本發(fā)明涉及化妝品原料，尤其涉及一種透明質(zhì)酸及其鹽的制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、透明質(zhì)酸，又稱為玻尿酸，分子式是(c14h21no11)n，是d-葡萄糖醛酸及n-乙酰葡糖胺組成的雙糖單位糖胺聚糖，簡稱ha。透明質(zhì)酸的鹽如透明質(zhì)酸鈉、透明質(zhì)酸鉀等在不同領(lǐng)域均有廣泛的應(yīng)用，特別是在醫(yī)療保健、食品制造和化妝品中都具有獨(dú)特的作用。

2、透明質(zhì)酸和透明質(zhì)酸鹽都是化妝品行業(yè)中的保濕成分，但是它們有以下區(qū)別：一、透明質(zhì)酸以酸的形式存在，透明質(zhì)酸鹽以鹽的形式存在；二、透明質(zhì)酸鹽類，如透明質(zhì)酸鈉更穩(wěn)定，加入鈉質(zhì)會變成非牛頓流體，用于去角質(zhì)非常好，而透明質(zhì)酸用于去角質(zhì)欠佳；三、市面上的透明質(zhì)酸是一種長鏈的大分子，無法穿過皮膚到達(dá)真皮層，所以透明質(zhì)酸是無法達(dá)到除皺、豐盈效果的，而通過特殊的提取手段，透明質(zhì)酸鈉可以作為小分子的透明質(zhì)酸滲透至真皮層。

3、普通的透明質(zhì)酸分子量較大、生產(chǎn)出來的成本高，影響皮膚吸收效果，其應(yīng)用也受到一定的限制。因此開發(fā)出一種新的透明質(zhì)酸及其鹽的制備方法，提高收率和純度，同時具有較佳的水溶性、吸收性、去皺和去角質(zhì)效果，具有廣泛的應(yīng)用前景。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種透明質(zhì)酸及其鹽的制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供的透明質(zhì)酸的制備方法中采用復(fù)合菌種進(jìn)行發(fā)酵，各個菌種之間合理復(fù)配，共同提高了透明質(zhì)酸的產(chǎn)量，且所得產(chǎn)品純度高，分子量低，有利于皮膚滲透和吸收，從而提高了其改善皺紋、延緩衰老、增加彈性等活性功效。

2、為達(dá)此目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供了一種透明質(zhì)酸的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

4、在復(fù)合菌種的活化液中加入葡萄糖和鹽進(jìn)行發(fā)酵，調(diào)節(jié)發(fā)酵液的ph至10-11(例如可以是10、10.2、10.4、10.6、10.8、11等)，加入乙醇進(jìn)行沉淀，經(jīng)過濾后得到透明質(zhì)酸；所述復(fù)合菌種包括長雙歧桿菌、谷氨酸棒狀桿菌、枯草芽孢桿菌和乳酸乳球菌的組合。

5、本發(fā)明采用復(fù)合菌種進(jìn)行發(fā)酵，各個菌種之間合理復(fù)配、協(xié)同增效，共同提高了透明質(zhì)酸的產(chǎn)量，且所得產(chǎn)品純度高，分子量低，有利于皮膚滲透和吸收，從而提高了其改善皺紋、延緩衰老、增加彈性等活性功效。

6、優(yōu)選地，所述復(fù)合菌種中長雙歧桿菌、谷氨酸棒狀桿菌、枯草芽孢桿菌和乳酸乳球菌的活菌數(shù)比為1:(0.5-1.5):(0.5-1.5):(0.5-1.5)。

7、上述(0.5-1.5)中的數(shù)值例如可以是0.5、0.8、1、1.2、1.5等。

8、優(yōu)選地，所述發(fā)酵中，葡萄糖的添加量為活化液質(zhì)量的47-53％(例如可以是47％、48％、49％、50％、51％、52％、53％等)。

9、優(yōu)選地，所述發(fā)酵中，鹽的添加量為活化液質(zhì)量的0.8-1.8％(例如可以是0.8％、1％、1.2％、1.4％、1.6％、1.8％等)。

10、優(yōu)選地，所述發(fā)酵中，鹽包括碳酸鈉、氯化鉀、碳酸鉀、或碳酸氫鈉中任意一種或兩種的組合。

11、優(yōu)選地，所述發(fā)酵的溫度為35-37℃(例如可以是35℃、35.5℃、36℃、36.5℃、37℃等)，時間為18-26h(例如可以是18h、20h、22h、24h、26h等)。

12、優(yōu)選地，所述發(fā)酵后還包括滅菌的操作。

13、優(yōu)選地，所述滅菌的溫度為85-90℃(例如可以是85℃、86℃、87℃、88℃、89℃、90℃等)，時間為25-35min(例如可以是25min、28min、30min、32min、35min等)。

14、優(yōu)選地，所述過濾采用的濾膜孔徑為0.02-0.2μm(例如可以是0.02μm、0.05μm、0.1μm、0.15μm、0.2μm等)。

15、優(yōu)選地，所述葡萄糖采用如下方法進(jìn)行制備，所述方法包括以下步驟：

16、將甘蔗榨汁后依次進(jìn)行酸解和酶解，將酶解液過濾取濾液，調(diào)節(jié)ph至6.5-7.5(例如可以是6.5、6.8、7、7.2、7.5等)，經(jīng)萃取濃縮、滅菌和活性炭過濾后，降溫結(jié)晶得到葡萄糖；所述酶解采用的復(fù)合酶包括葡糖淀粉酶和蔗糖酶。

17、本發(fā)明中，采用甘蔗提取葡萄糖的制備方法具有較高的收率和純度，降低了葡萄糖的使用成本；其中的酶解工藝中采用葡糖淀粉酶和蔗糖酶的復(fù)合酶，將甘蔗汁中的淀粉類和糖類物質(zhì)轉(zhuǎn)化成葡萄糖，兩種酶之間具有協(xié)同作用，共同提高了酶解的效率。

18、優(yōu)選地，所述酸解采用的酸劑包括稀鹽酸。

19、優(yōu)選地，所述稀鹽酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為1.5-2.5％(例如可以是1.5％、1.6％、1.8％、2％、2.2％、2.4％、2.5％等)，所述稀鹽酸和甘蔗汁的質(zhì)量比為1:(8-12)(例如可以是1:8、1:9、1:10、1:11、1:12等)。

20、優(yōu)選地，所述酸解的溫度為80-90℃(例如可以是80℃、82℃、84℃、86℃、88℃、90℃等)，壓力為0.6-1mpa(例如可以是0.6mpa、0.7mpa、0.8mpa、0.mpa、1mpa等)，時間為2-2.5h(例如可以是2h、2.1h、2.2h、2.3h、2.4h、2.5h等)。

21、優(yōu)選地，所述酶解中，復(fù)合酶的用量為底物質(zhì)量的3-5％(例如可以是3％、3.5％、4％、4.5％、5％等)。

22、優(yōu)選地，所述葡糖淀粉酶和蔗糖酶的質(zhì)量比為1:(0.5-1.5)(例如可以是1:0.5、1:0.8、1:1、1:1.2、1:1.5等)。

23、優(yōu)選地，所述酶解的溫度為50-55℃(例如可以是50℃、51℃、52℃、53℃、54℃、55℃等)，時間為24-48h(例如可以是24h、32h、40h、48h等)。

24、第二方面，本發(fā)明提供了一種透明質(zhì)酸鹽的制備方法，所述制備方法包括以下步驟：

25、(1)采用第一方面所述的透明質(zhì)酸的制備方法制備透明質(zhì)酸；

26、(2)將透明質(zhì)酸、鹽和水混合溶解，經(jīng)一次絡(luò)合沉淀后，得到透明質(zhì)酸鹽粗品；將透明質(zhì)酸鹽粗品、鹽和水混合溶解，經(jīng)二次絡(luò)合沉淀后，得到透明質(zhì)酸鹽；所述鹽包括鈉鹽或鉀鹽。

27、本發(fā)明提供的透明質(zhì)酸鹽的制備方法操作簡單，成本較低，提高了透明質(zhì)酸的活性、溶解性和透皮吸收效果，具有優(yōu)異的保濕效果，可以廣泛應(yīng)用于化妝品中。

28、優(yōu)選地，步驟(2)中，所述透明質(zhì)酸和鹽的溶解液中，透明質(zhì)酸的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-15％(例如可以是10％、11％、12％、13％、14％、15％等)，鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40-45％(例如可以是40％、41％、42％、43％、44％、45％等)。

29、優(yōu)選地，所述透明質(zhì)酸鹽粗品和鹽的溶解液中，透明質(zhì)酸鹽粗品的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10-15％(例如可以是10％、11％、12％、13％、14％、15％等)，鹽的質(zhì)量分?jǐn)?shù)為40-45％(例如可以是40％、41％、42％、43％、44％、45％等)。

30、優(yōu)選地，所述鈉鹽包括碳酸鈉。

31、優(yōu)選地，所述鉀鹽包括氯化鉀。

32、優(yōu)選地，所述一次絡(luò)合和二次絡(luò)合在攪拌的條件下進(jìn)行。

33、優(yōu)選地，所述攪拌的速率各自獨(dú)立地為600-800rpm(例如可以是600rpm、650rpm、700rpm、750rpm、800rpm等)。

34、優(yōu)選地，所述一次絡(luò)合和二次絡(luò)合的溫度各自獨(dú)立地為5-20℃(例如可以是5℃、10℃、15℃、20℃等)。

35、優(yōu)選地，所述二次絡(luò)合沉淀后還包括：使用凝膠層析法純化，經(jīng)噴霧干燥，得到透明質(zhì)酸鹽。

36、第三方面，本發(fā)明提供了一種根據(jù)第一方面所述的透明質(zhì)酸的制備方法、第二方面所述的透明質(zhì)酸鹽的制備方法在制備化妝品中的應(yīng)用。

37、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明至少具有以下有益效果：

38、(1)本發(fā)明提供的透明質(zhì)酸的制備方法中采用復(fù)合菌種進(jìn)行發(fā)酵，各個菌種之間合理復(fù)配、協(xié)同增效，共同提高了透明質(zhì)酸的產(chǎn)量，且所得產(chǎn)品純度高，分子量低，有利于皮膚滲透和吸收，從而提高了其改善皺紋、延緩衰老、增加彈性等活性功效。

39、(2)本發(fā)明提供的透明質(zhì)酸鹽的制備方法操作簡單，成本較低，進(jìn)一步提高了透明質(zhì)酸的活性、溶解性和透皮吸收效果，具有優(yōu)異的保濕效果，可以廣泛應(yīng)用于化妝品中。