本發(fā)明屬于單克隆抗體藥物，具體涉及一種靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體、雜交瘤細胞以及應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、現(xiàn)有研究表明，突觸后膜下的錨定蛋白gephyrin通過聚集抑制性甘氨酸和γ-氨基丁酸受體并將它們定位在突觸后膜的細胞骨架上，實現(xiàn)抑制信號接收功能。gephyrin的表達異常會可能導(dǎo)致認知功能障礙的發(fā)生。含有α5亞單位的gabaa受體(α5-gabaars)在海馬區(qū)高度表達，部分分布于突觸后膜的間隙內(nèi)側(cè)，與gephyrin結(jié)合并介導(dǎo)瞬時性抑制(即微型抑制性突觸后電流，mipscs)，對于機體對吸入麻醉敏感性是必不可少的。α5-gabaars在膜上的變化導(dǎo)致動物的學(xué)習(xí)和記憶能力下降。

2、因此，gephyrin在研究α5-gabaar參與麻醉引起的認知功能障礙中扮演著至關(guān)重要的角色。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對以上問題，本發(fā)明目的為提供一種可以靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體，對gephyrin蛋白的特異性強，親和力高，有助于深入研究gephyrin在α5-gabaar介導(dǎo)的認知功能障礙中的調(diào)控機制以及相關(guān)治療策略。

2、為了達到上述目的，本發(fā)明可以采用以下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明一方面提供一種靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體，單克隆抗體的重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no.1所示，輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

4、本發(fā)明另一方面提供一種雜交瘤細胞，其保藏編號為cgmcc?no.46029。

5、本發(fā)明再一方面提供一種分離的核酸分子，其用于編碼本發(fā)明中的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體。

6、本發(fā)明再一方面提供一種生物材料，其包括本發(fā)明中的核酸分子，生物材料包括表達載體、工程菌或工程細胞。

7、本發(fā)明再一方面提供一種用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑，包括本發(fā)明中的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體。

8、優(yōu)選地，上述檢測試劑包括間接elisa檢測試劑。

9、本發(fā)明再一方面提供一種用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑盒，其包括本發(fā)明中的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體或本發(fā)明中的用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑。

10、本發(fā)明再一方面提供一種用于治療gephyrin表達異常導(dǎo)致的認知功能障礙的藥物，包括本發(fā)明中的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體。

11、本發(fā)明再一方面提供一種本發(fā)明中的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體或本發(fā)明中的雜交瘤細胞或本發(fā)明中的分離的核酸分子或本發(fā)明中的生物材料在制備用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑中的應(yīng)用。

12、本發(fā)明再一方面提供一種本發(fā)明中的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體或本發(fā)明中的雜交瘤細胞或本發(fā)明中的分離的核酸分子或本發(fā)明中的生物材料在制備用于治療gephyrin表達異常導(dǎo)致的認知功能障礙的藥物中的應(yīng)用。

13、本發(fā)明中的雜交瘤細胞已于2024年08月05日在北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號中國科學(xué)院微生物研究所中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心保藏，其保藏號為cgmcc?no.46029。

14、本發(fā)明有益效果至少包括：

15、(1)本發(fā)明提供的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體與gephyrin蛋白具有高度親和性，抗體濃度為0.1g/l，經(jīng)121.6倍稀釋后，ec50值為5.31nm。

16、(2)本發(fā)明提供的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體分子質(zhì)量小，且可大批量獲得，特異性高，免疫原性低，并且容易進入組織并穿透血腦屏障，提高了靶向特定分子的準(zhǔn)確性并避免了不良副作用。

技術(shù)特征：

1.靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體，其特征在于，單克隆抗體的重鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no.1所示，輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如seq?id?no.2所示。

2.雜交瘤細胞，其特征在于，其保藏編號為cgmcc?no.46029。

3.分離的核酸分子，其特征在于，用于編碼權(quán)利要求1所述的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體。

4.生物材料，其特征在于，包括權(quán)利要求3所述的核酸分子，生物材料包括表達載體、工程菌或工程細胞。

5.用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑，其特征在于，檢測試劑包括間接elisa檢測試劑。

7.用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體或權(quán)利要求3或4的用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑。

8.用于治療gephyrin表達異常導(dǎo)致的認知功能障礙的藥物，其特征在于，包括權(quán)利要求1所述的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體。

9.權(quán)利要求1所述的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體或權(quán)利要求2所述的雜交瘤細胞或權(quán)利要求3所述的分離的核酸分子或權(quán)利要求4所述的生物材料在制備用于檢測gephyrin蛋白的檢測試劑中的應(yīng)用。

10.權(quán)利要求1所述的靶向gephyrin蛋白的單克隆抗體或權(quán)利要求2所述的雜交瘤細胞或權(quán)利要求3所述的分離的核酸分子或權(quán)利要求4所述的生物材料在制備用于治療gephyrin表達異常導(dǎo)致的認知功能障礙的藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于單克隆抗體藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種靶向Gephyrin蛋白的單克隆抗體、雜交瘤細胞以及應(yīng)用。單克隆抗體的重鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQ?ID?NO.1所示，輕鏈可變區(qū)氨基酸序列如SEQ?ID?NO.2所示。該單克隆抗體與Gephyrin蛋白具有高度親和性，抗體濃度為0.1g/l，經(jīng)121.6倍稀釋后，EC50值為5.31nM。

技術(shù)研發(fā)人員：尹毅青,張夢雪,王準(zhǔn),王思萱,董金鵬
受保護的技術(shù)使用者：天津市腫瘤醫(yī)院（天津醫(yī)科大學(xué)腫瘤醫(yī)院）
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6