粗肽。該策略能夠顯著縮短合成周期，有利于工業(yè)化大規(guī)模生產(chǎn)，同時合成收率較高，得到的粗肽純度和含量也較高。

技術(shù)研發(fā)人員：楊朋,唐仁錦,唐洋明,余品香
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳翰宇藥業(yè)股份有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6