本發(fā)明屬于微生物，涉及一株棕櫚油假絲酵母tdlz1(candidapalmioleophila)tdlz1及其應(yīng)用。該真菌具有高效的四環(huán)素降解功能。

背景技術(shù)：

1、四環(huán)素作為人與獸用共同使用的抗生素，是現(xiàn)有抗生素中應(yīng)用最為廣泛的一類。四環(huán)素是一種廣譜抗生素，具有殺菌活性，其作用機制主要是阻止氨酰基與核糖核蛋白體的結(jié)合，阻止肽鏈的增長和蛋白質(zhì)的合成，從而抑制細菌的生長。因其廣譜、使用方便、經(jīng)濟等特點被廣泛使用。

2、目前抗生素在畜牧和水產(chǎn)養(yǎng)殖過程，醫(yī)院廢水排放和制藥廠生產(chǎn)過程中，會產(chǎn)生大量含抗生素的廢水廢渣，如果處理不當(dāng)而排入環(huán)境，會對環(huán)境造成污染。同時，抗生素在進入生物體時，不能被完全吸收，會以原型或代謝產(chǎn)物的形式通過糞便和尿液排出，進入環(huán)境中。這些物質(zhì)可能對土壤和水體等造成污染。環(huán)境中抗生素的持久殘留會產(chǎn)生生態(tài)毒性，對水生生物生長、繁殖和行為產(chǎn)生不利影響，影響生態(tài)系統(tǒng)功能和穩(wěn)定。同時，抗生素引發(fā)的耐藥基因通過食物鏈在人體內(nèi)富集，增加抗生素治療的難度，對公共衛(wèi)生構(gòu)成潛在威脅。因此，在抗生素產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和環(huán)境治理中，去除抗生素殘留物已成為一項迫切需要解決的重要問題。

3、微生物降解四環(huán)素是一種自然且環(huán)境友好的方法，不會引入額外的化學(xué)物質(zhì)或產(chǎn)生有害的副產(chǎn)品。這種方法與傳統(tǒng)的化學(xué)處理方法相比，對環(huán)境影響更小。目前關(guān)于能夠降解四環(huán)素的真菌菌株的研究報道較為稀少，真菌在降解抗生素和其他有機污染物方面的潛力尚未充分挖掘，這對真菌在環(huán)境科學(xué)領(lǐng)域的進展和應(yīng)用構(gòu)成了限制。因此，發(fā)現(xiàn)和分離更多新型功能真菌對于四環(huán)素去除技術(shù)的創(chuàng)新和進步至關(guān)重要。這不僅有助于拓展真菌在環(huán)境保護和廢水處理中的應(yīng)用領(lǐng)域，還能推動對微生物在自然環(huán)境中作用機制的深入理解。

4、本發(fā)明從嗜鹽顆粒污泥中分離、純化出一株具有四環(huán)素降解功能的真菌菌株tdlz1，在好氧的條件下，可以在一定的鹽度范圍內(nèi)高效的去除水體中的四環(huán)素。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明所提供的一株四環(huán)素降解功能真菌tdlz1，通過對其dna提取，對其28srdna區(qū)域pcr擴增，在genbank中進行blast比對和進化樹構(gòu)建分析，并結(jié)合其形態(tài)特征觀察，確定該菌株為棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)，并命名為棕櫚油假絲酵母菌tdlz1(candida?palmioleophila?tdlz1)。

2、本發(fā)明提供的棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)tdlz1在菌株接種到lb固體培養(yǎng)基中，于30℃條件下避光培養(yǎng)，培養(yǎng)48h后，菌落形態(tài)呈圓形，表面光滑，菌落小，不透明，邊緣整齊，呈乳白色。

3、本發(fā)明提供的棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)tdlz1接種到lb液體培養(yǎng)基中，于30℃，120rpm避光培養(yǎng)10h進入對數(shù)生長期，48h生物量達到最大。

4、本發(fā)明提供的棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)tdlz1菌株于2024年9月2日保存于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為cgmccno.31833。保藏地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學(xué)院微生物研究所。

5、本發(fā)明提供的棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)tdlz1發(fā)揮優(yōu)良性能的最佳條件為：碳源＝乙酸鈉+四環(huán)素，初始接種量＝5ml以上，溫度＝35℃，鹽度＝0-30g/lnacl，ph＝7.0-9.0。

6、本發(fā)明提供的棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)tdlz1能夠在以乙酸鈉、檸檬酸鈉、葡萄糖等有機碳和四環(huán)素為共同碳源的無機鹽培養(yǎng)基中生長。在好氧條件下以有機碳源為電子供體，維持其生長需求，同時降解四環(huán)素。當(dāng)初始四環(huán)素濃度為10-70mg/l時，降解率可達到71.9％以上。

7、本發(fā)明提供的棕櫚油假絲酵母菌(candida?palmioleophila)tdlz1在好氧條件下能良好的生長并降解四環(huán)素，對碳源的使用種類也有良好的適應(yīng)性，具有良好的應(yīng)用前景。

技術(shù)特征：

1.一株具有四環(huán)素降解功能的真菌tdlz1，其特征在于：該菌株為棕櫚油假絲酵母tdlz1(candida?palmioleophila)tdlz1，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心cgmcc，保藏日期為2024年9月2日，保藏號為cgmccno.31833。

2.應(yīng)用如權(quán)利要求1所述一株具四環(huán)素降解功能的真菌的方法，其特征在于：菌株tdlz1接種到lb固體培養(yǎng)基中，于30℃條件下培養(yǎng)。

3.應(yīng)用如權(quán)利要求1所述的一株四環(huán)素降解真菌tdlz1的方法，其特征在于：菌株tdlz1在lb液體培養(yǎng)基中，30℃，120rpm生長48h。

4.應(yīng)用如權(quán)利要求1所述的一株四環(huán)素降解真菌tdlz1的方法，其特征在于：菌株tdlz1利用的有機碳源包括葡萄糖，乙酸鈉，檸檬酸鈉和四環(huán)素，利用的無機氮源為氨氮，利用的無機磷源為正磷酸鹽；將該菌接種到以有機碳和四環(huán)素為復(fù)合碳源，氨氮為氮源，正磷酸鹽為磷源的培養(yǎng)基中，實現(xiàn)四環(huán)素的去除；培養(yǎng)條件為：初始接種量為5ml，培養(yǎng)溫度為35℃，鹽度為0-30g/l?nacl，ph為7.0-9.0。

5.應(yīng)用如權(quán)利要求1所述的一株四環(huán)素降解真菌tdlz1的方法，其特征在于：菌株tdlz1在含有四環(huán)素為10mg/l-70mg/l的乙酸鈉無機鹽培養(yǎng)基中，在35℃，120rpm，鹽度為20g/lnacl,初始接種量為5ml的條件下振蕩條件下培養(yǎng)。

技術(shù)總結(jié)
一株四環(huán)素類抗生素降解真菌TDLZ1及其應(yīng)用屬于微生物領(lǐng)域。所述菌株于2024年9月2日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC)，保藏編號為CGMCCNo.31833。棕櫚油假絲酵母菌(Candida?palmioleophila)TDLZ1對抗生素四環(huán)素具有較好降解效果，在鹽度0?30g/L，溫度＝35℃，pH＝7?9的條件下，菌株對濃度為10?70mg/L的四環(huán)素能高效去除，并可以將四環(huán)素降解為無毒產(chǎn)物。該菌株可以應(yīng)用于降解處理生產(chǎn)企業(yè)廢棄物和環(huán)境中殘留的四環(huán)素。在醫(yī)藥廢水處理、養(yǎng)殖廢水處理、水體修復(fù)、資源回收等領(lǐng)域發(fā)揮重要作用。

技術(shù)研發(fā)人員：崔有為,李貞瑩
受保護的技術(shù)使用者：北京工業(yè)大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6