本申請屬于植物基因工程，尤其涉及一種含有地塞米松誘導(dǎo)系統(tǒng)的表達(dá)載體及其在番茄果實發(fā)育中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、番茄(solanum?lycopersicum)是全球范圍內(nèi)最重要的經(jīng)濟(jì)作物之一。作為世界上種植面積最廣、產(chǎn)量最高的果實蔬菜，番茄不僅是食物來源，更是重要的工業(yè)原料，廣泛用于番茄醬、番茄汁和其他加工食品的生產(chǎn)。此外，番茄因其基因組相對較小且易于操縱，已成為植物科學(xué)研究中的模式作物之一。番茄的基因組已被全面測序，并且豐富的突變體資源為研究果實發(fā)育、成熟及品質(zhì)控制等方面提供了強(qiáng)有力的工具。

2、在植物基因調(diào)控研究領(lǐng)域，糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)(簡稱gr系統(tǒng))作為一種誘導(dǎo)效率高、應(yīng)用范圍廣的植物化學(xué)誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)，已被廣泛應(yīng)用于模式植物如水稻(oryzasativa)和擬南芥(arabidopsis?thaliana)中。該系統(tǒng)通過gr載體結(jié)合地塞米松(dexamethasone，dex)的誘導(dǎo)作用，實現(xiàn)目標(biāo)基因進(jìn)入細(xì)胞核進(jìn)行精確調(diào)控。目前gr系統(tǒng)研究主要集中在植物的葉片和根部，尚未在番茄(solanum?lycopersicum)果實中進(jìn)行深入探索。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本申請的目的在于提供一種含有地塞米松誘導(dǎo)系統(tǒng)的表達(dá)載體及其在番茄果實發(fā)育中的應(yīng)用，旨在解決如何提高番茄果實品質(zhì)的技術(shù)問題。

2、為實現(xiàn)上述申請目的，本申請采用的技術(shù)方案如下：

3、第一方面，本申請?zhí)峁┮环N表達(dá)載體，包括糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)和載入所述糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)中的目的基因，所述目的基因包括slnam2基因和slnam3基因中的至少一種。

4、在一些實施例中，所述slnam2基因的核苷酸序列如seq?id?no.1所示；

5、和/或，所述slnam3基因的核苷酸序列如seq?id?no.2所示。

6、在一些實施例中，所述糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)包括plp-35s-flag載體和插入的糖皮質(zhì)激素受體核苷酸序列，所述糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

7、第二方面，本申請?zhí)峁┮环N應(yīng)用，即本申請第一方面提供的表達(dá)載體在番茄果實發(fā)育中的應(yīng)用。

8、第三方面，本申請?zhí)峁┮环N用于番茄育種的試劑盒，包括本申請第一方面提供的表達(dá)載體。

9、在一些實施例中，所述試劑盒還包括地塞米松。

10、第四方面，本申請?zhí)峁┮环N番茄育種方法，包括：

11、構(gòu)建本申請第一方面提供的表達(dá)載體；

12、將所述表達(dá)載體轉(zhuǎn)入番茄受體中進(jìn)行培養(yǎng)，得到轉(zhuǎn)基因番茄植株；

13、當(dāng)所述轉(zhuǎn)基因番茄植株長出番茄果實后，將地塞米松注入番茄果柄中進(jìn)行誘導(dǎo)培育。

14、在一些實施例中，所述轉(zhuǎn)基因番茄植株長出番茄果實的時期為破色期；

15、和/或，所述誘導(dǎo)培育包括：將所述番茄果實避光生長2～3天，然后再見光生長10～11天。

16、在一些實施例中，所述地塞米松注入番茄果柄中的注入濃度為1～30μm。

17、在一些實施例中，所述地塞米松注入番茄果柄中的注入濃度為5μm。

18、本申請通過設(shè)計一種包括糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)和目的基因(即slnam2基因和slnam3基因中的至少一種)表達(dá)載體，并可以此表達(dá)載體構(gòu)建轉(zhuǎn)基因番茄植株，通過誘導(dǎo)在番茄果實中精確調(diào)控基因表達(dá)，從而可以很好地提高番茄果實品質(zhì)。該過程對整個番茄植株生長影響小，而且可以對番茄果實實現(xiàn)特異性的精準(zhǔn)調(diào)控，為研究果實中的基因功能提供了更為精確的工具，具有很好的特異性和可靠性。因此，本申請?zhí)峁┑谋磉_(dá)載體、試劑盒以及相關(guān)的番茄育種方法和應(yīng)用有利于番茄果實品質(zhì)調(diào)控的產(chǎn)業(yè)化。

技術(shù)特征：

1.一種表達(dá)載體，其特征在于，包括糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)和載入所述糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)中的目的基因，所述目的基因包括slnam2基因和slnam3基因中的至少一種。

2.如權(quán)利要求1所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述slnam2基因的核苷酸序列如seq?idno.1所示；

3.如權(quán)利要求1或2所述的表達(dá)載體，其特征在于，所述糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)包括plp-35s-flag載體和插入的糖皮質(zhì)激素受體核苷酸序列，所述糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

4.如權(quán)利要求1-3任一項所述的表達(dá)載體在番茄果實發(fā)育中的應(yīng)用。

5.一種用于番茄育種的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1-3任一項所述的表達(dá)載體。

6.如權(quán)利要求5所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒還包括地塞米松。

7.一種番茄育種方法，其特征在于，包括：

8.如權(quán)利要求7所述的番茄育種方法，其特征在于，所述轉(zhuǎn)基因番茄植株長出番茄果實的時期為破色期；

9.如權(quán)利要求7所述的番茄育種方法，其特征在于，所述地塞米松注入番茄果柄中的注入濃度為1～30μm。

10.如權(quán)利要求7-9任一項所述的番茄育種方法，其特征在于，所述地塞米松注入番茄果柄中的注入濃度為5μm。

技術(shù)總結(jié)
本申請涉及植物基因工程技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種含有地塞米松誘導(dǎo)系統(tǒng)的表達(dá)載體及其在番茄果實發(fā)育中的應(yīng)用。本申請?zhí)峁┑谋磉_(dá)載體包括糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)和載入糖皮質(zhì)激素受體誘導(dǎo)系統(tǒng)中的目的基因，目的基因包括SlNAM2基因和SlNAM3基因中的至少一種。本申請可以此表達(dá)載體構(gòu)建轉(zhuǎn)基因番茄植株，通過誘導(dǎo)在番茄果實中精確調(diào)控基因表達(dá)，從而可以很好地提高番茄果實品質(zhì)。該過程對整個番茄植株生長影響小，而且可以對番茄果實實現(xiàn)特異性的精準(zhǔn)調(diào)控，有利于番茄果實品質(zhì)調(diào)控的產(chǎn)業(yè)化。

技術(shù)研發(fā)人員：李紫薇,黃子俊,黃騰波,鐘嘉鑫,林冬波
受保護(hù)的技術(shù)使用者：深圳大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9