本發(fā)明屬于分子生物學(xué),尤其涉及一種鑒定鴿肉和雞肉的分子生物學(xué)方法。
背景技術(shù):
1、鴿肉被譽為“動物之人參”,含有大量優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)、并含少量糖分,磷脂、鐵、鈣、維生素a、維生素b1、維生素d等營養(yǎng)成分,易于消化吸收,為孕婦、兒童、病人等人群的高級營養(yǎng)品。同時鴿子日糧主要以原糧為主,抗病力較強,疫苗和藥物使用較少,是一種天然的綠色產(chǎn)品。
2、由于鴿子繁殖效率較低,一般要半年左右才能到性成熟,一對鴿子每年僅能產(chǎn)蛋30枚左右,可繁殖后代18~20只。而雞繁殖效率極高,年產(chǎn)蛋可達300枚左右,可繁殖后代280只以上。
3、由于小型肉雞體型與鴿子相似,屠宰后一般消費者僅僅靠外觀,難以分辨真假。正常宰殺好的肉鴿每只成本在20~30元等,小型肉雞每只價格僅為2~3元。因此亟需一種快速、準確而又易于操作的技術(shù)鑒定鴿肉和雞肉,保證肉鴿行業(yè)有序、健康、穩(wěn)定發(fā)展,滿足多元化的家禽產(chǎn)品需求。
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、本發(fā)明的目的之一在于針對現(xiàn)有技術(shù)不足,提供一種鑒定鴿肉和雞肉的分子生物學(xué)方法。
2、本發(fā)明的目的之二在于提供用于檢測上述分子標記的引物。
3、本發(fā)明的目的之三在于提供上述分子標記的用途。
4、本發(fā)明的目的之四在于提供利用上述分子標記的檢測方法。
5、本發(fā)明的目的通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):
6、一種鑒定鴿肉和雞肉的分子標記,所述分子標記利用毛細管電泳的峰值來區(qū)分是否含有鴿肉和雞肉,當峰值為259bp時,為鴿肉;當峰值為235bp時,為雞肉。一種鑒定鴿肉和雞肉的方法,為提取待檢測肉基因組dna,pcr擴增并毛細管電泳后,進行峰值分析,當峰值為259bp時,為鴿肉;當峰值為235bp時,為雞肉。
7、本發(fā)明還提供一種鑒定鴿肉和雞肉的分子標記的引物對,其中:
8、正向引物(seq?id?no.1):5'-ctagcctgtcaaaaatacg-3'
9、反向引物(seq?id?no.2):5'-ccagaaagaaattcaagaa?-3'。
10、本發(fā)明還提供含有上述引物對的用于鑒別鴿肉和雞肉的試劑盒。
11、本發(fā)明還提供上述分子標記或引物或試劑盒對在鑒別鴿肉和雞肉中的應(yīng)用。
12、本發(fā)明還提供上述分子標記或引物或試劑盒對在篩選鴿肉中的應(yīng)用。
13、本發(fā)明還提供上述分子標記或引物或試劑盒對在篩選雞肉中的應(yīng)用。
14、本發(fā)明還提供一種鑒定鴿肉和雞肉的方法,通過引物對seq?id?no.1/seq?idno.2擴增鴨基因組dna,毛細管電泳后,進行峰值分析,當峰值為259bp時,為鴿肉;當峰值為235bp時,為雞肉。
15、在一種具體的實施方式中,本發(fā)明還提供檢測鴿肉和雞肉的快速鑒定方法,包括以下步驟:
16、1)提取待測肉中的基因組dna;
17、2)以步驟1)中提取的dna為模板,利用本發(fā)明所述引物對,進行pcr擴增反應(yīng);
18、3)步驟2)中pcr反應(yīng)體系為:2×pcr?mix(南京諾唯贊生物有限公司)25μl,10μmol/l正方向引物各1μl,50-100μg/ml模板dna?2μl,超純水21μl;
19、4)步驟2)中pcr反應(yīng)程序為:
20、5)反應(yīng)結(jié)束后,pcr產(chǎn)物經(jīng)毛細管電泳后,進行峰值分析。
21、6)當峰值為259bp時,為鴿肉;當峰值為235bp時,為雞肉。
22、有益效果:
23、本發(fā)明利用毛細管電泳的峰值鑒別鴿肉和雞肉,優(yōu)點在于能夠快速、準確鑒定鴿肉和雞肉,打擊以次充好的不良商家。并且該法操作簡單、易于實驗室操作、便于基層推廣和使用,具有廣闊的市場應(yīng)用前景,此外,基于本發(fā)明方法開發(fā)的檢測試劑盒,可產(chǎn)生可觀的經(jīng)濟效益和良好的社會價值。
1.一種鑒定鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,通過seq?id?no.1和seq?id?no.2所示引物對待檢測樣品基因組dna進行pcr擴增,毛細管電泳后,進行序列比對,當峰值為259bp時,為鴿肉;當峰值為235bp時,為雞肉。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,所述的鴿為白羽王鴿、銀王鴿、白卡奴鴿、泰深鴿。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,所述的雞為wod168、益生909、817肉雞。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,pcr反應(yīng)體系為:2×pcrmix25μl,10μmol/l正方向引物各1μl,50-100μg/ml模板dna?2μl,超純水21μl。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的鑒定鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,pcr反應(yīng)程序為:
6.一種篩選鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,通過seq?id?no.1和seq?id?no.2所示引物對待檢測樣品基因組dna進行pcr擴增,毛細管電泳后,進行序列比對,當峰值為259bp時,為鴿肉;當峰值為235bp時,為雞肉。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,pcr反應(yīng)體系為:2×pcrmix?25μl,10μmol/l正方向引物各1μl,50-100μg/ml模板dna?2μl,超純水21μl。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,pcr反應(yīng)程序為:
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,所述的鴿為白羽王鴿、銀王鴿、白卡奴鴿、泰深鴿。
10.根據(jù)權(quán)利要求6所述的篩選鴿肉和雞肉的方法,其特征在于,所述的雞為wod168、益生909、817肉雞。