本發(fā)明屬于微生態(tài)制劑領(lǐng)域，具體涉及一種鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、微生態(tài)制劑，亦稱為活菌制劑、生菌劑或刺激劑，是指利用微生態(tài)學(xué)的理論，通過(guò)對(duì)宿主有益的微生物或其促生長(zhǎng)物質(zhì)，采用特殊工藝制成的活菌制劑。這些制劑已廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、林業(yè)、畜牧業(yè)、漁業(yè)、食品加工和水處理等領(lǐng)域。鏈霉菌(streptomyces)作為高等放線菌的一類，因其產(chǎn)孢量高、孢子存活時(shí)間長(zhǎng)等特點(diǎn)，適合制備多種形式的活菌制劑，包括孢子粉劑、種衣劑和菌絲體培養(yǎng)物等。此外，鏈霉菌不僅能夠分泌促進(jìn)植物生長(zhǎng)的因子，還具備產(chǎn)生抗生素的能力。通過(guò)從鏈霉菌中篩選出對(duì)植物及土壤微生態(tài)具有益生作用的菌株，可以開(kāi)發(fā)出高效的微生態(tài)制劑，這些制劑在植物的生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中能夠顯著提高生防和促生效果。因此，鏈霉菌微生態(tài)菌劑的研發(fā)具有廣闊的應(yīng)用前景和商業(yè)價(jià)值。

2、為了實(shí)現(xiàn)微生態(tài)制劑的高效應(yīng)用，獲得優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品是必要的前提。近年來(lái)，固體發(fā)酵因其在生產(chǎn)成本、次級(jí)代謝產(chǎn)物生成及高質(zhì)量孢子濃度等方面的優(yōu)勢(shì)，成為優(yōu)先選用的發(fā)酵技術(shù)。固體發(fā)酵是指利用不溶于去離子水的濕潤(rùn)材料作為物理支持和營(yíng)養(yǎng)來(lái)源，以模擬微生物的自然生存環(huán)境，促進(jìn)其生長(zhǎng)及代謝物質(zhì)的合成(bhargav?s等，2008；thomas?l等，2013)。在固體發(fā)酵中，工農(nóng)業(yè)廢物和副產(chǎn)品如麩皮、稻殼和秸稈等被廣泛用作原料，既解決了這些廢棄物的處理問(wèn)題，又為其添加了經(jīng)濟(jì)價(jià)值，同時(shí)降低了生產(chǎn)成本，符合可持續(xù)發(fā)展的需求。

3、固體發(fā)酵受到多種因素的影響，包括基質(zhì)種類、碳源、氮源、初始含水量、接種量和發(fā)酵溫度等(nigam?p?s?n等，2009)，不同菌株對(duì)不同因素的耐受性及適應(yīng)性也存在差異。此外，固體發(fā)酵所需的發(fā)酵設(shè)備相對(duì)簡(jiǎn)單和經(jīng)濟(jì)，固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)物具有活性強(qiáng)、存活時(shí)間長(zhǎng)、易于儲(chǔ)存和運(yùn)輸?shù)葍?yōu)點(diǎn)(ting?s等，2016)。目前，已有報(bào)道涉及鏈霉菌的固體發(fā)酵技術(shù)，例如，中國(guó)專利cn106011022a公開(kāi)了利用沙土、玉米粉和稻殼等固體原料發(fā)酵玫瑰黃鏈霉菌，而中國(guó)專利cn108277177a則描述了利用麩皮和稻殼等固體原料進(jìn)行細(xì)黃鏈霉菌的固體發(fā)酵。

4、在草莓育苗方面，目前的主流模式仍依賴于化肥、腐殖酸和植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑等方法，以促進(jìn)草莓母株幼苗的生長(zhǎng)并提高匍匐莖和子苗的數(shù)量。然而，利用微生物菌劑來(lái)促進(jìn)草莓匍匐莖擴(kuò)繁的研究和應(yīng)用仍然有限。因此，開(kāi)發(fā)一種新的微生物菌劑，有望填補(bǔ)這一領(lǐng)域的空白，為提升草莓育苗技術(shù)提供創(chuàng)新解決方案。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、基于上述現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供了一種鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明將基于鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵物的菌劑用于草莓育苗，可有效促進(jìn)草莓匍匐莖擴(kuò)繁，提高草莓母苗繁殖系數(shù)。

2、實(shí)現(xiàn)本發(fā)明上述目的所采用的技術(shù)方案為：

3、一種鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵培養(yǎng)基，其包括固體基質(zhì)、甘油和去離子水，固體基質(zhì)與去離子水的料水比為1∶0.6-1.8，優(yōu)選料水比為1∶1.1-1.6，甘油質(zhì)量為固體基質(zhì)質(zhì)量的0-5％，優(yōu)選甘油質(zhì)量為固體基質(zhì)質(zhì)量的1-4％，其中固體基質(zhì)以質(zhì)量百分比計(jì)，包括：草炭10-90％、麩皮10-90％，優(yōu)選椰糠30-70％，麩皮30-70％。

4、一種鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，包括如下步驟：

5、s1、將草炭、麩皮和去離子水混合，攪拌均勻；

6、s2、向步驟s1所得的混合物料中加入甘油，攪拌均勻；

7、s3、將步驟s2所得的混合物料進(jìn)行滅菌，得到所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵培養(yǎng)基。

8、一種鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑，所述的菌劑為鼠灰鏈霉菌jktj-3接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵得到的發(fā)酵產(chǎn)物。

9、一種鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑的制備方法，包括如下步驟：

10、p1、將鼠灰鏈霉菌jktj-3進(jìn)行活化培養(yǎng)，至孢子豐滿，得到活化菌株；

11、p2、用菌塊打孔器在活化菌株平板上打孔，得到活化菌塊；

12、p3、將1-5個(gè)活化菌塊接種于權(quán)利要求2所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵培養(yǎng)基中，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)5-15天，得到所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑。

13、進(jìn)一步，所述的活化培養(yǎng)的方法為：

14、將鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑接種于isp-2培養(yǎng)基上，隨后置于28-34℃培養(yǎng)箱活化培養(yǎng)3-5天。

15、進(jìn)一步，所述的發(fā)酵培養(yǎng)的方法為：

16、將已接種鼠灰鏈霉菌jktj-3的固體發(fā)酵培養(yǎng)基于24-40℃(優(yōu)選28-35℃)恒溫培養(yǎng)箱中，每隔20-28h翻動(dòng)一次。

17、一種鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑在草莓育苗(促草莓匍匐莖擴(kuò)繁)中的應(yīng)用。

18、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果和優(yōu)點(diǎn)在于：

19、本發(fā)明將鼠灰鏈霉菌jktj-3接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，獲得鏈霉菌孢子數(shù)量達(dá)1×109cfu/g～1×1012cfu/g的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑，將所得的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑應(yīng)用到草莓育苗上，可顯著增加草莓母株幼苗的株高、莖粗、根長(zhǎng)和葉片數(shù)等，而且在之后的草莓母株移栽擴(kuò)繁時(shí)期，使用鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑培育的母株，其匍匐莖抽生時(shí)間提前，抽生數(shù)量及子苗數(shù)量顯著增加。可見(jiàn)，本發(fā)明的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑在草莓母株幼苗培育、提高草莓母苗繁殖效率方面具有非常好的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一種鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵培養(yǎng)基，其特征在于：包括固體基質(zhì)、甘油和去離子水，固體基質(zhì)與去離子水的料水比為1∶0.6-1.8，甘油質(zhì)量為固體基質(zhì)質(zhì)量的0-5％，其中固體基質(zhì)以質(zhì)量百分比計(jì)，包括：草炭10-90％、麩皮10-90％。

2.一種權(quán)利要求1所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3固體發(fā)酵培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

3.一種鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑，其特征在于：所述的菌劑為權(quán)利要求1所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3接種到權(quán)利要求2所述的固體發(fā)酵培養(yǎng)基中發(fā)酵得到的發(fā)酵產(chǎn)物。

4.一種權(quán)利要求3所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑的制備方法，其特征在于包括如下步驟：

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑的制備方法，其特征在于所述的活化培養(yǎng)的方法為：

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)的方法為：

7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑的制備方法，其特征在于：所述的活化菌塊直徑為6-10mm。

8.一種權(quán)利要求4所述的鼠灰鏈霉菌jktj-3菌劑在草莓育苗中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種鼠灰鏈霉菌JKTJ?3菌劑及其制備方法和應(yīng)用，本發(fā)明將鼠灰鏈霉菌JKTJ?3接種到固體發(fā)酵培養(yǎng)基中進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，獲得鏈霉菌孢子數(shù)量達(dá)1×109cfu/g～1×1012cfu/g的鼠灰鏈霉菌JKTJ?3菌劑，將所得的鼠灰鏈霉菌JKTJ?3菌劑應(yīng)用到草莓育苗上，可顯著增加草莓母株幼苗的株高、莖粗、根長(zhǎng)和葉片數(shù)等，而且在之后的草莓母株移栽擴(kuò)繁時(shí)期，使用鼠灰鏈霉菌JKTJ?3菌劑培育的母株，其匍匐莖抽生時(shí)間提前，抽生數(shù)量及子苗數(shù)量顯著增加。可見(jiàn)，本發(fā)明的鼠灰鏈霉菌JKTJ?3菌劑在草莓母株幼苗培育、提高草莓母苗繁殖效率方面具有非常好的應(yīng)用前景。

技術(shù)研發(fā)人員：葛米紅,余謙,施先鋒,田俊華,王德歡,梁歡,張昭陽(yáng),祝菊紅,胡江勇,周謨兵,宋晶,陳祖平,李愛(ài)成
受保護(hù)的技術(shù)使用者：武漢市農(nóng)業(yè)科學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9