本發(fā)明涉及植物病害防治,具體涉及一種防治柑橘潰瘍病的吸水鏈霉菌sh-37菌株及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、柑橘是我國重要的水果品種,是我國種植面積最大、產(chǎn)量最高和消費量最大的水果。我國是柑橘的重要原產(chǎn)地,是世界上最大的柑橘生產(chǎn)國,柑橘種植面積超過了4000萬畝,年產(chǎn)量超過8000萬噸,種植面積和產(chǎn)量均位居世界前列。
2、柑橘潰瘍病(citrus?bacterial?canker?disease,cbcd)病原為地毯黃單胞柑橘致病變種(學(xué)名:xanthomonas?campestris?pv.citri),可為害數(shù)十種蕓香科植物,特別是柑橘屬中的重要商品化栽培品種,對生產(chǎn)危害極大,是柑橘三大重要病害之一,為世界性的植物檢疫性病害。柑橘潰瘍病起源于亞洲南部熱帶地區(qū),現(xiàn)在主要遍布包括亞洲、太平洋和印度洋島嶼以及美洲等地區(qū)的30多個國家。發(fā)病果園損失率一般10~20%,嚴(yán)重的可達(dá)30%以上。在25-30℃條件下,雨量與發(fā)病成正相關(guān)。每次新梢生長都有一個發(fā)病高峰,尤以夏、秋梢較重。
3、柑橘潰瘍病為害柑橘葉片、枝條和果實等部位,主要造成顯著的斑痕狀損傷,病害擴展嚴(yán)重時,也造成落葉、枯稍和落果等。果實受害輕者帶有病疤,降低果實商品價值,不耐貯藏,重則落果、爛果,降低產(chǎn)量。在柑橘抽嫩梢和出幼果時期,伴隨濕熱天氣,潰瘍病易大發(fā)生。柑橘潰瘍病是一種典型的局部侵染的葉部病害,在氣溫適宜條件下,雨量與病害的發(fā)生成正相關(guān)。高溫多雨季節(jié)有利于病菌的繁殖和傳播,病害發(fā)生嚴(yán)重,一般在春梢、夏梢、秋梢抽出后20天左右都要噴藥預(yù)防,即在新梢長出1cm長時噴第一次藥,以后每星期噴一次。在防治上主要使用化學(xué)農(nóng)藥,用藥頻繁、費用高、且污染嚴(yán)重,因此,尋求有效且綠色生態(tài)的防治辦法勢在必行。采用生物防治方法,通過拮抗微生物,有效降低病原菌的密度、活力及感染作物的能力,進(jìn)而達(dá)到防治植物病害的效果。
4、放線菌是細(xì)菌域里一個重要的分支,具有產(chǎn)生抗性代謝產(chǎn)物的巨大潛能。迄今發(fā)現(xiàn)的抗生素上萬種,其中有半數(shù)以上由放線菌產(chǎn)生。在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中,也常使用鏈霉菌相關(guān)制劑來防治植物病害。吸水鏈霉菌(streptomyces?hygroscopicus)能夠產(chǎn)生多種重要代謝活性物質(zhì),在農(nóng)業(yè)和醫(yī)學(xué)等領(lǐng)域中發(fā)揮了重要作用,具有很大的開發(fā)利用潛力。如專利cn117660260?a公開了兩株吸水鏈霉菌sh1和sh2,及其在防治瓜類枯萎病、植物炭疽病、植物葉斑病、植物灰霉病、植物菌核病、瓜類蔓枯病和/或火龍果潰瘍病中的應(yīng)用;專利cn117965370a公開了一株吸水鏈霉菌jn3-4,及其在防治聚生小穴殼菌、紅小豆炭疽病菌、紅松立枯病菌、玉米大斑病菌、煙草靶斑病菌、水稻惡苗病菌、甜瓜蔓割病菌、辣椒炭疽病菌、梨波氏盤果腐病菌、黃瓜菌核病菌、藍(lán)莓潰瘍病菌、落葉松枯梢病菌等致病菌中的應(yīng)用。然而目前還未見用于防治柑橘潰瘍病的吸水鏈霉菌的相關(guān)報道。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的上述缺陷和不足,提供一種防治柑橘潰瘍病的吸水鏈霉菌sh-37菌株。
2、本發(fā)明的第二個目的在于提供一種防治柑橘潰瘍病的鏈霉菌發(fā)酵液和生物制劑。
3、本發(fā)明的第三個目的在于提供一種包含鏈霉菌、鏈霉菌發(fā)酵液或鏈霉菌生物制劑在防治柑橘潰瘍病中的應(yīng)用。
4、本發(fā)明提供一種防治柑橘潰瘍病的吸水鏈霉菌sh-37菌株,所述菌株于2024年4月26日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(gdmcc),保藏編號為gdmccno:64572。
5、本發(fā)明將2021年12月30日從肇慶四會采集的香蕉園土壤經(jīng)常規(guī)稀釋平板法分離得到的一株sh-37菌株。所述菌株在高氏1號培養(yǎng)基上培養(yǎng)5天后觀察,其單菌落為圓形,淡紫灰色,邊緣整齊無皺褶,氣生菌絲白色、不發(fā)達(dá)。所述菌株的16s?rrna基因序列為seq?idno.1,通過分子生物學(xué)鑒定結(jié)合其形態(tài)學(xué)特征,將sh-37菌株鑒定為鏈霉菌屬的吸水鏈霉菌(streptomyces?hygroscopicus)。所述菌株已于2024年4月26日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(gdmcc),菌種保藏編號為gdmcc?no:64572,分類命名為streptomyces?sp.sh-37,保藏地址為廣東省廣州市先烈中路100號。
6、本發(fā)明還提供一種含有上述吸水鏈霉菌sh-37菌株的防治柑橘潰瘍病的鏈霉菌發(fā)酵液。
7、具體為將上述吸水鏈霉菌sh-37菌株在ph為7.3發(fā)酵液體培養(yǎng)基中震蕩培養(yǎng)得到鏈霉菌發(fā)酵液。
8、本發(fā)明還提供一種含有上述吸水鏈霉菌sh-37菌株或上述鏈霉菌發(fā)酵液或其發(fā)酵上清液的防治柑橘潰瘍病的鏈霉菌生物制劑。
9、本發(fā)明還提供所述鏈霉菌生物制劑的制備方法,將上述吸水鏈霉菌sh-37菌株接種培養(yǎng)得到種子液,再將種子液接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基中培養(yǎng),得到發(fā)酵液,或再離心得發(fā)酵上清液。
10、優(yōu)選地,為將上述吸水鏈霉菌sh-37菌株接種在pd培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)3天,得到種子液;再將種子液接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基中,震蕩培養(yǎng)10天,得到發(fā)酵液,或再離心得發(fā)酵上清液,即為生物制劑。
11、本發(fā)明測定sh-37菌株對柑橘潰瘍病菌具有明顯抑制作用,皿內(nèi)抑菌圈直徑達(dá)1.5cm以上。同時進(jìn)一步的離體葉片防效測定結(jié)果顯示sh-37菌株發(fā)酵液對柑橘潰瘍病菌具有明顯防治作用。
12、因此,本發(fā)明還提供含有上述吸水鏈霉菌sh-37菌株、上述鏈霉菌發(fā)酵液或上述鏈霉菌生物制劑在防治柑橘潰瘍病或在制備防治柑橘潰瘍病的制劑中的應(yīng)用。
13、本發(fā)明還提供含有上述吸水鏈霉菌sh-37菌株、上述鏈霉菌發(fā)酵液或上述鏈霉菌生物制劑在抑制柑橘潰瘍病菌或在制備抑制柑橘潰瘍病菌的制劑中的應(yīng)用。具體為將上述吸水鏈霉菌sh-37菌株、上述鏈霉菌發(fā)酵液或上述鏈霉菌生物制劑經(jīng)配制后直接涂布在患病植物上。
14、本發(fā)明提供一種體外抑制柑橘潰瘍病菌的方法,為直接將上述吸水鏈霉菌sh-37菌株、上述鏈霉菌發(fā)酵液或上述鏈霉菌生物制劑接種到柑橘潰瘍病菌的表面。
15、本發(fā)明提供一種防治農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上柑橘潰瘍病害的方法,采用上述吸水鏈霉菌sh-37菌株、上述鏈霉菌發(fā)酵液或上述鏈霉菌生物制劑對患柑橘潰瘍病的植物進(jìn)行處理。
16、進(jìn)一步地,所述患病植物為柑橘。
17、進(jìn)一步地,所述柑橘潰瘍病為地毯黃單胞柑橘致病變種引起的柑橘潰瘍病。
18、與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明具有以下有益效果:
19、本發(fā)明提供了一種防治柑橘潰瘍病的吸水鏈霉菌sh-37菌株,所述sh-37菌株于2024年4月26日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(gdmcc),保藏編號為gdmcc?no:64572。所述sh-37菌株對柑橘潰瘍病菌具有較強抑菌作用,對柑橘潰瘍病有明顯的防治效果,可為柑橘潰瘍病綜合防治提供新的有效防治手段和技術(shù)支持,符合綠色環(huán)保及農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展的需求。
1.一種防治柑橘潰瘍病的吸水鏈霉菌(streptomyces?sp.)sh-37菌株,其特征在于,所述菌株于2024年4月26日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心(gdmcc),保藏編號為gdmccno:64572。
2.一種防治柑橘潰瘍病的鏈霉菌發(fā)酵液,其特征在于,所述鏈霉菌發(fā)酵液含有權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株。
3.一種防治柑橘潰瘍病的鏈霉菌生物制劑,其特征在于,所述鏈霉菌生物制劑含有權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株、權(quán)利要求2所述的鏈霉菌發(fā)酵液或權(quán)利要求2所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株發(fā)酵液的上清液。
4.權(quán)利要求3所述防治柑橘潰瘍病的鏈霉菌生物制劑的制備方法,其特征在于,將權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株培養(yǎng)得到種子液,再將種子液接種于發(fā)酵液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到發(fā)酵液,或再離心得發(fā)酵上清液。
5.權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37的菌株、權(quán)利要求2所述的鏈霉菌發(fā)酵液或權(quán)利要求3所述的鏈霉菌生物制劑在防治柑橘潰瘍病或在制備防治柑橘潰瘍病的制劑中的應(yīng)用。
6.權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株、權(quán)利要求2所述的鏈霉菌發(fā)酵液或權(quán)利要求3所述的鏈霉菌生物制劑在抑制柑橘潰瘍病菌或在制備抑制柑橘潰瘍病菌的制劑中的應(yīng)用。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述應(yīng)用,其特征在于,將吸水鏈霉菌sh-37菌株配制成菌液或生物制劑后直接涂布在患柑橘潰瘍病的植物上。
8.一種體外抑制柑橘潰瘍病菌的方法,其特征在于,權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株、權(quán)利要求2所述的鏈霉菌發(fā)酵液或權(quán)利要求3所述的鏈霉菌生物制劑接種到柑橘潰瘍病菌的表面。
9.一種防治農(nóng)業(yè)生產(chǎn)上柑橘潰瘍病害的方法,其特征在于,將權(quán)利要求1所述的吸水鏈霉菌sh-37菌株、權(quán)利要求2所述的鏈霉菌發(fā)酵液或權(quán)利要求3所述的鏈霉菌生物制劑對患柑橘潰瘍病的植物進(jìn)行處理。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述應(yīng)用或權(quán)利要求9所述方法,其特征在于,所述植物為柑橘。