本申請涉及微生物，尤其涉及一種長枝木霉菌株及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、卷煙行業(yè)中，卷煙產(chǎn)品不斷地進行改進，例如，卷煙產(chǎn)品的焦油含量不斷地降低，以實現(xiàn)降焦減害，在降低焦油含量地同時，勢必會影響卷煙產(chǎn)品的抽吸口感、香味，所以還要相應(yīng)的對卷煙產(chǎn)品的香味、口感進行改善，改善手段往往是通過向卷煙產(chǎn)品中添加香料實現(xiàn)，香料的添加能夠彌補焦油量降低導(dǎo)致的口感不足，目前應(yīng)用于卷煙產(chǎn)品的香料具有天然香料以及合成香料，微生物發(fā)酵制備香料是獲取天然香料的重要途經(jīng)，且和合成香料相比，微生物發(fā)酵制備的香料香氣更為飽和，生產(chǎn)周期短；在微生物領(lǐng)域中，木霉菌屬是一種廣泛應(yīng)用于農(nóng)業(yè)、制藥等行業(yè)的真菌，木霉菌屬在制備卷煙香料方面還未有相關(guān)研究、發(fā)現(xiàn)。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本申請的目的在于提供一種長枝木霉菌株及其制備方法和應(yīng)用，該長枝木霉菌株能夠制備卷煙香料，可以提升卷煙的香氣品質(zhì)，從而有效解決現(xiàn)有技術(shù)中存在的不足之處。

2、為此，本申請實施例提供了一種長枝木霉菌株，其保藏編號為cgmcc?no：41364。

3、本申請實施例還提供了一種長枝木霉菌株的制備方法，包括以下各步驟：

4、a、將茶葉樣品置于無菌生理鹽水中，經(jīng)振蕩稀釋后涂布于ypd固體培養(yǎng)基上，得到初篩菌株；

5、b、將步驟a中得到的初篩菌株用ypd液體培養(yǎng)基活化培養(yǎng)，勾取菌絲或離心得到菌沉淀接種于復(fù)篩發(fā)酵培養(yǎng)基中，進行發(fā)酵。

6、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述步驟b中，按質(zhì)量百分比計，所述ypd液體培養(yǎng)基包括：蛋白胨2％、葡萄糖2％、酵母粉1％以及去離子水100ml。

7、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述步驟a中，按質(zhì)量百分比計，所述ypd固體培養(yǎng)基包括：蛋白胨2％、葡萄糖2％、酵母粉1％、去離子水100ml以及瓊脂2％。

8、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述步驟a中，所述復(fù)篩發(fā)酵培養(yǎng)基包括煙草提取液。

9、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述茶葉樣品為做青茶葉樣品。

10、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述步驟a中，振蕩在30℃環(huán)境下進行，且于搖床中振蕩6-8h。

11、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述步驟a中，稀釋經(jīng)由10-0、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5的梯度進行稀釋。

12、本申請實施例還提供一種長枝木霉菌株在制備卷煙香料中的應(yīng)用。

13、用長枝木霉菌株制備卷煙香料的方法包括：

14、將長枝木霉菌活化培養(yǎng)，得到菌液和菌絲，將菌液和菌絲接種于斜面固體培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，待斜面固體培養(yǎng)基長出綠色孢子，取無菌水加入斜面試管內(nèi)，將斜面固體培養(yǎng)基上的孢子取下并溶于斜面試管的無菌水中，制備成孢子懸浮液，將孢子懸浮液稀釋后接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵。

15、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述孢子懸浮液稀釋后的孢子濃度為1×107～1.1×107cfu/ml。

16、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述菌液于斜面固體培養(yǎng)基的接種量為1vol％。

17、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括煙草提取液。

18、在一些可能的實現(xiàn)方式中，所述孢子懸浮液稀釋后于發(fā)酵培養(yǎng)基中的發(fā)酵時間為72h，且于180r/min轉(zhuǎn)速的狀態(tài)下進行。

19、根據(jù)本申請實施例提供的長枝木霉菌株，可以應(yīng)用在卷煙香料的制備領(lǐng)域，拓寬了木霉菌屬的應(yīng)用范圍，而且煙草提取液還可以利用卷煙廠的廢棄煙草，為廢棄煙草的再利用提供了新途徑，該長枝木霉菌株利用煙草產(chǎn)品制備出的卷煙香料，可以有效改善由于焦油量降低帶來的口感負面化影響，提升卷煙的抽吸口感，利于提升卷煙的抽吸品質(zhì)。

技術(shù)特征：

1.一種長枝木霉菌株，其特征在于，其保藏編號為cgmcc?no：41364。

2.如權(quán)利要求1所述的一種長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于，包括以下各步驟：

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于，所述步驟b中，按質(zhì)量百分比計，所述ypd液體培養(yǎng)基包括：蛋白胨2%、葡萄糖2%、酵母粉1%以及去離子水100ml。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于，所述步驟a中，按質(zhì)量百分比計，所述ypd固體培養(yǎng)基包括：蛋白胨2%、葡萄糖2%、酵母粉1%、去離子水100ml以及瓊脂2%。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于：所述步驟a中，所述復(fù)篩發(fā)酵培養(yǎng)基包括煙草提取液。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于：所述茶葉樣品為做青茶葉樣品。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于：所述步驟a中，振蕩在30℃環(huán)境下進行，且于搖床中振蕩6-8h。

8.根據(jù)權(quán)利要求2所述的長枝木霉菌株的制備方法，其特征在于：所述步驟a中，稀釋經(jīng)由10-0、10-1、10-2、10-3、10-4、10-5的梯度進行稀釋。

9.如權(quán)利要求1所述的一種長枝木霉菌株在制備卷煙香料中的應(yīng)用。

10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，用長枝木霉菌株制備卷煙香料的方法包括：

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于：所述孢子懸浮液稀釋后的孢子濃度為1×107～1.1×107cfu/ml。

12.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于：所述菌液于斜面固體培養(yǎng)基的接種量為1vol％。

13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于：所述發(fā)酵培養(yǎng)基包括煙草提取液。

14.根據(jù)權(quán)利要求10所述的應(yīng)用，其特征在于：所述孢子懸浮液稀釋后于發(fā)酵培養(yǎng)基中的發(fā)酵時間為72h，且于180r/min轉(zhuǎn)速的狀態(tài)下進行。

技術(shù)總結(jié)
本申請涉及一種長枝木霉菌株，其保藏編號為CGMCC?NO：41364，該長枝木霉菌株能夠應(yīng)用于卷煙香料的制備，將長枝木霉菌活化培養(yǎng)，待斜面固體培養(yǎng)基長出綠色孢子，取無菌水加入斜面試管內(nèi)，將斜面固體培養(yǎng)基上的孢子取下并溶于斜面試管的無菌水中，制備成孢子懸浮液，將孢子懸浮液稀釋后接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中進行發(fā)酵。根據(jù)本申請實施例提供的長枝木霉菌株，可以應(yīng)用在卷煙香料的制備領(lǐng)域，拓寬了木霉菌屬的應(yīng)用范圍，而且煙草提取液還可以利用卷煙廠的廢棄煙草，為廢棄煙草的再利用提供了新途徑，該長枝木霉菌株利用煙草產(chǎn)品制備出的卷煙香料，可以有效改善由于焦油量降低帶來的口感負面化影響，提升卷煙的抽吸口感，利于提升卷煙的抽吸品質(zhì)。

技術(shù)研發(fā)人員：任瑞冰,朱春陽,崔成哲,陳明,李寶志,李河霖,張文龍
受保護的技術(shù)使用者：吉林煙草工業(yè)有限責任公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9