1.一種長(zhǎng)效重組人促卵泡激素純化方法,所述純化方法包括以下步驟:
2.如權(quán)利要求1所述的純化方法,所述染料親和層析是將細(xì)胞培養(yǎng)液上樣于diamondblue為填料的層析柱,用含鹽的tris鹽溶液進(jìn)行洗脫;所述含鹽的tris溶液的中所含鹽為nacl、kcl或mgcl2,優(yōu)選為nacl;所含鹽的濃度為1.0m~3.0m,優(yōu)選為2.0m;所述tris溶液中tris濃度為10mm~50mm,通過(guò)加入酸成分形成ph緩沖體系,所述酸成分選自hac或hcl。
3.如權(quán)利要求1或2中任一項(xiàng)所述的純化方法,所述染料親和層析洗脫液還包含異丙醇,所述異丙醇的體積濃度為5%~30%,優(yōu)選為5%~20%,更優(yōu)選為10%。
4.如權(quán)利要求3所述的純化方法,所述染料親和層析洗脫液的ph為6~8。
5.如權(quán)利要求4所述的純化方法,所述染料親和層析洗脫條件為:使用含nacl的tris-hac鹽溶液進(jìn)行洗脫,所述nacl的濃度為2.0m,所述tris-hac溶液中tris濃度為10mm~50mm;所述染料親和層析洗脫液還包含10%異丙醇;所述染料親和層析洗脫液的ph為7.2±0.2。
6.如權(quán)利要求5所述的純化方法,所述病毒滅活使用的去污劑選自吐溫80或triton?x-100。
7.如權(quán)利要求6所述的純化方法,所述病毒滅活為使用1%吐溫80進(jìn)行孵育;所述孵育的時(shí)間為4~8h,優(yōu)選為6h。
8.如權(quán)利要求7所述的純化方法,所述疏水層析是將病毒滅活液上樣于generik?mc60-hic?phenyl為填料的層析柱,用tris溶液進(jìn)行洗脫;所述tris溶液濃度中tris濃度為5mm~20mm,通過(guò)加入酸成分形成ph緩沖體系,所述酸成分選自hac或hcl。
9.如權(quán)利要求8所述的純化方法,所述疏水層析洗脫液的ph為6~8。
10.如權(quán)利要求9所述的純化方法,所述疏水層析洗脫條件為:使用tris-hac溶液進(jìn)行洗脫,所述tris-hac溶液中tris濃度為5mm~20mm,優(yōu)選為tris濃度為5mm;所述疏水親和層析洗脫液的ph為7.2±0.2。