本發(fā)明屬于儲(chǔ)糧抗性害蟲識(shí)別，具體地說是一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)。

背景技術(shù)：

1、儲(chǔ)糧害蟲是影響糧食儲(chǔ)藏安全與品質(zhì)的重要因素之一。近年來，隨著農(nóng)藥的廣泛使用，害蟲逐漸發(fā)展出對(duì)常見殺蟲劑的抗性，給糧食儲(chǔ)藏帶來極大挑戰(zhàn)。傳統(tǒng)識(shí)別害蟲抗性的方法通常依賴于生物測定或化學(xué)分析方法，然而，上述方法存在耗時(shí)長、成本高且操作復(fù)雜的問題，導(dǎo)致目前識(shí)別的效果較差。

2、為此，本領(lǐng)域技術(shù)人員提出了一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)來解決背景技術(shù)提出的問題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，以解決現(xiàn)有技術(shù)中傳統(tǒng)識(shí)別害蟲抗性的方法通常依賴于生物測定或化學(xué)分析方法，然而，上述方法存在耗時(shí)長、成本高且操作復(fù)雜的問題，導(dǎo)致目前識(shí)別的效果較差等問題。

2、一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，包括針對(duì)線粒體編碼基因nad5、nad6和atp6的特異性引物對(duì)，該特異性引物對(duì)能夠準(zhǔn)確識(shí)別并擴(kuò)增所述抗性害蟲體內(nèi)的所述三個(gè)基因，從而判定害蟲是否具有抗性。

3、優(yōu)選的，所述線粒體編碼nad5基因的序列包括nad5-f/nad5-r，所述nad5基因的特異性引物擴(kuò)增產(chǎn)物長度為89bp，擴(kuò)增效率為106.1％。

4、優(yōu)選的，所述線粒體編碼nad6基因的序列包括nad6-f/nad6-r,所述nad6基因的特異性引物擴(kuò)增產(chǎn)物長度為188bp，擴(kuò)增效率為90.76％。

5、優(yōu)選的，所述線粒體編碼atp6基因的序列包括atp6-f/atp6-r，所述atp6基因的特異性引物擴(kuò)增產(chǎn)物長度為115bp，擴(kuò)增效率為93.26％。

6、一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的方法，包括以下步驟：

7、s1、首先從待檢測的儲(chǔ)糧害蟲中提取dna；

8、s2、接著使用所述特異性引物對(duì)分別擴(kuò)增nad5、nad6和atp6基因；

9、s3、最后分析擴(kuò)增產(chǎn)物，若nad5、nad6和atp6基因均能被成功擴(kuò)增，則判定該害蟲具有抗性。

10、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

11、1、快速高效：本發(fā)明的特征引物對(duì)能夠迅速識(shí)別儲(chǔ)糧害蟲體內(nèi)與抗性相關(guān)的線粒體編碼基因，相比傳統(tǒng)方法，大大提高了檢測速度和效率。

12、2、準(zhǔn)確可靠：基于分子生物學(xué)的檢測原理，直接針對(duì)抗性相關(guān)基因進(jìn)行檢測，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，減少了誤判和漏判的可能性。

13、3、經(jīng)濟(jì)實(shí)用：該方法操作簡單，成本較低，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用于糧食儲(chǔ)藏行業(yè)，對(duì)于提高糧食儲(chǔ)藏安全性具有重要意義。

技術(shù)特征：

1.一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，其特征在于：包括針對(duì)線粒體編碼基因nad5、nad6和atp6的特異性引物對(duì)，該特異性引物對(duì)能夠準(zhǔn)確識(shí)別并擴(kuò)增所述抗性害蟲體內(nèi)的所述三個(gè)基因，從而判定害蟲是否具有抗性。

2.如權(quán)利要求1所述一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，其特征在于：所述線粒體編碼nad5基因的序列包括nad5-f/nad5-r。

3.如權(quán)利要求1所述一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，其特征在于：所述線粒體編碼nad6基因的序列包括nad6-f/nad6-r。

4.如權(quán)利要求1所述一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，其特征在于：所述線粒體編碼atp6基因的序列包括atp6-f/atp6-r。

5.如權(quán)利要求1-4任一所述用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的方法，其特征在于：包括以下步驟：

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于儲(chǔ)糧抗性害蟲識(shí)別技術(shù)領(lǐng)域，提供了一種用于識(shí)別儲(chǔ)糧抗性害蟲的特異性引物對(duì)，包括針對(duì)線粒體編碼基因Nad5、Nad6和Atp6的特異性引物對(duì)，該特異性引物對(duì)能夠準(zhǔn)確識(shí)別并擴(kuò)增所述抗性害蟲體內(nèi)的所述三個(gè)基因，從而判定害蟲是否具有抗性；本方法基于分子生物學(xué)的檢測原理，直接針對(duì)抗性相關(guān)基因進(jìn)行檢測，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，減少了誤判和漏判的可能性，同時(shí)該方法操作簡單，成本較低，適合大規(guī)模推廣應(yīng)用于糧食儲(chǔ)藏行業(yè)，對(duì)于提高糧食儲(chǔ)藏安全性具有重要意義。

技術(shù)研發(fā)人員：張遠(yuǎn)鵬,徐瑞智,謝明玲,饒全欣,李青春
受保護(hù)的技術(shù)使用者：宜賓學(xué)院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9