本發(fā)明涉及多肽提取，尤其涉及一種海洋貝類多肽制備方法。

背景技術：

1、海洋生物長時間生活在高壓、高/低溫和高鹽等極端環(huán)境，海洋生物蛋白質(zhì)無論氨基酸的組成還是序列都與陸地生物蛋白有很大不同，海洋貝類營養(yǎng)價值高，氨基酸含量豐富且均衡，是優(yōu)質(zhì)的食品蛋白源。目前海洋生物蛋白資源未得到很好的開發(fā)，我國現(xiàn)有海洋生物蛋白除直接食用外，往往僅通過簡單的加工技術制成食品進入市場，這使得產(chǎn)品在國際市場上的競爭力較差。

2、我國貝類除鮮銷以外，貝類加工方式仍以人力為主，發(fā)展停滯在初級階段，海洋貝類其酶解物中不僅富含多肽、低聚肽、氨基酸等功能性營養(yǎng)成分，還能夠產(chǎn)生一些具有特殊生理功能的生物活性肽，具有廣泛的應用前景。

3、目前對海洋生物蛋白資源進行生物技術提取，利用微生物酶催化水解成為小分子多肽，提高消化轉(zhuǎn)化率，已經(jīng)成為開發(fā)熱點。貝類作為最常見的海洋軟體動物，目前貝類為原料的高附加值產(chǎn)品較少，尚未開發(fā)出針對小分子貝類多肽提取的有效方法。如何提高海洋貝類資源的附加值，使其得到充分利用，充分實現(xiàn)其經(jīng)濟價值，具有極好的研究前景。

技術實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術中存在的缺點，而提出的一種海洋貝類多肽制備方法。

2、一種海洋貝類多肽制備方法，包括如下步驟：

3、s1、將海洋貝類清洗干凈，水蒸汽蒸制10-20min，去殼去內(nèi)臟，磨漿，過篩，-40～-60℃冷凍1-4h，調(diào)節(jié)體系絕對壓強為70-80pa，保溫保壓狀態(tài)下進行微波處理，有效微波時間為5-10min，升至室溫，調(diào)節(jié)含水量至20-30％，得到漿料；

4、s2、向漿料中加入水，常溫靜置5-10h，調(diào)節(jié)體系ph值為6-6.5，加入復合酶a，40-50℃酶解3-6h，升溫至90-95℃，保溫5-10min，降至室溫得到酶解料；

5、s3、將酶解料調(diào)節(jié)體系ph值為7.8-8.2，加入復合酶b，50-60℃酶解1-2h，升溫至90-100℃，保溫10-20min，降至室溫，離心除去沉淀；將水解液采用乙醇沉淀，再次離心除去沉淀；經(jīng)濾膜分離，收集截留產(chǎn)物，噴霧干燥。

6、優(yōu)選地，s1中，海洋貝類為扇貝、珍珠貝、牡蠣、四角蛤、縊蟶中至少一種。

7、優(yōu)選地，s1中，采用溫度為100-105℃的飽和蒸汽進行蒸制。

8、優(yōu)選地，s1中，微波功率為100-200w，微波處理的具體操作如下：對冷凍后磨漿料進行微波5-10s后，暫停微波處理，將物料溫度再次降溫至-40～-60℃，然后重復上述操作直至實際微波處理時間之和達5-10min。

9、優(yōu)選地，s2中，復合酶a包括：米曲霉蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、卵磷脂；其中，米曲霉蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、卵磷脂的質(zhì)量比為1-3：2-6：1-5：1-2。

10、復合酶采用米曲霉蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶復配，在卵磷脂作用下活性大大增強，可對漿料中蛋白質(zhì)大分子快速酶解，降解效率高。

11、優(yōu)選地，s2中，復合酶a中，米曲霉蛋白酶的比活力為7000-9000u/g，木瓜蛋白酶的比活力為6000-8000u/g，脂肪酶的比活力為5000-9000u/g。

12、優(yōu)選地，s2中，漿料、水、復合酶a的質(zhì)量比為50-100：200-300：1-2。

13、優(yōu)選地，s3中，酶解料和復合酶b的質(zhì)量比為280-400：1-2。

14、優(yōu)選地，s3中，復合酶b包括：novo蛋白酶、胰蛋白酶、藍銅勝肽；其中，novo蛋白酶、胰蛋白酶、藍銅勝肽的質(zhì)量比為1-2：1-3：0.01-0.1。

15、復合酶b采用novo蛋白酶、胰蛋白酶復配，使所得多肽的生物活性高，但對皮膚刺激性較強。本發(fā)明進一步采用藍銅勝肽配合作用，不僅酶活性大大增強，大大增加分子量小于500道爾頓的多肽占比，而且對皮膚的刺激效果顯著降低，制品安全性大大增強。

16、優(yōu)選地，s3中，復合酶b中，novo蛋白酶的比活力為8000-14000u/g，胰蛋白酶的比活力為6000-10000u/g。

17、優(yōu)選地，s3中，濾膜的孔徑為30nm；噴霧干燥的進風溫度為200-210℃。

18、一種海洋貝類多肽，采用上述海洋貝類多肽制備方法制得。

19、有益效果：

20、本發(fā)明采用冷凍處理配合低溫真空微波處理，不僅可更好的保留貝類生物活性，而且能與后續(xù)酶解工藝相配合，不僅提高蛋白多肽的水解度，顯著提高多肽產(chǎn)量，同時可顯著縮短酶解時間，降低成本。

21、本發(fā)明酶解過程中，依次在酸性、堿性環(huán)境中酶解，并控制酶解參數(shù)，所得貝類多肽不僅純度高，而且生物活性極高。經(jīng)試驗發(fā)現(xiàn)：本發(fā)明所得海洋貝類多肽中，分子量小于1000道爾頓的多肽占比達97.2％，其中分子量小于500道爾頓的多肽占比可達52.4％，使其不僅具有顯著的抗氧化活性，還原能力強，清除自由基的能力優(yōu)異，而且生物毒性小，對皮膚刺激性小，安全可靠。

22、本發(fā)明通過對酶解過程和時間的控制，大大提高產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化率與生物活性；而且工藝條件易控，適合大規(guī)模工業(yè)生產(chǎn)，同時充分利用了海洋生物資源，提高海洋貝類資源的附加值。

技術特征：

1.一種海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

2.根據(jù)權利要求1所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s1中，海洋貝類為扇貝、珍珠貝、牡蠣、四角蛤、縊蟶中至少一種。

3.根據(jù)權利要求1所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s1中，采用溫度為100-105℃的飽和蒸汽進行蒸制。

4.根據(jù)權利要求1所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s1中，微波功率為100-200w，微波處理的具體操作如下：對冷凍后磨漿料進行微波5-10s后，暫停微波處理，將物料溫度再次降溫至-40～-60℃，然后重復上述操作直至實際微波處理時間之和達5-10min。

5.根據(jù)權利要求1所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s2中，復合酶a包括：米曲霉蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、卵磷脂；其中，米曲霉蛋白酶、木瓜蛋白酶、脂肪酶、卵磷脂的質(zhì)量比為1-3：2-6：1-5：1-2。

6.根據(jù)權利要求5所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s2中，復合酶a中，米曲霉蛋白酶的比活力為7000-9000u/g，木瓜蛋白酶的比活力為6000-8000u/g，脂肪酶的比活力為5000-9000u/g。

7.根據(jù)權利要求5所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s2中，漿料、水、復合酶a的質(zhì)量比為50-100：200-300：1-2。

8.根據(jù)權利要求1所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s3中，復合酶b包括：novo蛋白酶、胰蛋白酶、藍銅勝肽；其中，novo蛋白酶、胰蛋白酶、藍銅勝肽的質(zhì)量比為1-2：1-3：0.01-0.1。

9.根據(jù)權利要求1所述海洋貝類多肽制備方法，其特征在于，s3中，濾膜的孔徑為30nm；噴霧干燥的進風溫度為200-210℃。

10.一種海洋貝類多肽，其特征在于，采用權利要求1-9任一項所述海洋貝類多肽制備方法制得。

技術總結
本發(fā)明涉及多肽提取技術領域，具體公開一種海洋貝類多肽制備方法。上述海洋貝類多肽制備方法，將海洋貝類清洗干凈，蒸汽蒸制，去殼去內(nèi)臟，磨漿，過篩，冷凍，調(diào)節(jié)體系絕對壓強為70?80Pa，保溫保壓狀態(tài)下進行微波處理，升至室溫，得到漿料；向漿料中加入水，常溫靜置5?10h，調(diào)節(jié)體系pH值為6?6.5，加入復合酶a，40?50℃酶解3?6h，90?95℃保溫5?10min，降至室溫得到酶解料；將酶解料調(diào)節(jié)體系pH值為7.8?8.2，加入復合酶b，50?60℃酶解1?2h，90?100℃保溫10?20min，降至室溫，離心；將水解液采用乙醇沉淀，再次離心；經(jīng)濾膜分離，收集截留產(chǎn)物，噴霧干燥。

技術研發(fā)人員：張珍妮
受保護的技術使用者：山東太愛肽生物科技股份有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/6