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一種用于同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的引物探針組合物、試劑盒及檢測(cè)方法與流程

文檔序號(hào):40436740發(fā)布日期:2024-12-24 15:10閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種用于同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的引物探針組合物,其特征在于,包括針對(duì)大腸桿菌ybbj基因、肺炎克雷伯氏菌mgrb基因、金黃色葡萄球菌msrb基因、無(wú)乳鏈球菌pg-mutase基因、乙型溶血性鏈球菌is3基因、伯克霍爾德氏菌16s?rrna基因、產(chǎn)氣莢膜梭菌spaa基因、諾卡菌seca1基因以及超廣譜β-內(nèi)酰胺酶耐藥基因、甲氧西林耐藥基因、碳青霉烯酶耐藥基因和萬(wàn)古霉素耐藥基因的引物探針組合物,

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的引物探針組合物,其特征在于,還包括用于檢測(cè)內(nèi)參rnasep基因的引物探針:序列如seq?id?no.46所示的上游引物rnasep-f1、序列如seq?id?no.47所示的下游引物rnasep-r1以及序列如seq?id?no.48所示的熒光探針rnasep-p1。

3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的引物探針組合物,其特征在于,所述熒光報(bào)告基團(tuán)選自fam、rox、cy5、vic;熒光淬滅基團(tuán)選自bhq1、bhq2、bhq3。

4.一種同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的試劑盒,其特征在于,包括如權(quán)利要求1所述的引物探針組合物。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的試劑盒,其特征在于,還包括:dna聚合酶、pcr反應(yīng)buffer。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括:樣本釋放劑;所述樣本釋放劑包括以下含量的各成分:體積百分比為2%的吐溫20、體積百分比為5%的曲拉通x-100、2mm的異硫氰酸胍、10mm的三羥甲基氨基甲烷鹽和1mm的乙二胺四乙酸二鈉,余量為無(wú)菌水;ph為7.4±0.2。

7.如權(quán)利要求1所述的引物探針組合物在制備檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的試劑盒的中的應(yīng)用。

8.一種同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的方法,其特征在于,包括以下步驟:

9.根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法,其特征在于,還包括以下步驟:

10.根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法,其特征在于,所述s1步驟中,待測(cè)樣本的預(yù)處理方法為:使用拭子擦拭皮膚軟組織感染患者的感染處皮膚軟組織,將采樣后拭子放入到樣本釋放劑中,渦旋混勻,室溫靜置后,上清液可作為pcr實(shí)驗(yàn)的擴(kuò)增模板。


技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于分子生物學(xué)技術(shù)領(lǐng)域,公開(kāi)了一種用于同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的引物探針組合物、試劑盒及檢測(cè)方法,用于同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)病原體及其耐藥基因的引物探針組合物,其包括針對(duì)大腸桿菌、肺炎克雷伯氏菌、金黃色葡萄球菌、無(wú)乳鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌、伯克霍爾德氏菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、諾卡菌以及β?內(nèi)酰胺酶耐藥基因、甲氧西林耐藥基因、碳青霉烯酶耐藥基因和萬(wàn)古霉素耐藥基因的引物探針組合物,序列分別如SEQ?ID?NO.1~45所示。所述引物探針組合物及試劑盒的特異性高,檢測(cè)靈敏度高,可在一管內(nèi)同時(shí)檢測(cè)皮膚軟組織感染相關(guān)多種病原體及多種耐藥基因,為皮膚軟組織感染類疾病的臨床指導(dǎo)用藥提供了高效便捷的方法。

技術(shù)研發(fā)人員:楊帆,侯潔,田永帥,劉嘉男,左雪梅,劉萬(wàn)建,潘士佳
受保護(hù)的技術(shù)使用者:青島漢唐生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2024/12/23
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