本發(fā)明涉及赤霉酸生產(chǎn)，特別涉及一種用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1的促進(jìn)劑及一種聯(lián)產(chǎn)ga1和ga3的發(fā)酵方法。

背景技術(shù)：

1、赤霉酸是一類四環(huán)雙萜羧酸化合物，可由綠色植物、真菌和細(xì)菌產(chǎn)生，與生長(zhǎng)素、脫落酸、細(xì)胞分裂素、乙烯合稱植物五大激素。赤霉酸自1935年首次被發(fā)現(xiàn)以來，至今已鑒定出136種不同結(jié)構(gòu)的ga，按照發(fā)現(xiàn)的先后順序依次命名為ga1、ga2……ga136，統(tǒng)稱赤霉酸類(gas)，其中具有生物活性的赤霉酸主要有g(shù)a1、ga2、ga3、ga4、ga7等。

2、1935年，赤霉酸首次在藤倉(cāng)赤霉菌發(fā)酵液中被分離出來。隨后，在多種真菌和細(xì)菌中也陸續(xù)發(fā)現(xiàn)了赤霉酸，如khan等在篩草carex?kobomugi根部分離出一株毛竹基腐病菌arthrinium?phaeos?permum，發(fā)現(xiàn)其能產(chǎn)生多種活性赤霉酸，但產(chǎn)量很低，均在10ng/ml以下。kang等從土壤中分離得到一株乙酸鈣不動(dòng)桿菌acinetobacter?calcoaceticus，發(fā)現(xiàn)其具有生產(chǎn)赤霉酸和溶解磷酸鹽的能力，但產(chǎn)量更低，其中具有生物活性的ga1、ga3和ga4產(chǎn)量?jī)H分別為0.45、6.2和2.8ng/100ml。因此其他菌種無法滿足赤霉酸工業(yè)化生產(chǎn)要求，而由藤倉(cāng)赤霉菌生產(chǎn)的ga3產(chǎn)量可達(dá)1000～1200mg/l，遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過其他可生產(chǎn)赤霉酸的菌種，因此藤倉(cāng)赤霉菌具有廣闊的應(yīng)用前景。

3、赤霉酸的生產(chǎn)方法主要3種，分別為植物1316vol.24農(nóng)藥學(xué)學(xué)報(bào)提取、化學(xué)合成和微生物發(fā)酵。雖然多數(shù)植物都可以合成赤霉酸，但是提取率很低，遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足生產(chǎn)需求；而化學(xué)合成法存在成本高、效率低、污染大等缺點(diǎn)。因此，赤霉酸的大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)主要通過微生物發(fā)酵法進(jìn)行。目前應(yīng)用最廣泛的赤霉酸為ga3，工業(yè)生產(chǎn)菌種主要是藤倉(cāng)赤霉菌，國(guó)內(nèi)ga3的工業(yè)化產(chǎn)量為1200～2000mg/l，而國(guó)外采用液態(tài)深層發(fā)酵，ga3產(chǎn)量可達(dá)3900mg/l。

4、ga1是一個(gè)高活性的赤霉酸類化合物，具有顯著的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)作用，目前尚無發(fā)酵方法生產(chǎn)ga1，在ga3的發(fā)酵生產(chǎn)中(如cn108285915a、cn113817794a、cn113957115a及cn113755343a)，ga1含量低于300ppm，無法通過如ga3的膜過濾濃縮等分離方式將ga1提純分離，ga1只能作為雜質(zhì)與廢液一起處理排放，ga1無法通過發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)。

5、因此，如何通過成為發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1成為行業(yè)亟需解決的問題。

6、上述背景技術(shù)是為了便于理解本發(fā)明，并非是申請(qǐng)本發(fā)明之前已向普通公眾公開的公知技術(shù)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述缺陷，本發(fā)明提供一種ga1促進(jìn)劑，發(fā)酵法生產(chǎn)ga3時(shí)，加入該ga1促進(jìn)劑，可以聯(lián)產(chǎn)ga1，發(fā)酵液中g(shù)a1含量達(dá)到1000ppm以上，ga1可以通過膜過濾濃縮等分離方式將ga1提純分離。

2、技術(shù)方案是：一種用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1的促進(jìn)劑，該促進(jìn)劑包括：

3、尿素1～99wt％；以及

4、檸檬酸1～99wt％。

5、進(jìn)一步地，所述尿素為20～80wt％，檸檬酸20～80wt％。

6、進(jìn)一步地，尿素為25wt％，檸檬酸75wt％。

7、本發(fā)明還提供一種聯(lián)產(chǎn)ga1和ga3的發(fā)酵方法。

8、技術(shù)方案是：一種聯(lián)產(chǎn)ga1和ga3的發(fā)酵方法，該方法包括以下步驟：

9、s1,取種子液和發(fā)酵培養(yǎng)液。

10、s2,將種子液和發(fā)酵培養(yǎng)液加入發(fā)酵罐內(nèi)。

11、s3,進(jìn)行發(fā)酵反應(yīng)；

12、其中，發(fā)酵培養(yǎng)液由發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)液與上述的用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1的促進(jìn)劑組成，促進(jìn)劑的加入量以發(fā)酵培養(yǎng)液體積計(jì)為0.5-2g/l。

13、進(jìn)一步地，所述種子液加入量為發(fā)酵培養(yǎng)液量的5-15wt％。

14、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果在于：

15、本發(fā)明通過在發(fā)酵過程中，在現(xiàn)有發(fā)酵培養(yǎng)液(即發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)液)中，加入ga1的促進(jìn)劑，在發(fā)酵法生產(chǎn)ga3時(shí)，可以聯(lián)產(chǎn)ga1，發(fā)酵液中g(shù)a1含量接近1000?ppm甚至到達(dá)1000ppm以上，使得后續(xù)ga1可以通過膜過濾濃縮等分離方式將ga1提純分離。

技術(shù)特征：

1.一種用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1的促進(jìn)劑，其特征在于，該促進(jìn)劑包括：

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1的促進(jìn)劑，其特征在于，所述尿素為20～80wt％，檸檬酸20～80wt％。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)ga1的促進(jìn)劑，其特征在于，所述尿素為25wt％，檸檬酸75wt％。

4.一種聯(lián)產(chǎn)ga1和ga3的發(fā)酵方法，其特征在于，該方法包括以下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的聯(lián)產(chǎn)ga1和ga3的發(fā)酵方法，其特征在于，所述種子液加入量為發(fā)酵培養(yǎng)液量的5-15wt％。

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的聯(lián)產(chǎn)ga1和ga3的發(fā)酵方法，其特征在于，所述發(fā)酵基礎(chǔ)培養(yǎng)液為：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種用于發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)GA1的促進(jìn)劑及聯(lián)產(chǎn)GA1和GA3的發(fā)酵方法，該促進(jìn)劑包括：尿素1～99wt％；以及檸檬酸1～99wt％。本發(fā)明可以聯(lián)產(chǎn)GA1，發(fā)酵液中GA1含量達(dá)到1000ppm以上。

技術(shù)研發(fā)人員：熊仁科,鄭志勤,景飛江,王敏,左建英,李玉婷
受保護(hù)的技術(shù)使用者：西南科技大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/26