本發(fā)明屬于生物，具體涉及一種金花葵myb轉(zhuǎn)錄因子及其在提高擬南芥多糖含量和耐鹽中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、在生命體的基本生理過程中，糖扮演著不可或缺的角色，特別是在能量產(chǎn)生和新陳代謝中至關(guān)重要。植物利用糖來構(gòu)建它們的結(jié)構(gòu)組件，并且糖還可以作為信號分子，參與調(diào)控植物從萌芽到衰老各個(gè)生命階段的關(guān)鍵過程?；钚远嗵蔷哂锌鼓[瘤、免疫調(diào)節(jié)、抗氧化、抗病毒及保肝等功效?；钚远嗵堑膹V泛生物活性和獨(dú)特性質(zhì)使其成為生物化學(xué)、農(nóng)業(yè)科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究的焦點(diǎn)。

2、金花葵(hibiseu?manihot?l.)，錦葵科秋葵屬一年生草本植物，別名黃蜀葵、秋葵，在我國食品、醫(yī)藥、農(nóng)業(yè)和工業(yè)方面具有較大的開發(fā)利用價(jià)值。它含有豐富的黃酮類化合物、不飽和脂肪酸、多糖及多樣微量元素，在抗氧化、抑制自由基、抵抗癌癥、調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)以及降低血脂血壓等方面的卓越表現(xiàn)。但當(dāng)前我國對金花葵的研究仍屬初級階段，仍需對其潛在價(jià)值深度挖掘。

3、植物的myb轉(zhuǎn)錄因子家族是一類至關(guān)重要的dna結(jié)合蛋白，它們的結(jié)構(gòu)特征是由50至52個(gè)氨基酸組成的高度保守肽段，這些肽段反復(fù)出現(xiàn)。核心的dna結(jié)合域，即myb結(jié)構(gòu)域。根據(jù)其myb結(jié)構(gòu)域的數(shù)量，可將myb轉(zhuǎn)錄因子家族劃分為四大亞家族：1r-myb(包括myb-related和r3?myb)、r2r3-myb、3r-myb(r1r2r3-myb)以及極其罕見的4r-myb亞家族。myb轉(zhuǎn)錄因子家族的功能多樣性涉及到園藝植物的生長發(fā)育、初級和次級代謝過程、生物及非生物壓力的應(yīng)對策略，以及激素的合成和信號傳遞等重要領(lǐng)域。研究表明，mybc1轉(zhuǎn)錄因子可以調(diào)控玉米的葉子、花朵和種子中花青素的含量。然而目前還沒有金花葵myb轉(zhuǎn)錄因子家族的功能研究報(bào)告。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)中的問題，本發(fā)明克隆了金花葵hmmyb73基因，并構(gòu)建了植物過表達(dá)載體pcambia1303-hmmyb73，轉(zhuǎn)化野生型擬南芥后獲得轉(zhuǎn)基因擬南芥，并提高了轉(zhuǎn)基因擬南芥中的可溶性糖含量和鹽脅迫的耐受性。

2、hmmyb73基因，所述hmmyb73基因的多核苷酸序列如(a)、(b)、(c)或(d)所示：

3、(a)如序列表seq?id?no：1所示的多核苷酸；或

4、(b)與seq?id?no：1的互補(bǔ)序列在嚴(yán)謹(jǐn)雜交條件能夠進(jìn)行雜交的多核苷酸，該多核苷酸所編碼蛋白質(zhì)仍具有提高多糖含量及耐鹽的功能；

5、(c)與seq?id?no：1所示的多核苷酸至少有90％或以上同源性的多核苷酸；或

6、(d)在seq?id?no：1所示的多核苷酸的基礎(chǔ)上進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)堿基的缺失、取代或插入得到的多核苷酸突變體，且該多核苷酸突變體所編碼的蛋白仍具有提高多糖含量及耐鹽的活性。

7、hmmyb73蛋白，所述hmmyb73蛋白的氨基酸序列如(a)、(b)或(c)所示：

8、(a)如序列表seq?id?no：2所示的氨基酸序列；或

9、(b)與seq?id?no：2所示的氨基酸至少有90％或以上同源性的氨基酸；或

10、(c)在seq?id?no：2所示的蛋白基礎(chǔ)上進(jìn)行一個(gè)或多個(gè)氨基酸的缺失、取代或插入得到的蛋白突變體，且該蛋白仍具有提高多糖含量及耐鹽的活性。

11、包含所述hmmyb73基因的載體。

12、包含所述hmmyb73基因的載體的工程菌。

13、檢測所述hmmyb73基因任一片段的引物。

14、所述hmmyb73基因在培育高多糖含量擬南芥中的應(yīng)用。

15、所述hmmyb73基因在培育耐鹽擬南芥中的應(yīng)用。

16、一種提高擬南芥多糖含量的方法，提高h(yuǎn)mmyb73蛋白在擬南芥中的表達(dá)水平。

17、一種提高擬南芥耐鹽的方法，提高h(yuǎn)mmyb73蛋白在擬南芥中的表達(dá)水平。

18、本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明克隆到了一個(gè)金花葵myb家族成員hmmyb73基因，發(fā)現(xiàn)其影響擬南芥多糖合成，并增強(qiáng)對鹽脅迫的耐受，通過基因工程手段創(chuàng)造轉(zhuǎn)基因擬南芥，為金花葵的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.hmmyb73基因，其特征在于，所述hmmyb73基因的多核苷酸序列如(a)、(b)、(c)或(d)所示：

2.hmmyb73蛋白，其特征在于，所述hmmyb73蛋白的氨基酸序列如(a)、(b)或(c)所示：

3.包含權(quán)利要求1所述hmmyb73基因的載體。

4.包含權(quán)利要求3所述hmmyb73基因的載體的工程菌。

5.檢測權(quán)利要求1所述hmmyb73基因任一片段的引物。

6.權(quán)利要求1所述hmmyb73基因在培育高多糖含量擬南芥中的應(yīng)用。

7.權(quán)利要求1所述hmmyb73基因在培育耐鹽擬南芥中的應(yīng)用。

8.一種提高擬南芥多糖含量的方法，其特征在于，提高h(yuǎn)mmyb73蛋白在擬南芥中的表達(dá)水平。

9.一種提高擬南芥耐鹽的方法，其特征在于，提高h(yuǎn)mmyb73蛋白在擬南芥中的表達(dá)水平。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種金花葵MYB家族成員HmMYB73基因及其在擬南芥多糖合成和對鹽脅迫的耐受性中的應(yīng)用。所述HmMYB73基因核苷酸序列如SEQ?ID?NO：1所示。重組載體pCAMBIA1303?HmMYB73包含SEQ?ID?NO：1所示的核苷酸序列。該基因參與了轉(zhuǎn)基因擬南芥中多糖的合成以及對鹽脅迫的耐受性，通過基因工程手段創(chuàng)造轉(zhuǎn)基因擬南芥，為金花葵的開發(fā)利用提供基礎(chǔ)。

技術(shù)研發(fā)人員：張濤,侯福朋,孫榮娟,石慧敏
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶師范大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/23