本發(fā)明屬于多糖提取，具體涉及一種紫薯多糖的提取、純化方法。

背景技術(shù)：

1、多糖是動(dòng)、植物和微生物體重要的生物活性大分子，具有眾多的生理作用。而且一些多糖已被作為治療疾病的藥物和保健食品來(lái)開發(fā)，而多糖的提取和分離純化是多糖后續(xù)研究包括多糖結(jié)構(gòu)、功能活性等方面研究的首要和必要工藝，因此，有效提取和分離純化多糖對(duì)于多糖的研究顯得尤為重要。

2、目前對(duì)于多糖的提取發(fā)展了眾多的技術(shù)，主要包括熱水浸提法(或水提醇沉法)、超聲波與微波輔助提取、酶法提取等。但這些提取技術(shù)各有優(yōu)缺點(diǎn)，我們應(yīng)該根據(jù)多糖的性質(zhì)和自身實(shí)驗(yàn)條件選擇合適的提取技術(shù)。近年來(lái)，紫薯中豐富的營(yíng)養(yǎng)成分而引起了人們的關(guān)注，但對(duì)紫薯多糖的研究報(bào)道甚少。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、有鑒于此，本發(fā)明的目的在于提供一種紫薯多糖的提取、純化方法，以解決目前紫薯多糖提取方法較少的問(wèn)題。

2、為達(dá)到上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

3、本發(fā)明提供一種紫薯多糖的提取、純化方法，包括以下步驟，

4、s1、準(zhǔn)備紫薯、輔助試劑及儀器設(shè)備；

5、s2、將紫薯去皮、清洗、切片、晾干、粉碎并研磨，得紫薯粉末；

6、s3、將紫薯粉末加入無(wú)水乙醇中，進(jìn)行冷凝回流脫脂處理，廢棄上清液后加入蒸餾水，浸提；

7、s4、將提取后的混合物離心處理，收集上清液合并，減壓濃縮后得濃縮液；

8、s5、向濃縮液中加入無(wú)水乙醇，置于過(guò)夜并收集多糖沉淀；再將多糖沉淀依次采用乙醇、丙酮洗滌并進(jìn)行冷凍干燥，而后加入蒸餾水使其溶解；并進(jìn)行脫蛋白處理，然后向溶解液中加入脫色劑進(jìn)行脫色處理，攪拌后離心除去脫色劑；

9、s6、將步驟s5去除脫色劑后的溶劑裝入透析袋中透析，凍干后得紫薯多糖粗品；

10、s7、稱取紫薯多糖后采用蒸餾水復(fù)溶，并采用微孔濾膜過(guò)濾后裝入纖維素柱中，使其靜置吸附，而后采用nacl溶液洗脫，收集洗脫液；

11、s8、將收集到的洗脫液用苯酚-硫酸法顯色后，用紫外-可見分光光度計(jì)測(cè)定490nm波長(zhǎng)下的吸光度，直至無(wú)洗脫峰為止，合并主要吸收峰的洗脫液；

12、s9、將收集的洗脫液經(jīng)濃縮，透析，冷凍干燥后用蒸餾水復(fù)溶，然后用sephadex?g-100凝膠進(jìn)一步分離，用蒸餾水洗脫，并收集洗脫液；采用與deae-52纖維素柱相同條件下監(jiān)測(cè)、收集洗脫液，收集所得各組分收集，凍干后即可得紫薯多糖純品。

13、進(jìn)一步地，所述步驟s3中，紫薯粉末與無(wú)水乙醇的質(zhì)量比為0.8-1.2∶6；浸提條件為80℃，共浸提2次，每次2h。

14、進(jìn)一步地，所述步驟s4中，減壓濃縮量為原濃縮前的0.15-0.25倍。

15、進(jìn)一步地，所述步驟s5中，無(wú)水乙醇與濃縮液的體積比為3.8-4.2∶1-1.2，過(guò)夜溫度為4℃；多糖與蒸餾水質(zhì)量比為5∶2；脫蛋白處理時(shí)采用sevage試劑；脫色劑為硅藻土。

16、進(jìn)一步地，所述步驟s6中，透析條件為，采用蒸餾水透析72h。

17、進(jìn)一步地，所述步驟s7中，復(fù)溶后紫薯多糖的濃度為5mg/ml；微孔濾膜的孔徑為0.45μm；deae-52纖維素柱為φ2×30cm；nacl溶液洗滌次數(shù)6次，每次濃度為0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mol/l，洗滌流速為1.2ml/min。

18、進(jìn)一步地，所述步驟s8中，測(cè)定吸光度時(shí)，以管數(shù)為橫坐標(biāo)，a490nm為縱坐標(biāo)繪制洗脫曲線。

19、進(jìn)一步地，所述步驟s9中，洗脫時(shí)以0.5ml/min的流速。

20、本發(fā)明的有益效果在于：

21、1、本發(fā)明中，通過(guò)sevage法脫蛋白，蛋白脫除率為93.14％，與預(yù)測(cè)結(jié)果僅相差0.86％，驗(yàn)證結(jié)果表明，實(shí)驗(yàn)值與預(yù)測(cè)值無(wú)顯著性差異，表明該響應(yīng)模型能夠充分反映預(yù)期的優(yōu)化。

22、2、本發(fā)明中，通過(guò)deae-52纖維素柱和sephadex?g-100凝膠柱對(duì)紫薯粗多糖進(jìn)行分離、純化，結(jié)果表明提取物種幾乎不含蛋白質(zhì)和糖醛酸，且糖含量高達(dá)92.52％，說(shuō)明紫薯粗多糖得到有效提取。

23、3、采用本發(fā)明的提取、純化方法，所得的紫薯多糖純度高、收率高，純化的紫薯多糖具有顯著的抗氧化活性，對(duì)油脂等具有良好的抗氧化效果；此外純化的紫薯多糖在ph值中性或偏堿性、溫度低于45℃、自然光或避光條件下保存，穩(wěn)定性較好。

24、4、本發(fā)明創(chuàng)造提供了一種高效、簡(jiǎn)便提取、純化方法，為紫薯多糖的開發(fā)利用提供了有力支持。

25、本發(fā)明的其他優(yōu)點(diǎn)、目標(biāo)和特征將在隨后的說(shuō)明書中進(jìn)行闡述，并且在某種程度上對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言是顯而易見的，或者本領(lǐng)域技術(shù)人員可以從本發(fā)明的實(shí)踐中得到教導(dǎo)。本發(fā)明的目標(biāo)和其他優(yōu)點(diǎn)可以通過(guò)下面的說(shuō)明書來(lái)實(shí)現(xiàn)和獲得。

技術(shù)特征：

1.一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：包括以下步驟，

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s3中，紫薯粉末與無(wú)水乙醇的質(zhì)量比為0.8-1.2∶6；浸提條件為80℃，共浸提2次，每次2h。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s4中，減壓濃縮量為原濃縮前的0.15-0.25倍。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s5中，無(wú)水乙醇與濃縮液的體積比為3.8-4.2∶1-1.2，過(guò)夜溫度為4℃；多糖與蒸餾水質(zhì)量比為5∶2；脫蛋白處理時(shí)采用sevage試劑；脫色劑為硅藻土。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s6中，透析條件為，采用蒸餾水透析72h。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s7中，復(fù)溶后紫薯多糖的濃度為5mg/ml；微孔濾膜的孔徑為0.45μm；deae-52纖維素柱為φ2×30cm；nacl溶液洗滌次數(shù)6次，每次濃度為0.05，0.1，0.2，0.3，0.4，0.5mol/l，洗滌流速為1.2ml/min。

7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s8中，測(cè)定吸光度時(shí)，以管數(shù)為橫坐標(biāo)，a490nm為縱坐標(biāo)繪制洗脫曲線。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種紫薯多糖的提取、純化方法，其特征在于：所述步驟s9中，洗脫時(shí)以0.5ml/min的流速。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了一種紫薯多糖的提取、純化方法，屬于多糖提取技術(shù)領(lǐng)域。S1、將紫薯預(yù)處理，得紫薯粉末；S2、紫薯粉末粗提?。杭訜o(wú)水乙醇、經(jīng)凝回流脫脂處、浸提；減壓濃縮后得濃縮液；對(duì)濃縮液醇沉，加入蒸餾水進(jìn)行脫蛋白處理，而后脫色處理，離心除脫色劑；透析后凍干得紫薯多糖粗品；S3、紫薯多糖純化：復(fù)溶紫薯多糖，裝入纖維素柱中靜置吸附，采用NaCl溶液洗脫，收集洗脫液顯色后，測(cè)定吸光度直至無(wú)洗脫峰，合并洗脫液經(jīng)濃縮、透析，復(fù)溶、分離后洗脫，收集洗脫液凍干后得紫薯多糖純品。本發(fā)明所得的紫薯多糖純度高、收率高，純化的紫薯多糖具有顯著的抗氧化活性，對(duì)油脂等具有良好的抗氧化效果；純化的紫薯多糖自然光或避光條件下保存，穩(wěn)定性好。

技術(shù)研發(fā)人員：黃剛良,周石洋,楊文健
受保護(hù)的技術(shù)使用者：重慶師范大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9