本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥，具體涉及saal1作為神經(jīng)母細胞瘤預后評估標志物和藥物靶點的應用。

背景技術(shù)：

1、神經(jīng)母細胞瘤(neuroblastoma，nb)是一種常見的兒童顱外惡性實體腫瘤，根據(jù)nb診斷時的年齡、組織學類型、腫瘤分化程度、mycn基因狀態(tài)、11q畸變和dna倍體等因素，國際神經(jīng)母細胞瘤分級協(xié)作組將nb危險度分為低危組、中危組和高危組，這些分級原則有助于指導治療策略的選擇和預測患者的預后。nb的預后受患兒年齡、疾病分期和分子遺傳學等因素影響，高危組患兒的5年生存率只有30％-50％。傳統(tǒng)的治療方法(如化療、手術(shù)和放療)可以控制部分nb的進展，然而并不能達到治愈目的。近年來，隨著對nb分子機制的深入了解，針對特定分子靶點的治療方法研究取得了顯著進展，尋找新的有效治療靶點對于nb患兒的治愈和生活質(zhì)量改善具有重要意義。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的在于提供saal1基因作為神經(jīng)母細胞瘤藥物靶點的應用，可作為神經(jīng)母細胞瘤預后分子及潛在治療靶點，為神經(jīng)母細胞瘤藥物研制提供新的途徑。

2、根據(jù)本發(fā)明具體實施方式的應用，包括saal1基因作為生物標志物在制備神經(jīng)母細胞瘤預后檢測試劑盒中的應用。

3、所述預后檢測試劑盒的用途包括：檢測saal1基因在受試者的測定細胞中的表達情況；將檢測值與參考值相比較，saal1明顯高于參考值時，提示受試者預后差。所述參考值水平是saal1在正常細胞，即正常人神經(jīng)組織細胞中的表達水平，所述正常細胞與測定細胞同一品系且無癌變；所述測定細胞已知或被懷疑包含腫瘤細胞。或者，所述參考值水平選擇以內(nèi)參基因的表達量為基準。

4、本發(fā)明中，術(shù)語“表達水平”一般指生物學樣品中生物標志物的量?！氨磉_”一般指信息(例如基因編碼和/或表觀遺傳)轉(zhuǎn)化成細胞中存在并運行的結(jié)構(gòu)的過程。因此，如本發(fā)明中使用的，“表達”可以指轉(zhuǎn)錄成多核苷酸、翻譯成多肽、或甚至多核苷酸和/或多肽修飾(例如多肽的翻譯后修飾)。轉(zhuǎn)錄的多核苷酸的、翻譯的多肽的、或多核苷酸和/或多肽修飾(例如多肽的翻譯后修飾)的片段也應視為表達的，無論它們是源自通過可變剪接生成的轉(zhuǎn)錄物或經(jīng)過降解的轉(zhuǎn)錄物，或者是源自多肽的翻譯后加工(例如通過蛋白水解)。

5、根據(jù)本發(fā)明具體實施方式的神經(jīng)母細胞瘤預后檢測試劑盒，所述試劑盒包括檢測saal1基因表達水平的試劑。

6、優(yōu)選的，所述試劑盒包括saal1基因的引物，其核苷酸序列如下：

7、seq?id?no.1:atgaggacgtggctttatttctc；

8、seq?id?no.2:aggcaagtaagcaacaacctg。

9、優(yōu)選的，所述試劑盒包括gapdh基因的引物，其核苷酸序列如下：

10、seq?id?no.3:gagtcaacggatttggtcgt；

11、seq?id?no.4:ttgattttggagggatctcg。

12、本發(fā)明還提供saal1基因作為靶點在開發(fā)或篩選用于預防和/或治療神經(jīng)母細胞瘤的藥物中的應用。

13、其中，所述藥物能夠減少saal1基因的表達。

14、根據(jù)本發(fā)明具體實施方式的用于預防和/或治療神經(jīng)母細胞瘤的藥物，所述藥物組合物能夠減少saal1基因的表達。

15、優(yōu)選的，所述藥物包括靶向抑制saal1基因的小干擾rna。

16、優(yōu)選的，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.5所示，或所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.6所示。

17、seq?id?no.5：gccagttgagcaaacagaa；

18、seq?id?no.6：gtccaagtgtcctcgatta。

19、根據(jù)本發(fā)明具體實施方式的一種靶向抑制saal1基因的小干擾rna，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.5所示；或，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.6所示。

20、本發(fā)明的有益效果：

21、本發(fā)明證實了高表達saal1基因的nb腫瘤分期高、危險度分級高，患兒生存期短，表明saal1基因可作為神經(jīng)母細胞瘤預后標志物。在人神經(jīng)母細胞瘤細胞系中，敲減saal1可抑制神經(jīng)母細胞瘤細胞增殖，表明saal1可作為神經(jīng)母細胞瘤的治療靶點。本發(fā)明能夠從分子水平實現(xiàn)nb危險度的分級，同時靶向saal1基因可實現(xiàn)對nb的治療，輔助臨床醫(yī)生對nb進行預后判斷和靶向治療。

技術(shù)特征：

1.saal1基因作為生物標志物在制備神經(jīng)母細胞瘤預后檢測試劑盒中的應用。

2.神經(jīng)母細胞瘤預后檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括檢測saal1基因表達水平的試劑。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括saal1基因的引物，其核苷酸序列如下：

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括gapdh基因的引物，其核苷酸序列如下：

5.saal1基因作為靶點在開發(fā)或篩選或制備用于預防和/或治療神經(jīng)母細胞瘤的藥物中的應用。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的應用，其特征在于，所述藥物能夠減少saal1基因的表達。

7.用于預防和/或治療神經(jīng)母細胞瘤的藥物，其特征在于，所述藥物能夠減少saal1基因的表達。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的藥物，其特征在于，所述藥物包括靶向抑制saal1基因的小干擾rna。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的藥物，其特征在于，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?idno.5所示；或，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.6所示。

10.一種靶向抑制saal1基因的小干擾rna，其特征在于，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.5所示；或，所述小干擾rna的核苷酸序列如seq?id?no.6所示。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及SAAL1作為神經(jīng)母細胞瘤預后評估標志物和藥物靶點的應用。本發(fā)明提供了SAAL1作為神經(jīng)母細胞瘤藥物靶點的系列應用，包括神經(jīng)母細胞瘤的預后及治療等方面。本發(fā)明證實了高表達SAAL1基因的NB腫瘤分期和危險度分級高，患兒生存期短，表明SAAL1基因可作為神經(jīng)母細胞瘤預后分子。在人神經(jīng)母細胞瘤細胞系中，敲減SAAL1可抑制細胞增殖，表明SAAL1可作為神經(jīng)母細胞瘤的治療靶點。本發(fā)明能夠從分子水平實現(xiàn)NB危險度的分級，同時靶向SAAL1基因可實現(xiàn)對NB的治療，輔助臨床醫(yī)生對NB進行預后判斷和靶向治療。

技術(shù)研發(fā)人員：于永波,倪鑫,郭永麗,周亞南,楊業(yè)然,張璇,魯潔,常艷,賈安娜
受保護的技術(shù)使用者：首都醫(yī)科大學附屬北京兒童醫(yī)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/2