本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及一種小分子化合物tii-c2及其在制備治療tradd相關(guān)自身免疫性疾病的藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、腫瘤壞死因子(tumor?necrosis?factor，tnf)受體1型相關(guān)死亡結(jié)構(gòu)域蛋白(tnfreceptor?type?1-associated?death?domain?protein，tradd)是一種獨(dú)特的適配蛋白，它在不同細(xì)胞環(huán)境中的多種下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件(包括細(xì)胞存活和凋亡)中發(fā)揮著核心作用。tradd包含n端tnf受體相關(guān)因子2(tnf?receptor-associated?factor?2，traf2)結(jié)合域和c端死亡結(jié)構(gòu)域(death?domain，dd)。tradd以tnf依賴的方式被募集到tnf受體1(tnfreceptor?1，tnfr1)上，作為募集其他蛋白的平臺(tái)。tradd-n端與traf2相互作用，并將traf2募集到tnfr1上，從而激活核因子κb(nuclear?factor-κb，nf-κb)、c-jun氨基末端激酶(c-jun?n-terminal?kinase，jnk)和絲裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase，mapk)通路，產(chǎn)生促炎促增殖和抗凋亡反應(yīng)。另一方面，當(dāng)nf-κb激活受到抑制時(shí)，tradd與受體相互作用蛋白激酶1(receptor-interacting?protein?kinase?1，ripk)和fas相關(guān)死亡域蛋白(fas-associated?death?domain?protein，fadd)結(jié)合，啟動(dòng)細(xì)胞凋亡級(jí)聯(lián)反應(yīng)。鑒于tradd在調(diào)節(jié)細(xì)胞存活、炎癥和凋亡中的關(guān)鍵作用，tradd一直被認(rèn)為是人類疾病治療的一個(gè)有前景的藥物靶點(diǎn)。然而，tradd抑制劑的研究還處于基礎(chǔ)研究階段，實(shí)際應(yīng)用還有很長的路要走。

2、自身免疫性疾病是機(jī)體對(duì)自身抗原發(fā)生免疫反應(yīng)而導(dǎo)致自身組織損害所引起的一類疾病。tnf-α在一些自身免疫性疾病中過量產(chǎn)生，如類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎(rheumatoidarthritis，ra)、銀屑病和克羅恩病(crohn?disease，cd)，導(dǎo)致關(guān)節(jié)侵蝕、纖維化和結(jié)構(gòu)形成。tnf-α/tnfr1信號(hào)的持續(xù)激活主要促進(jìn)炎癥和組織變性。tradd作為tnfr1下游信號(hào)傳遞的核心蛋白，tradd與traf2的結(jié)合傳遞tnfr1下游信號(hào)可能是自身免疫性疾病發(fā)生的起始機(jī)制之一。ra是一種典型的自身免疫性疾病，以滑膜炎為主要特征，導(dǎo)致關(guān)節(jié)變形，甚至喪失關(guān)節(jié)功能。成纖維細(xì)胞樣滑膜細(xì)胞(fibroblast-like?synoviocytes，flss)是ra患者滑膜組織中的主要細(xì)胞類型之一，是ra發(fā)病過程中的關(guān)鍵效應(yīng)細(xì)胞。flss類腫瘤樣異常增殖，侵襲和遷移，導(dǎo)致持續(xù)的滑膜炎癥及軟骨和骨組織的破壞，促進(jìn)關(guān)節(jié)畸形和功能喪失。flss是ra患者滑膜組織中的主要細(xì)胞類型之一，在ra發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮著關(guān)鍵作用。因此，如何有效抑制flss異常增殖對(duì)治療ra具有重要的臨床意義，為治療ra藥物的研發(fā)提供了可行的方向。

3、目前，生物制劑，如tnf-α和白介素(interleukin，il)-6抑制劑，用于治療多種自身免疫性疾病，如ra、強(qiáng)直性脊柱炎、銀屑病、潰瘍性結(jié)腸炎和cd等，已經(jīng)改變了一些疾病的原有療法。然而，約20-30％的患者對(duì)這些生物制劑療法無應(yīng)答，且生物制劑長期使用也會(huì)帶來許多的不良反應(yīng)，包括增加嚴(yán)重感染和惡性腫瘤的發(fā)病風(fēng)險(xiǎn)等。此外，生物制劑費(fèi)用昂貴，部分患者不能承受。不良反應(yīng)和費(fèi)用問題限制了抗tnf-α生物制劑的臨床應(yīng)用。另外，由于自身免疫性疾病存在多種異質(zhì)性因素和復(fù)雜的免疫炎癥病理機(jī)制網(wǎng)絡(luò)，現(xiàn)有療法對(duì)部分患者的臨床療效有限。因此，目前仍需確定自身免疫性疾病的新靶點(diǎn)和治療策略。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明提供了一種小分子化合物tii-c2及其在制備治療tradd相關(guān)自身免疫性疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明小分子化合物tii-c2可以與tradd結(jié)合，抑制tradd-traf2的結(jié)合，抑制tnfr1下游信號(hào)通路的活化以及flss的異常增殖。tii-c2對(duì)小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)(delayed-type?hypersensitivity，dth)模型的炎癥免疫反應(yīng)具有良好的抑制作用。另外，tii-c2抑制flss異常增殖并恢復(fù)免疫穩(wěn)態(tài)，改善小鼠膠原誘導(dǎo)性關(guān)節(jié)(collagen?induced?arthritis，cia)模型的臨床表現(xiàn)。

2、本發(fā)明小分子化合物tii-c2，其結(jié)構(gòu)如下所示：

3、

4、本發(fā)明小分子化合物tii-c2在制備治療tradd相關(guān)自身免疫性疾病的藥物中的應(yīng)用。

5、所述tradd相關(guān)自身免疫性疾病包括但不限于ra、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、綜合征、系統(tǒng)性硬化病、銀屑病、天皰瘡、炎癥性腸病、重癥肌無力、橋本甲狀腺炎、原發(fā)性抗磷脂抗體綜合征、多發(fā)性硬化、特發(fā)性視神經(jīng)炎與視神經(jīng)脊髓炎譜系疾病中的任意一種或幾種的組合，優(yōu)選為ra。

6、本發(fā)明小分子化合物tii-c2作為tradd抑制劑破壞tradd與traf2的結(jié)合，選擇性抑制tnfr1下游信號(hào)通路的活化，抑制raflss的異常增殖，發(fā)揮抗增殖作用，目前未有相關(guān)報(bào)道。在ra患者的關(guān)節(jié)內(nèi)，異常的炎癥環(huán)境促進(jìn)了flss中tnfr1信號(hào)通路的異常活化，導(dǎo)致flss的類腫瘤樣惡性增殖。本發(fā)明中的小分子化合物tii-c2作為tradd抑制劑抑制raflss的異常增殖，其具體機(jī)制是tii-c2與tradd，破壞tradd與traf2的相互結(jié)合，抑制tnfr1下游信號(hào)通路的活化，從而抑制raflss的異常增殖。

7、本發(fā)明小分子化合物tii-c2對(duì)小鼠遲發(fā)型超敏反應(yīng)模型的炎癥免疫反應(yīng)具有良好的抑制作用。另外，tii-c2有效抑制成纖維樣滑膜細(xì)胞的增殖，恢復(fù)免疫平衡，改善關(guān)節(jié)炎小鼠模型的臨床表現(xiàn)。

8、由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)及有益效果：

9、本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)一種小分子化合物tii-c2與tradd結(jié)合，發(fā)揮免疫抗增殖作用。本發(fā)明在細(xì)胞水平上驗(yàn)證tii-c2破壞tradd與traf2的相互結(jié)合，在細(xì)胞水平上驗(yàn)證tii-c2抑制mh7a細(xì)胞的增殖和遷移能力，動(dòng)物水平上驗(yàn)證tii-c2的免疫抑制能力。

10、本發(fā)明首次發(fā)現(xiàn)，tii-c2通過抑制tnfr1下游信號(hào)通路發(fā)揮抗增殖活性，并且在動(dòng)物上展現(xiàn)了極小的毒性，可以在臨床上作為組合藥物使用。因此，tii-c2有望成為自身免疫性疾病治療的新的有效手段。

11、為了研究tii-c2的藥理作用，本發(fā)明在balb/c小鼠上建立dth模型，使用羧甲基纖維素鈉、tii-c2(25mg/kg,50mg/kg,75mg/kg,100mg/kg)和潑尼松組(5mg/kg)對(duì)小鼠進(jìn)行治療。結(jié)果顯示，tii-c2可有效降低dth的耳部腫脹、脾臟和胸腺指數(shù)。

12、本發(fā)明進(jìn)一步使用dba/1小鼠建立cia模型，使用羧甲基纖維素鈉、tii-c2(80mg/kg)和依那西普(5mg/kg)對(duì)小鼠進(jìn)行治療。結(jié)果顯示，tii-c2可抑制炎癥狀態(tài)下的淋巴細(xì)胞增殖，調(diào)節(jié)t細(xì)胞亞群(th1/th2和th17和treg)的比例，抑制il-1β、il-17和tnf-α等促炎細(xì)胞因子的釋放，增強(qiáng)抗炎細(xì)胞因子il-10的表達(dá)，并改善cia小鼠脾臟和關(guān)節(jié)病理，顯著恢復(fù)cia小鼠的體重，降低全身評(píng)分、關(guān)節(jié)炎指數(shù)和關(guān)節(jié)炎腫脹數(shù)等多項(xiàng)整體指標(biāo)，改善cia小鼠的臨床表現(xiàn)。