本發(fā)明涉及動物遺傳育種與分子生物學,具體涉及一種與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)cdk5rap3基因snp分子標記及其應(yīng)用。
背景技術(shù):
1、飼料效率作為一個重要的經(jīng)濟性狀,一直受到國內(nèi)外養(yǎng)雞企業(yè)的重點關(guān)注。雞肉具有低脂肪、高蛋白、價格低廉的優(yōu)勢且沒有宗教限制,是世界上消費量最大的肉類產(chǎn)品,其需求量也在不斷上升。對于肉雞產(chǎn)業(yè)而言,飼料在養(yǎng)殖成本中占很大比例,商品雞的飼料轉(zhuǎn)化率很大程度上決定了產(chǎn)業(yè)的經(jīng)濟效益。
2、降低飼料轉(zhuǎn)化率對于提高經(jīng)濟效益非常重要,因此,挖掘和利用新的與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)的基因?qū)τ陔u的遺傳育種有著重大意義?;诟采w全基因組的高密度snp數(shù)據(jù)和大群體的性狀表型記錄,可通過全基因組關(guān)聯(lián)分析技術(shù)(gwas)準確定位控制性狀的候選基因。盡管該技術(shù)仍然存在一些缺陷,其已被廣泛應(yīng)用于人類復(fù)雜疾病候選基因挖掘和畜禽重要經(jīng)濟性狀關(guān)鍵基因的定位。利用gwas篩選出與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)的snp分子標記,為雞生長性狀的遺傳育種提供了可行途徑,對養(yǎng)禽業(yè)具有重要意義。
3、通過高通量測序技術(shù),揭示飼料轉(zhuǎn)化率性狀的遺傳調(diào)節(jié)機制,遴選出特定表型潛在的分子標記,提高性狀遺傳預(yù)測的準確性。具體為,通過將飼料轉(zhuǎn)化率表型和基因組數(shù)據(jù)進行關(guān)聯(lián)分析,尋找影響黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率的顯著snp位點,并鑒定出有效snp標記,為性狀早期選擇和加速遺傳選育進程提供有力工具。然而,尚未有禽類飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)遺傳分子標記的報道。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、為了解決上述技術(shù)問題,本發(fā)明的目的是提供一種與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)cdk5rap3基因snp分子標記及其應(yīng)用,以解決現(xiàn)有缺乏黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)遺傳分子標記的開發(fā)和利用的問題。
2、本發(fā)明解決上述技術(shù)問題的技術(shù)方案如下:
3、一種與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)cdk5rap3基因snp分子標記,snp分子標記多態(tài)性為a/g,位于雞27號染色體的369307位點,rs號為rs738324012。
4、進一步地,snp分子標記的突變位點及上下游序列如seq?id?no.1所示,其中,r為a>g突變位點,當r為g時,為低飼料轉(zhuǎn)化率黃羽肉雞;
5、seq?id?no.1:5’-gacgtcagcctcctcctccatctccaccaggcgc?tgtgccaggaacagctccagctgtggggaaaaggacgccgtgaggggaaggggcggccaaaacccacccgacatggggagggtgcccgagccgtcccagtgctgctcacctccatgagctcatcgatgaattggttccgtgtcgcagcattctccagcagtgtcagrgcatcggagccacgggcaactgcctcgggttctgggggatgagtggggtcagcagggaagggagctctgcggtctctgcacgctggaacccgactgtccccttgtgaccgtgctcaccctcagagccatcctccaacactgtaatctgtgccccgttgccttcaccatcaccccagtcaatgccattgtcctgcagtgat-3’。
6、一種用于檢測上述snp分子標記的引物,引物的正向引物序列如seq?id?no.2所示,反向引物序列如seq?id?no.3所示;
7、正向引物:5’-ctccagctgtggggaaaaggac-3’(seq?id?no.2);
8、反向引物:5’-caggacaatggcattgactggg-3’(seq?id?no.3)。
9、一種用于檢測上述snp分子標記的試劑盒,試劑盒包括上述引物。
10、上述snp分子標記或引物或試劑盒在篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本中的應(yīng)用。
11、一種篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本的方法,采用pcr技術(shù)對待測個體的snp分子標記進行擴增測序,篩選獲得snp分子標記基因型為gg的純合個體。
12、進一步地,采用上述引物或試劑盒進行pcr擴增。
13、進一步地,pcr擴增體系為:2×taq?master?mix?10μl,正、反向引物各1μl,dna模板1μl,ddh2o補至20μl。
14、進一步地,pcr反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性2min;94℃變性15s,56℃退火10s,72℃延伸15s,35個循環(huán);72℃延伸5min。
15、本發(fā)明具有以下有益效果:
16、本發(fā)明提供了一種位于雞第27號染色體cdk5rap3基因中的與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)的snp分子標記,該標記表明不同基因型黃羽肉雞之間的飼料轉(zhuǎn)化率存在顯著差異,可以用于高效篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀的個體或親本黃羽肉雞,將其應(yīng)用于黃羽肉雞的選育中可以快速選育得到低飼料轉(zhuǎn)化率的黃羽肉雞,可以有效降低生產(chǎn)過程中的飼料消耗量,提高企業(yè)經(jīng)濟效益和競爭力。
1.一種與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)cdk5rap3基因snp分子標記,其特征在于,所述snp分子標記多態(tài)性為a/g,位于雞27號染色體的369307位點,rs號為rs738324012。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的與黃羽肉雞飼料轉(zhuǎn)化率相關(guān)cdk5rap3基因snp分子標記,其特征在于,所述snp分子標記的突變位點及上下游序列如seq?id?no.1所示,其中,r為a>g突變位點,當r為g時,為低飼料轉(zhuǎn)化率黃羽肉雞。
3.一種用于檢測權(quán)利要求1或2所述的snp分子標記的引物,其特征在于,所述引物的正向引物序列如seq?id?no.2所示,反向引物序列如seq?id?no.3所示。
4.一種用于檢測權(quán)利要求1或2所述的snp分子標記的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括權(quán)利要求3所述的引物。
5.權(quán)利要求1或2所述的snp分子標記或權(quán)利要求3所述的引物或權(quán)利要求4所述的試劑盒在篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本中的應(yīng)用。
6.一種篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本的方法,其特征在于,采用pcr技術(shù)對待測個體的snp分子標記進行擴增測序,篩選獲得snp分子標記基因型為gg的純合個體。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本的方法,其特征在于,采用權(quán)利要求3所述的引物或權(quán)利要求4所述的試劑盒進行pcr擴增。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本的方法,其特征在于,pcr擴增體系為:2×taq?master?mix?10μl,正、反向引物各1μl,dna模板1μl,ddh2o補至20μl。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選具有低飼料轉(zhuǎn)化率優(yōu)良性狀黃羽肉雞的個體或親本的方法,其特征在于,pcr反應(yīng)條件為:94℃預(yù)變性2min;94℃變性15s,56℃退火10s,72℃延伸15s,35個循環(huán);72℃延伸5min。