本發(fā)明屬于植物生物,涉及提前植物開花的閩楠基因及其編碼的蛋白和應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、閩楠(phoebe?bournei)是樟科(lauraceae)楠屬(phoebe)的一種常綠喬木,是“金絲楠木”的原種之一,主要分布在中國的福建、浙江、江西和廣東等省份。由于其優(yōu)質(zhì)木材,閩楠廣泛應(yīng)用于建筑、家具和工藝品制作。因其經(jīng)濟價值,閩楠遭到過度砍伐,導(dǎo)致天然林資源顯著減少,目前已被列為國家二級保護植物。
2、閩楠在組織培養(yǎng)再生方面存在困難,主要依賴有性生殖。其開花結(jié)實特性是生產(chǎn)的關(guān)鍵生物學(xué)基礎(chǔ),但閩楠的童期較長,通常需要約15年才能進入生殖階段,這對雜交育種造成了嚴(yán)重影響,給育種工作帶來了挑戰(zhàn)。雖然在模式植物和一些作物中已建立開花調(diào)控通路的基本模型,但在多年生樹木中的相關(guān)研究仍顯不足。與模式植物及其他林木相比,閩楠的遺傳育種研究相對薄弱,因此,研究閩楠花期調(diào)控的機制對于縮短育種周期具有重要的理論和實踐意義。
3、spl(squamosa?promoter?binding?protein-like)基因家族在花期調(diào)控方面發(fā)揮了重要作用,尤其是在調(diào)節(jié)植物的生長發(fā)育與環(huán)境信號的適應(yīng)中。研究表明,spl基因能夠通過調(diào)控與開花相關(guān)的激素信號通路,促進植物的早熟開花。
4、在擬南芥等植物中,特定的spl基因如spl9和spl15通過與花期調(diào)節(jié)網(wǎng)絡(luò)中的其他轉(zhuǎn)錄因子互作,調(diào)節(jié)花粉發(fā)育和花器形成。這些spl基因的表達受到mirna(如mir156)的調(diào)控。mir156在幼苗階段的高表達抑制spl基因,從而延遲開花;而在植物成熟時,mir156的水平下降,spl基因被激活,促進植物的開花進程。spl基因通過與植物激素(如生長素和細(xì)胞分裂素)信號通路的相互作用,調(diào)節(jié)開花的時間和方式。此外,它們還參與響應(yīng)外部環(huán)境條件,如光照和溫度,從而在適當(dāng)?shù)臅r機啟動開花。例如,spl基因的上調(diào)能夠使植物更快適應(yīng)溫暖和充足光照的環(huán)境,從而進行花期調(diào)控。迄今,尚未有研究報道閩楠spl12基因的功能。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、為解決上述問題,本發(fā)明提供了提前植物開花的閩楠基因及其編碼的蛋白和應(yīng)用。
2、首先,本發(fā)明提供了一種提前植物開花的閩楠基因,該閩楠基因為閩楠spl12基因,閩楠spl12基因具有seq?id?no:1所示的核苷酸序列,或者對該序列進行一個或幾個核苷酸的缺失、添加和/或取代,但功能不變的序列。優(yōu)選情況下,閩楠spl12基因的核苷酸序列為seq?id?no:1。
3、本發(fā)明還提供了閩楠spl12基因編碼的蛋白,該蛋白由seq?id?no.2所示的氨基酸組成。
4、本發(fā)明還提供了含有閩楠spl12基因的重組載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
5、本發(fā)明還提供了一種提前植物開花的方法,該方法包括制備含有閩楠spl12基因的修飾植物,相對于野生型植物,在修飾植物中,閩楠spl12基因的表達增加;其中,閩楠spl12基因的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。需要說明的是,“表達增加”的概念中,“表達”是指是基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯,產(chǎn)生有生物活性的蛋白質(zhì)的過程;上述過程的強度增加即為表達增加,具體地,可以為轉(zhuǎn)錄得到的產(chǎn)物和翻譯得到的產(chǎn)物增加。
6、在一個實施方案中,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化將閩楠spl12基因?qū)霐M南芥基因組中,并在轉(zhuǎn)基因植物中超量表達。
7、本發(fā)明還提供了閩楠spl12基因在提前植物開花的應(yīng)用,其特征在于,制備含有閩楠spl12基因的修飾植物,相對于野生型植物,在修飾植物中,閩楠spl12基因的表達增加;其中,閩楠spl12基因的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。需要說明的是,“表達增加”的概念中,“表達”是指是基因經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯,產(chǎn)生有生物活性的蛋白質(zhì)的過程;上述過程的強度增加即為表達增加,具體地,可以為轉(zhuǎn)錄得到的產(chǎn)物和翻譯得到的產(chǎn)物增加。
8、在一個實施方案中,上述植物為擬南芥或閩楠。優(yōu)選情況下,上述植物為擬南芥。
9、在一個實施方案中,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法將閩楠spl12基因?qū)霐M南芥,篩選、培養(yǎng)并獲得轉(zhuǎn)基因株系。。
10、申請人通過分析閩楠的基因家族和轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù),篩選到閩楠spl12基因,并通過異源轉(zhuǎn)擬南芥驗證其功能,揭示閩楠spl12基因能夠提前植物開花。本申請通過調(diào)控閩楠spl12基因的表達,可以顯著縮短植物的開花時間,從而實現(xiàn)通過調(diào)控植物開花時間而實現(xiàn)提前開花,提高育種效率,促進經(jīng)濟作物的早熟與豐產(chǎn)。
1.一種提前植物開花的閩楠基因,該閩楠基因為閩楠spl12基因,其特征在于,所述閩楠spl12基因具有seq?id?no:1所示的核苷酸序列,或者對所述序列進行一個或幾個核苷酸的缺失、添加和/或取代,但功能不變的序列。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述基因,其特征在于,所述基因的核苷酸序列為seq?id?no:1。
3.權(quán)利要求1或2所述閩楠基因編碼的蛋白,其特征在于,所述蛋白由seq?id?no.2所示的氨基酸組成。
4.含有權(quán)利要求2中所述基因的重組載體、轉(zhuǎn)基因細(xì)胞系或重組菌。
5.一種提前植物開花的方法,該方法包括制備含有閩楠spl12基因的修飾植物,其特征在于,相對于野生型植物,在所述修飾植物中,所述閩楠spl12基因的表達增加;其中,所述閩楠spl12基因的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化將所述閩楠spl12基因?qū)霐M南芥基因組中,并在轉(zhuǎn)基因植物中超量表達。
7.閩楠spl12基因在提前植物開花的應(yīng)用,其特征在于,制備含有閩楠spl12基因的修飾植物,相對于野生型植物,在所述修飾植物中,所述閩楠spl12基因的表達增加;其中,所述閩楠spl12基因的核苷酸序列如seq?id?no:1所示。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物為擬南芥或閩楠。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的應(yīng)用,其特征在于,所述植物為擬南芥。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用,其特征在于,通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化方法將所述閩楠spl12基因?qū)霐M南芥,篩選、培養(yǎng)并獲得轉(zhuǎn)基因株系。