本發(fā)明屬于生物，具體涉及一種大腸桿菌靶向抗菌肽swp及制備方法和應用。

背景技術(shù)：

1、大腸桿菌是一種常見的腸道致病菌，每年導致大量動物和人類腹瀉，并造成重大的經(jīng)濟損失。目前，大多數(shù)已知的抗菌肽具有廣譜抗菌特性，但常常導致對有益微生物群的損害。這種廣泛的抗菌作用可能會破壞腸道微生物平衡，從而引發(fā)一系列負面后果，包括疾病加重和治療周期延長。因此，開發(fā)具有高度選擇性的“智能型”靶向抗菌肽顯得尤為重要。這類抗菌肽能夠有效殺滅致病菌，同時會對菌群環(huán)境的影響降至最低，從而有助于恢復微生態(tài)平衡并提高機體健康水平。因此，迫切需要一種針對大腸桿菌的靶向抗菌肽，能夠有效對抗該致病菌的感染并降低其對宿主健康的威脅。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、基于以上不足之處，本發(fā)明的目的在于提供一種針對大腸桿菌的靶向抗菌肽swp，該抗菌肽對產(chǎn)腸毒素的大腸桿菌具有靶向選擇殺滅能力。

2、本發(fā)明的目的是這樣實現(xiàn)的：一種針對大腸桿菌的靶向抗菌肽swp，其序列如seqid?no.1所示。

3、本發(fā)明的另一目的是提供一種大腸桿菌靶向抗菌肽swp的制備方法，如下：通過提取大腸桿菌蛋白，并將大腸桿菌蛋白與噬菌體展示肽庫共孵育，篩選出具有大腸桿菌親和力的靶向短肽，其序列如seq?id?no.2所示；并設計出一條抗革蘭氏陰性菌的α-螺旋肽wp，其序列如seq?id?no.3所示，最后將所述的短肽與α-螺旋肽wp進行連接，得到多肽swp，其序列如seq?id?no.1所示；采用固相化學合成法，并經(jīng)過反相高效液相色譜純化和質(zhì)譜鑒定后，完成所述的多肽的制備，再經(jīng)過抗菌活性的測定、溶血活性的測定和真核細胞毒性的測定，最終命名為抗菌肽swp。

4、本發(fā)明的另一目的是提供如上所述的抗菌肽swp在制備治療大腸桿菌感染性疾病的藥物中的應用。

5、進一步的，所述的應用為畜牧生產(chǎn)中作為飼料添加劑來治療大腸桿菌感染性疾病藥物中的應用。

6、本發(fā)明的另一目的是提供一種適用于治療大腸桿菌感染的藥物，所述藥物含有如上所述的抗菌肽swp。

7、本發(fā)明的有益效果及優(yōu)點如下：本發(fā)明的方法通過噬菌體展示肽庫篩選得到具有大腸桿菌親和力的短肽，序列如下：sgnltky，該序列具有與大腸桿菌結(jié)合的功能，但不具備殺菌活性。在此親和序列的基礎(chǔ)上，結(jié)合結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系的研究，添加了一條α-螺旋肽wkkiwkpgikkwik，以增加正電荷，從而提高其與帶負電細菌細胞膜的相互吸引作用，并通過疏水性氨基酸增強其對細菌細胞膜的穿透性。對所得抗菌肽swp進行了抗菌和生物安全性檢測，結(jié)果顯示，抗菌肽swp對大腸桿菌具有極強的抑菌活性。此外，抗菌肽swp對金黃色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、鼠李糖乳桿菌及乳酸乳球菌表現(xiàn)出極弱或無抑菌活性。值得注意的是，抗菌肽swp在128μm濃度下引起的紅細胞溶血率僅為3.5％，未達到10％的溶血閾值。在同一濃度下，豬小腸上皮細胞ipec-j2的存活率達到95.6％。綜上所述，抗菌肽swp是一種典型的靶向抗菌肽，具有強烈的針對大腸桿菌的靶向性和較高的應用價值，顯示出成為飼用抗生素替代物的潛力。

技術(shù)特征：

1.一種針對大腸桿菌的靶向抗菌肽swp，其特征在于，其序列如seq?idno.1所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種針對大腸桿菌的靶向抗菌肽swp的制備方法，其特征在于，方法如下：通過提取大腸桿菌蛋白，并將大腸桿菌蛋白與噬菌體展示肽庫共孵育，篩選出具有大腸桿菌親和力的靶向短肽，其序列如seq?id?no.2所示；并設計出一條抗革蘭氏陰性菌的α-螺旋肽wp，其序列如seq?id?no.3所示，最后將所述的短肽與α-螺旋肽wp進行連接，得到多肽swp，其序列如seq?id?no.1所示；采用固相化學合成法，并經(jīng)過反相高效液相色譜純化和質(zhì)譜鑒定后，完成所述的多肽的制備，再經(jīng)過抗菌活性的測定、溶血活性的測定和真核細胞毒性的測定，最終命名為抗菌肽swp。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種大腸桿菌靶向抗菌肽swp在制備治療大腸桿菌感染性疾病的藥物中的應用。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應用，其特征在于：所述的應用為畜牧生產(chǎn)中作為飼料添加劑來治療大腸桿菌感染性疾病藥物中的應用。

5.一種適用于治療大腸桿菌感染的藥物，所述藥物含有如權(quán)利要求1所述的抗菌肽swp。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開一種針對大腸桿菌的靶向抗菌肽SWP及其制備方法和應用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域，其氨基酸序列如SEQ?ID?No.1所示。本發(fā)明通過噬菌體展示肽庫篩選得到的具有大腸桿菌親和力的肽段SGNLTKY為靶向抗菌肽的靶向區(qū)，以活性肽WKKIWKPGIKKWIK為功能區(qū)，將二者連接構(gòu)建具有靶向大腸桿菌的新型抗菌肽SWP，其表現(xiàn)出較好的靶向效果，在對其它菌影響較小的情況下，對大腸桿菌有高效的抗菌活性。此外，抗菌肽SWP具有較低的溶血性和細胞毒性。

技術(shù)研發(fā)人員：董娜,胡明陽,薛雨桐,趙璐,李毓雯
受保護的技術(shù)使用者：東北農(nóng)業(yè)大學
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6