本發(fā)明涉及核酸提取，尤其涉及核酸提取甲基化一體機。

背景技術：

1、除了在腫瘤組織中檢測甲基化以外，大量研究通過對腫瘤患者血清及其他體液中的腫瘤細胞的dna甲基化檢測輔助診斷腫瘤及判斷預后，包括肺癌患者痰及支氣管灌洗液、乳腺癌患者的乳頭抽吸物、結直腸癌患者的糞便、膀胱癌和前列腺癌患者的尿液及腫瘤患者的血漿及血清等，所以甲基化可以作為一個比較理想的腫瘤早期診斷的生物標志物和預后評估指標，對腫瘤的篩查和風險評估、早期診斷、分期分型、預后判斷及治療監(jiān)測都具有重要的意義。隨著對腫瘤發(fā)病機制的研究，基因甲基化越來越凸顯優(yōu)勢，是非常有前途的診斷癌癥的分子標志物。dna甲基化檢測技術在癌癥領域的應用目前還處于比較早期的階段，目前國內(nèi)獲批的產(chǎn)品還非常少，以分析cfdna和ctdna甲基化為基礎的技術為多種癌癥早診提供了新的途徑，而dna甲基化特征由于其敏感性、特異性和易于分析的特點很有希望成為常規(guī)的臨床腫瘤標志物。

2、全自動核酸提取及甲基化一體機是一款將dna提取純化與甲基化前處理步驟融為一體的小型自動化核酸提取轉化儀器，基于磁珠分離技術可對樣本的核酸進行高效提取純化及亞硫酸鹽轉化，其處理后的產(chǎn)物可用于基因檢測。從提取到轉化全過程自動化，減少人工操作，避免人為污染，節(jié)省實驗時間，專門用于核酸提取及甲基化。

3、目前32通量的核酸提取及甲基化一體機體積都較大，基本是都在1000mm*750mm*900mm附近，對于醫(yī)院寸土寸金的地方，實在太過龐大，且均不能解決pcr管開關蓋的問題，故而亟待提出相應的核酸提取甲基化一體機來解決上述問題。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于：為了解決上述問題，而提出的核酸提取甲基化一體機。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了如下技術方案：

3、核酸提取甲基化一體機，包括甲基化工位機構、真空吸盤臂與核酸提取臂，所述核酸提取甲基化一體機的使用方法包括以下步驟：

4、s1、結合，將磁珠與樣本中的核酸在pcr管結合，形成核酸與磁珠復合物；

5、s2、洗滌，利用核酸與蛋白、糖類等雜質之間的理化性質差異，去除雜質；

6、s3、洗脫，在50℃-60℃的環(huán)境下，將dna從磁珠上清洗下來；

7、s4、甲基化，將pcr管轉移到甲基化工位機構進行去甲基化，包括以下步驟：

8、s41、120ul亞硫酸鹽溶劑加入到pcr管；

9、s42、將加液完成的pcr管合上蓋子；

10、s43、溫控98℃維持8分鐘；

11、s44、溫控54℃維持60分鐘；

12、s45、4℃保溫10-15分鐘；

13、s46、開啟蓋子，吸取pcr管內(nèi)溶液到核酸提取工位進行再次純化。

14、優(yōu)選地，所述甲基化工位機構包括電機、加熱模塊、推板、硅膠墊、導向軸、導向連接板、用于導向軸豎直升降的推動組件以及用于位置導向連接板位置的彈性組件，所述導向軸底部通過支柱固定連接有壓板，所述導向連接板內(nèi)表壁與導向軸外表壁滑動連接，所述電機輸出端與推板外表壁固定連接。

15、優(yōu)選地，所述推動組件包括與推板固定連接的主動導向座，所述導向軸外表壁通過傾斜設置的滑槽與主動導向座內(nèi)表壁滑動連接。

16、優(yōu)選地，所述導向軸水平端兩側均固定連接擋塊，所述擋塊外表壁與導向連接板外表壁滑動連接。

17、優(yōu)選地，所述彈性組件包括彈簧，所述彈簧固定連接在推板與導向連接板之間。

18、優(yōu)選地，所述導向軸外表壁固定連接有兩組軸承，兩組所述軸承分別與導向連接板以及主動導向座內(nèi)表壁滑動連接。

19、優(yōu)選地，所述導向連接板外表壁固定連接的滑塊，所述甲基化工位機構外表壁固定連接有與滑塊滑動配合的導軌，且所述導軌外表壁固定連接限位螺釘。

20、優(yōu)選地，所述推板內(nèi)表壁固定連接有限位銷，所述限位銷與導向連接板外表壁固定連接，且所述限位銷穿設在彈簧內(nèi)部。

21、綜上所述，由于采用了上述技術方案，本發(fā)明的有益效果是：

22、1、本申請中，pcr管放置到加熱模塊上，完成結合、洗滌與洗脫之后，將120ul亞硫酸鹽溶劑加入到pcr管，通過真空吸盤臂將蓋子放置到pcr管頂部，電機開始動作，帶著推板往前移動，推板通過彈簧帶動導向連接板、壓板、滑塊向前移動，滑塊到達限位螺釘時被阻擋，此時電機帶動推板繼續(xù)前進彈簧被壓縮，主動導向座繼續(xù)向前，帶動導向軸和壓板向下移動，直至壓板壓緊硅膠墊為止，以此蓋子的自動閉合，接著維持相應時間之后，電機帶動推板往回運動，由于彈簧的作用，推板后退，導向連接板不動，主動導向座帶動導向軸和壓板向上運動，完成壓板上升動作，推板一直后退帶動壓板復位，從而完成開蓋動作，最后吸取pcr管內(nèi)溶液到核酸提取工位進行再次純化，以此完成核算提取作業(yè)的同時，通過自動進行蓋子的啟閉，提高了核酸提取效率，且由于無需增設人工工位進行蓋子的啟閉，可有效的降低核算提取甲基化一體機的占地面積。

23、2、本申請中，導向銷與推板內(nèi)表壁滑動配合的同時與導向連接板固定，且導向銷穿設在彈簧內(nèi)部，以此可限制彈簧與導向連接板的豎直偏移，還可限制推板復位的后的位置，從而進一步保證了核酸提取甲基化一體機使用的穩(wěn)定性。

技術特征：

1.核酸提取甲基化一體機，包括甲基化工位機構(18)、真空吸盤臂與核酸提取臂，其特征在于，所述核酸提取甲基化一體機的使用方法包括以下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述甲基化工位機構(18)包括電機(1)、加熱模塊(12)、推板(16)、硅膠墊(7)、導向軸(4)、導向連接板(5)、用于導向軸(4)豎直升降的推動組件以及用于位置導向連接板(5)位置的彈性組件，所述導向軸(4)底部通過支柱(8)固定連接有壓板(13)，所述導向連接板(5)內(nèi)表壁與導向軸(4)外表壁滑動連接，所述電機(1)輸出端與推板(16)外表壁固定連接。

3.根據(jù)權利要求2所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述推動組件包括與推板(16)固定連接的主動導向座(2)，所述導向軸(4)外表壁通過傾斜設置的滑槽與主動導向座(2)內(nèi)表壁滑動連接。

4.根據(jù)權利要求3所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述導向軸(4)水平端兩側均固定連接擋塊(15)，所述擋塊(15)外表壁與導向連接板(5)外表壁滑動連接。

5.根據(jù)權利要求4所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述彈性組件包括彈簧(3)，所述彈簧(3)固定連接在推板(16)與導向連接板(5)之間。

6.根據(jù)權利要求5所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述導向軸(4)外表壁固定連接有兩組軸承(14)，兩組所述軸承(14)分別與導向連接板(5)以及主動導向座(2)內(nèi)表壁滑動連接。

7.根據(jù)權利要求6所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述導向連接板(5)外表壁固定連接的滑塊(9)，所述甲基化工位機構(18)外表壁固定連接有與滑塊(9)滑動配合的導軌(6)，且所述導軌(6)外表壁固定連接限位螺釘(10)。

8.根據(jù)權利要求7所述的核酸提取甲基化一體機，其特征在于，所述推板(16)內(nèi)表壁固定連接有限位銷(17)，所述限位銷(17)與導向連接板(5)外表壁固定連接，且所述限位銷(17)穿設在彈簧(3)內(nèi)部。

技術總結
本發(fā)明公開了核酸提取甲基化一體機，包括甲基化工位機構、真空吸盤臂與核酸提取臂。本申請中，主動導向座向前，帶動導向軸和壓板向下移動，直至壓板壓緊硅膠墊為止，以此蓋子的自動閉合，接著維持相應時間之后，電機帶動推板往回運動，由于彈簧的作用，推板后退，導向連接板不動，主動導向座帶動導向軸和壓板向上運動，完成壓板上升動作，推板一直后退帶動壓板復位，從而完成開蓋動作，最后吸取PCR管內(nèi)溶液到核酸提取工位進行再次純化，以此完成核算提取作業(yè)的同時，通過自動進行蓋子的啟閉，提高了核酸提取效率，且由于無需增設人工工位進行蓋子的啟閉，可有效的降低核算提取甲基化一體機的占地面積。

技術研發(fā)人員：謝廉毅,王鑄海,姚任農(nóng),移志剛,曹帥
受保護的技術使用者：杭州芯格睿特科技有限責任公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/9