本發(fā)明涉及在校正缺陷水平的顆粒蛋白前體(pgrn)中是有用的單克隆抗分揀蛋白(sortilin)抗體。具體而言，這些抗體可以用于額顳癡呆(ftd)和肌萎縮性側索硬化癥(als)的治療。此外，預期這些單克隆抗體還可以用于治療神經退行性障礙(如阿爾茨海默病(ad))。序列表的引用本技術包括一個或多個序列表(依照37c.f.r.1.821等等)，其是以計算機可讀介質形式披露的(文件名：0993_st25.txt，創(chuàng)建于2016年6月22日，并且大小為144kb)，將該文件通過引用以其全部內容結合在此。

背景技術：

1、分揀蛋白是一種已經被報道介導前神經營養(yǎng)因子的促凋亡效應并且介導神經營養(yǎng)因子受體的運輸和分揀的受體(等人，2012,trends?neurosci.[神經科學趨勢]2012；35(4):261-70；glerup等人，handb?exp?pharmacol[實驗藥理學手冊],2014；220:165-89，carlo等人，j?mol?med(berl).[分子醫(yī)學雜志(柏林)]2014年9月；92(9):905-11)。已經鑒定了多種分揀蛋白配體，包括通過x射線晶體學將其高親和力結合位點定位到分揀蛋白分子的β螺旋槳通道內的神經降壓素(quistgaard等人，nat?struct?mol?biol.[自然結構與分子生物學]2009年1月；16(1):96-8；quistgaard等人，protein?sci.[蛋白質科學]2014年9月；23(9):1291-300)。最近，顯示分揀蛋白作為生長因子顆粒蛋白前體(pgrn)的高親和力受體起作用(pgrn,hu等人，neuron.[神經元]2010年11月18日；68(4):654-67)。

2、pgrn((前上皮因子，顆粒體蛋白-上皮因子前體，pc細胞衍生的生長因子，acrogranin))是一種具有抗炎和神經營養(yǎng)樣作用的分泌型糖基化蛋白(關于最新綜述，nguyen,trends?endocrinol?metab.[內分泌與代謝趨勢]2013年12月；24(12):597-606)。pgrn被蛋白水解地切割為顆粒體蛋白，但是關于pgrn和顆粒體蛋白的生理作用以及其受體的身份還有許多需要了解。pgrn已經被牽涉于若干細胞功能中，包括細胞周期調節(jié)和細胞運動(he,z.&bateman,a.,j.moi.med.[分子醫(yī)學雜志]57:600-612(2003)；monami,g.等人，cancer?res.[癌癥研究](5(5:7103-7110(2006))、創(chuàng)面修復、炎癥(zhu,j.等人，cell[細胞]777:867-878(2002))、生長因子(如血管內皮生長因子(vegf))的誘導(tangkeangsiπsin,w.&serrero,g,carcinogenesis[致癌作用]25.1587-1592(2004))以及腫瘤發(fā)生(he,z.&bateman,a.,j.moi.med.[分子醫(yī)學雜志]81:600-612(2003),monami,g.等人，cancerres[癌癥研究](5(5:7103-7110(2006)；serrero,g.,biochem?biophys.res.commun.[生物化學和生物物理研究通訊]505-409-413(2003)，lu,r&serrero,g.,proc.natl?acad?sciu.sa[美國國家科學院院刊]98?142-147(2001)；liau,l?m.,等人，cancer?res[癌癥研究].60:1353-1360(2000))。已經報道pgrn結合tnf受體(tang?w等人，science[科學]2011，332(6028):478-84)，但是這種觀察已經受到了別人的質疑(chen等人，j?neurosci.[神經科學雜志]2013，33(21):9202-9213)。

3、pgrn與分揀蛋白的結合已經被映射到神經降壓素位點并且被報道按與神經降壓素類似的方式僅由pgrn?c末端結構域介導(zheng等人，plos?one.[公共科學圖書館期刊]2011；6(6):e21023；lee等人，hum?mol?genet.[人分子遺傳學]2013)，并且與其一致，已經顯示神經降壓素阻斷分揀蛋白與pgrn以及其他配體的相互作用。結合后，分揀蛋白介導pgrn的溶酶體清除并且由此調節(jié)細胞外pgrn水平(hu等人，2010)。因此，已經顯示分揀蛋白的敲減或過表達調節(jié)細胞培養(yǎng)物中的細胞外pgrn水平(carrasquillo等人，am?j?humgenet.[美國人遺傳學雜志]2010年12月10日；87(6):890-7)，并且在小鼠中，報道分揀蛋白缺陷增加pgrn水平并且恢復pgrn+/-小鼠中的血漿和腦pgrn水平(hu等人，2010)。有趣的是，分揀蛋白附近的單核苷酸多態(tài)性(snp)與降低的血漿pgrn水平和增加的分揀蛋白mrna水平相關(carrasquillo等人，am?j?hum?genet.[美國人遺傳學雜志]2010年12月10日；87(6):890-7)。這些觀察表明分揀蛋白是一種關鍵的細胞外pgrn調節(jié)劑。

4、pgrn已經與額顳癡呆(ftd，一種由行為和語義改變表征的進行性癡呆)以及額顳葉退化(ftld)和含有tar?dna結合蛋白-43(tdp-43)的神經元包涵體或τ包涵體聯(lián)系(baker等人，2006，nature.[自然]2006年8月24日；442(7105):916-9；cruts等人，2006，nature[自然].2006年8月24日；442(7105):916-9；cruts等人，nature[自然]442:920-924(2006)；amj?hum?genet.[美國人遺傳學雜志]2010年12月10日；87(6):890-7，m等人，trends?ingenetics[遺傳學趨勢]24:186-194(2008))。大部分的散發(fā)性和家族性ftd病例顯示出與als類似的tdp-43病理學(約50％)，并且ftd-tdp43和als被一些人認為構成疾病譜(ito?dneurology.[神經病學]2011年10月25日；77(17):1636-43；boxer?al等人，alzheimersdement.[阿爾茨海默病與癡呆癥]2013年3月；9(2):176-88；rademakers等人，nat?revneurol.[神經病學自然評論]2012年8月；8(8):423-434)，這是由于共同的病理和遺傳因素以及癥狀學中的一些重疊。沒有可供ftd用的疾病修飾治療選擇。具有tdp-43病理學的一小群額顳癡呆患者在顆粒體蛋白基因(grn)中具有功能缺失突變，從而導致pgrn單倍型不足。顆粒體蛋白基因中的超過75個不同突變(全部都導致pgrn水平和/或功能減少)已經與ftd相關聯(lián)并且據信升高血漿和腦中的細胞外pgrn將阻礙疾病過程。

5、pgrn突變還已經與阿爾茨海默病(ad)聯(lián)系(sheng等人，2014,gene.[基因]2014年6月1日；542(2):141-5；brouwers等人，2008,neurology.[神經病學]2008年8月26日；71(9):656-64)，表明pgrn缺陷可能在ad發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用。此外，已經在小鼠ad模型中觀察到pgrn的神經保護作用(minami等人，2014,nat?med.[自然醫(yī)學]2014年10月；20(10):1157-64)，從而為以下觀點提供支持，即增強的pgrn在ad和可能地其他神經退行性疾病中可能是有益的。

6、本技術描述了抗人分揀蛋白抗體的產生和鑒定，這些抗體可以調節(jié)細胞模型和小鼠中的pgrn。那些抗體出人意料地結合到分揀蛋白上的遠離先前報道的顆粒蛋白前體結合位點(所謂的神經降壓素-位點)的區(qū)域，并且仍能夠增加細胞外pgrn。

7、諸位發(fā)明人已經定義了六個分揀蛋白結合區(qū)并且鑒定出結合區(qū)域(“e區(qū)”)的有效的抗體。這些抗體不阻斷pgrn與分揀蛋白的結合，但影響/增加pgrn水平，表明這些抗體具有新穎的作用模式。因為pgrn具有神經保護和抗炎作用，諸位發(fā)明人的發(fā)現(xiàn)指示靶向分揀蛋白的此類抗體在一系列神經退行性障礙(包括ftd/ftld)的治療中可能具有有益效果。具有tdp-43病理學的一個亞組的ftd/ftld患者在編碼pgrn的基因中攜帶突變，從而導致pgrn單倍型不足。預期分揀蛋白抗體可阻礙此pgrn缺陷并且可能對于患有其中pgrn水平可以影響tdp43功能和病理的其他tdp-43蛋白病(包括als)的患者，以及在其中增加的pgrn功能可能是神經保護性的其他神經退行性疾病(包括ad)中具有類似的治療益處。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的諸位發(fā)明人已經產生了單克隆抗體，這些抗體能夠出人意料地結合到被命名為如在seq?id?no:146中所定義的“e-區(qū)”的新穎分揀蛋白區(qū)，并且能夠調節(jié)患者腦中的pgrn水平。

2、本發(fā)明還涉及一種預防或治療與患者的腦中降低的pgrn水平相關的疾病的方法，該方法包括給予有效劑量的結合到分揀蛋白的e-區(qū)的抗體或其抗原結合片段。特別地，這些疾病包括ftd、als和蛋白病(如ad、pd)。