本發(fā)明涉及熒光探針，尤其涉及一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、血跡作為嚴(yán)重暴力犯罪現(xiàn)場(chǎng)最常見(jiàn)與最重要的物證，蓄意或激情殺人現(xiàn)場(chǎng)一般會(huì)留下血跡，然而，涉及法庭科學(xué)的影視作品、案件專題報(bào)道在媒體上隨處可見(jiàn)，使得犯罪嫌疑人具備了較強(qiáng)的反偵察意識(shí)和能力，通常肉眼可見(jiàn)的血跡多數(shù)情況下會(huì)被嫌疑人以各種形式銷毀。在命案技術(shù)勘察過(guò)程中，在嫌疑人衣物上搜索肉眼不可見(jiàn)的血跡、作案兇器上搜索洗滌后的微量潛血及第一現(xiàn)場(chǎng)清洗過(guò)的血跡搜索確認(rèn)等多個(gè)方面都是案件偵破及完善證據(jù)鏈的關(guān)鍵操作。

2、傳統(tǒng)搜索潛在血跡的技術(shù)手段/試劑大致分為以下三類：1)色原試劑、2)化學(xué)發(fā)光試劑、3)陽(yáng)離子蛋白熒光染料，三類試劑不可疊加使用，互補(bǔ)性差，可操作性差，導(dǎo)致技術(shù)民警在勘查實(shí)踐中難于取舍，潛血檢出率、檢出效率均受到嚴(yán)重的技術(shù)性限制，該因素在很大程度上延緩了破案的進(jìn)度，甚至導(dǎo)致了命案積案的形成。

3、聚集誘導(dǎo)發(fā)光效應(yīng)(aie)材料，即通過(guò)針對(duì)不同靶向標(biāo)的物進(jìn)行特殊分子設(shè)計(jì)，利用其在稀溶液下不發(fā)光但在靶向標(biāo)的物周圍聚集態(tài)下發(fā)光增強(qiáng)的特性效應(yīng)。目前在相關(guān)領(lǐng)域研究較多的具有aie性質(zhì)的結(jié)構(gòu)包括有四苯乙烯類(tpe)和三苯胺類(tpa)，tpa具有能自由旋轉(zhuǎn)的螺旋槳結(jié)構(gòu)，是最典型的一種aie分子，其具有結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、合成簡(jiǎn)便、易修飾和aie效應(yīng)明顯等優(yōu)點(diǎn)。

4、專利技術(shù)文獻(xiàn)cn201510891442.4公開了一種吡啶乙烯基三苯胺-羅丹明熒光分子ptrh及其制備方法和應(yīng)用，該發(fā)明的熒光分子可作為聚集誘導(dǎo)熒光材料以及作為高性能熒光染料用于細(xì)胞染色及熒光成像、生物分子標(biāo)記；作為靈敏的比率型hg2+金屬離子熒光探針、ph響應(yīng)熒光探針，作為分子內(nèi)熒光共振能量轉(zhuǎn)移熒光化合物的應(yīng)用，但關(guān)于三苯胺、羅丹明熒光探針在潛血檢測(cè)上的應(yīng)用還缺少研究。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提出一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針及其制備方法和應(yīng)用，以提供一種用于潛血檢測(cè)的熒光探針，使得潛血檢出率得到進(jìn)一步提升。

2、基于上述目的，本發(fā)明提供了一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，所述含三苯胺基團(tuán)的熒光探針由酰肼化的羅丹明衍生物與4,4'-二甲酰三苯胺通過(guò)席夫堿反應(yīng)得到；所述酰肼化的羅丹明衍生物與4,4'-二甲酰三苯胺的摩爾比為2:1；

3、所述酰肼化的羅丹明衍生物的結(jié)構(gòu)如下：

4、

5、進(jìn)一步地，所述酰肼化的羅丹明衍生物的具體制備步驟如下：

6、s1：在氮?dú)夥諊?℃下，將3-(二苯氨基)苯酚、鄰苯二甲酸酐、無(wú)水氯化鋁和二氯乙烯混合，隨后在0℃下攪拌1h，然后在室溫下反應(yīng)2h，最后在45-55℃下反應(yīng)10-12h、冷卻至室溫、萃取、洗滌、干燥、純化得到預(yù)產(chǎn)物；

7、s2：將預(yù)產(chǎn)物、3-(二苯氨基)苯酚和三氟乙酸混合，在90-95℃下回流12h，得到羅丹明衍生物；

8、s3：將羅丹明衍生物溶于乙醇中，隨后滴加80％水合肼溶液，加熱回流反應(yīng)3-4h，旋干溶劑、純化，得到酰肼化的羅丹明衍生物。

9、進(jìn)一步地，步驟s1中所述3-(二苯氨基)苯酚、鄰苯二甲酸酐、無(wú)水氯化鋁和二氯乙烯的重量比為0.23-0.27:0.2-0.25:0.18-0.2:8-10。

10、進(jìn)一步地，步驟s2中所述預(yù)產(chǎn)物、3-(二苯氨基)苯酚和三氟乙酸的重量比為0.4-0.42:0.25-0.27:40-50。

11、進(jìn)一步地，步驟s3中所述羅丹明衍生物、80％水合肼溶液和乙醇的用量比為3.1-3.2g:5-8ml:20-30。

12、進(jìn)一步地，本發(fā)明還提供了一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針的制備方法，具體制備步驟如下：

13、將4,4'-二甲酰三苯胺和酰肼化的羅丹明衍生物溶于無(wú)水乙醇中，在室溫下反應(yīng)11-12h，冷卻、將其加入飽和食鹽水中沉淀、抽濾、干燥、純化，得到含三苯胺基團(tuán)的熒光探針。

14、更進(jìn)一步地，本發(fā)明還提供了一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針應(yīng)用，應(yīng)用于潛血檢測(cè)，具體操作如下：

15、將含有熒光染料探針的溶液噴涂于待測(cè)樣品表面，隨后在激發(fā)光的照射下，熒光染料探針發(fā)射出發(fā)射光，實(shí)現(xiàn)潛血的熒光成像。

16、優(yōu)選地，所述溶液為乙醇/水混合溶液，熒光探針的濃度為1×10-4mol/l。

17、優(yōu)選地，所述乙醇/水的體積比為7:3。

18、本發(fā)明的有益效果：

19、本發(fā)明通過(guò)將三苯胺衍生物和酰肼化的羅丹明衍生物相互結(jié)合，二者能夠協(xié)同提升探針的靈敏度，進(jìn)而使得熒光探針具有優(yōu)異的熒光性能，能夠適用于潛血檢測(cè)。

20、本發(fā)明通過(guò)控制酰肼化的羅丹明衍生物與三苯胺衍生物的摩爾比，使得熒光探針結(jié)構(gòu)較為穩(wěn)定，熒光團(tuán)之間的相互作用較少，進(jìn)而使得熒光性能更好，共同使得熒光探針在應(yīng)用于潛血檢測(cè)時(shí)，具有優(yōu)異的顯色效果，為刑偵破案提供了有力的幫助。

技術(shù)特征：

1.一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，其特征在于，所述含三苯胺基團(tuán)的熒光探針由酰肼化的羅丹明衍生物與4,4'-二甲酰三苯胺通過(guò)席夫堿反應(yīng)得到；所述酰肼化的羅丹明衍生物與4,4'-二甲酰三苯胺的摩爾比為2:1；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，其特征在于，所述酰肼化的羅丹明衍生物的具體制備步驟如下：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，其特征在于，步驟s1中所述3-(二苯氨基)苯酚、鄰苯二甲酸酐、無(wú)水氯化鋁和二氯乙烯的重量比為0.23-0.27:0.2-0.25:0.18-0.2:8-10。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，其特征在于，步驟s2中所述預(yù)產(chǎn)物、3-(二苯氨基)苯酚和三氟乙酸的重量比為0.4-0.42:0.25-0.27:40-50。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，其特征在于，步驟s3中所述羅丹明衍生物、80％水合肼溶液和乙醇的用量比為3.1-3.2g:5-8ml:20-30。

6.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針的制備方法，其特征在于，具體制備步驟如下：

7.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，應(yīng)用于潛血檢測(cè)，具體操作如下：

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于，所述溶液為乙醇/水混合溶液，熒光探針的濃度為1×10-4mol/l。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明涉及熒光探針技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種含三苯胺基團(tuán)的熒光探針及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針，通過(guò)將三苯胺衍生物與酰肼化的羅丹明衍生物相互結(jié)合而得到，在將本發(fā)明的含三苯胺基團(tuán)的熒光探針用于潛血檢測(cè)時(shí)，具有優(yōu)異的顯色性能，對(duì)于長(zhǎng)期放置的樣品也具有良好的顯色性能，這使得其對(duì)刑偵破案提供了強(qiáng)有力的幫助，并對(duì)陳年舊案的破案提供了理論可能。

技術(shù)研發(fā)人員：張立輝,鄭學(xué)超
受保護(hù)的技術(shù)使用者：云南先勘警用器材有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9