本發(fā)明屬于醫(yī)藥，更具體地說，涉及egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2及其制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、靶向療法作為精準(zhǔn)治療的重要組成部分，在近幾年來取得了突破性進(jìn)展。smdc由于其優(yōu)異的細(xì)胞穿透能力、非免疫原性和相對較小的分子量等優(yōu)點，在部分實體瘤中顯示出比adc更好的治療效果。smdc是一類以小分子作為靶向配體與具有不同作用機制的其它小分子藥物偶聯(lián)從而實現(xiàn)對疾病的精準(zhǔn)治療和產(chǎn)生1+1>2的療效的新興藥物。其化學(xué)結(jié)構(gòu)由靶向受體的小分子配體（small?molecule?binder）、連接鏈（linker）和具有不同作用機制的其它藥用分子（payload）三部分組成。目前針對smdc藥物分子的研究相對較少，但是現(xiàn)有的臨床數(shù)據(jù)顯示，現(xiàn)有的smdc藥物分子均顯示出較好的臨床療效。

2、眾所周知，三陰性乳腺癌（triple-negative?breast?cancer，tnbc）由于其腫瘤異質(zhì)性強、缺乏有效治療靶點、對普通內(nèi)分泌治療和靶向治療不敏感、對傳統(tǒng)化療藥物易產(chǎn)生獲得性耐藥等特點已成為死亡率極高的女性惡性腫瘤之一。根據(jù)國際癌癥研究機構(gòu)（international?agency?for?research?on?cancer，iarc）的最新統(tǒng)計，到2022年，全球女性乳腺癌新發(fā)病例將達(dá)到229.6萬例，占全球癌癥新發(fā)病例總數(shù)的11.5%。其中，tbnc患者占15%-20%，且發(fā)病率和死亡率逐年上升。早期tnbc患者可通過手術(shù)、放療和化療等手段獲得較好的臨床療效，5年生存期也可以達(dá)到77%左右，但晚期或已發(fā)生癌細(xì)胞轉(zhuǎn)移患者因缺乏有效的治療手段，目前5年生存期僅為14%左右，急需尋求有效的治療手段。通過大量的數(shù)據(jù)分析和文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，有大約60%的基底細(xì)胞樣tnbc患者的癌細(xì)胞中高表達(dá)表皮生長因子受體（epidermal?growth?factor?receptor，egfr），大約有89%的tnbc患者對egfr治療敏感，特別是對于egfr過表達(dá)的基底樣-2型腫瘤。然而，單藥使用egfr抑制劑卻難以取的令人滿意的臨床療效。因此，以egfr抑制劑為靶向配體，通過與具有不同作用機制的其它藥物偶聯(lián)來獲取新型smdc的藥物分子可能是獲取治療tnbc?藥物的有效方式。

3、吲哚胺2,3-雙加氧酶（indoleamine?2,3-dioxygenase,?ido）是肝臟以外唯一可催化色氨酸代謝，使其沿犬尿氨酸途徑分解生成包括喹啉酸在內(nèi)的一系列代謝產(chǎn)物的限速酶。研究表明ido可通過消耗色氨酸產(chǎn)生犬尿氨酸增加組織中il-6的表達(dá)，進(jìn)而增加vegf的表達(dá)，促使腫瘤血管的生成。此外，腫瘤細(xì)胞中持續(xù)高表達(dá)的ido?會促使腫瘤微環(huán)境中的色氨酸的持續(xù)消耗，并將其轉(zhuǎn)化為犬尿氨酸，這種代謝調(diào)節(jié)能夠抑制對色氨酸敏感的t細(xì)胞的功能活性，包括影響t細(xì)胞的增殖和調(diào)節(jié)性t細(xì)胞的分化等。但針對現(xiàn)有ido抑制劑的臨床研究結(jié)果表明，單獨使用ido抑制劑難以取得令人滿意的臨床療效，并且選擇性ido抑制劑的抗腫瘤作用也可能會因繞過ido功能的替代機制而失效。因此，如何有效利用ido靶點，開發(fā)更行之有效的治療藥物也是目前針對ido靶點亟需要解決的問題。谷胱甘肽 s-轉(zhuǎn)移酶（glutathione?s-transferase,?gst）是一種多功能ⅱ相代謝酶，其可催化谷胱甘肽與親電性物質(zhì)發(fā)生結(jié)合，在保護生物體免遭毒物損害方面起重要作用。該類酶系具有雙重作用，即一方面提高機體解致癌物毒性的能力，防止腫瘤發(fā)生；另一方面也增加癌細(xì)胞對化療藥物的代謝能力，產(chǎn)生耐藥性。臨床統(tǒng)計數(shù)據(jù)顯示三陰性乳腺癌患者體內(nèi)的gst陽性表達(dá)率明顯高于非三陰性乳腺癌，并且gst的表達(dá)量與三陰性乳腺癌患者的腫瘤惡性程度和預(yù)后呈正相關(guān)。因此，抑制gst可能是治療三陰性乳腺癌和/或克服三陰性乳腺癌細(xì)胞耐藥的有效方式之一。

4、拉帕替尼是一種口服的egfr/her2雙靶點酪氨酸激酶抑制劑，臨床上主要用于聯(lián)合卡培他濱治療表皮生長因子受體過表達(dá)，既往接受過包括蒽環(huán)類、紫杉醇、曲妥珠單抗治療的晚期或轉(zhuǎn)移性乳腺癌。本申請通過分析拉帕替尼的構(gòu)效關(guān)系，發(fā)現(xiàn)拉帕替尼結(jié)構(gòu)中脂肪鏈上的仲胺基團主要插入溶劑區(qū)域內(nèi)，可以作為一個可修飾位點?；诖耍旧暾埻ㄟ^對拉帕替尼合理的改造，在其結(jié)構(gòu)引入ido抑制劑和gst抑制劑，得到一類新型egfr依賴型的smdc藥用分子，并研究它們在制備抗腫瘤藥物方面的應(yīng)用。但目前尚未見有可以同時抑制egfr和ido或gst的smdc藥用分子，并用于治療三陰性乳腺癌以及逆轉(zhuǎn)三陰性乳腺癌細(xì)胞耐藥的報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、針對現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問題，本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于提供egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2。本發(fā)明所要解決的另一技術(shù)問題在于提供egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2的制備方法。本發(fā)明還要解決的另一技術(shù)問題在于提供egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2的應(yīng)用，用于制備抗三陰性乳腺癌的藥物。

2、為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案如下：

3、egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2，其結(jié)構(gòu)式如下所示：

4、。

5、egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2的制備方法，具體為：將拉帕替尼與丁二酸酐反應(yīng)得到中間體化合物拉帕替尼-cooh；然后再將其與ido抑制劑nlg919發(fā)生酰胺縮合反應(yīng)，即得到偶聯(lián)物-2；其反應(yīng)過程如下所示：

6、。

7、egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2在制備用于逆轉(zhuǎn)拉帕替尼介導(dǎo)的癌細(xì)胞耐藥性的藥物中的應(yīng)用。

8、egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2在制備用于抑制癌細(xì)胞中egfr酶活性和/或促進(jìn)癌細(xì)胞中免疫t細(xì)胞分泌的藥物中的應(yīng)用。

9、相比于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的有益效果為：

10、1）本發(fā)明將ido抑制劑nlg919通過合理的結(jié)構(gòu)改造引入到拉帕替尼結(jié)構(gòu)中，得到目標(biāo)偶聯(lián)物-2。本發(fā)明結(jié)果表明，該化合物對三陰性乳腺癌mda-mb-231細(xì)胞中的pegfr(y1068)蛋白表達(dá)具有強效的抑制作用，并且該類化合物還能夠通過抑制mda-mb-231細(xì)胞中的犬尿氨酸促進(jìn)cd4+t細(xì)胞的分化。

11、2）本發(fā)明結(jié)果表明，偶聯(lián)物-2能夠有效逆轉(zhuǎn)拉帕替尼介導(dǎo)的mda-mb-231細(xì)胞耐藥，并且偶聯(lián)物-2對五種被測試的乳腺癌細(xì)胞的毒性均優(yōu)于拉帕替尼以及拉帕替尼與nlg919的物理混合物。

技術(shù)特征：

1.egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2，其結(jié)構(gòu)式如下所示：

2.權(quán)利要求1所述的egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2的制備方法，其特征在于：將拉帕替尼與丁二酸酐反應(yīng)得到中間體化合物拉帕替尼-cooh；然后再將其與ido抑制劑nlg919發(fā)生酰胺縮合反應(yīng)，即得到偶聯(lián)物-2；其反應(yīng)過程如下所示：

3.權(quán)利要求1所述的egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2在制備用于逆轉(zhuǎn)拉帕替尼介導(dǎo)的癌細(xì)胞耐藥性的藥物中的應(yīng)用。

4.權(quán)利要求1所述的egfr依賴型小分子偶聯(lián)物-2在制備用于抑制癌細(xì)胞中egfr酶活性和/或促進(jìn)癌細(xì)胞中免疫t細(xì)胞分泌的藥物中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了EGFR依賴型小分子偶聯(lián)物?2及其制備方法和應(yīng)用，屬于生物醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明公開的EGFR依賴型小分子偶聯(lián)物，為將拉帕替尼與丁二酸酐反應(yīng)得到中間體化合物拉帕替尼?COOH；然后再將其與IDO抑制劑NLG919發(fā)生酰胺縮合反應(yīng)，即得到偶聯(lián)物?2。結(jié)果表明，該化合物對三陰性乳腺癌MDA?MB?231細(xì)胞中的pEGFR(Y1068)蛋白表達(dá)具有強效的抑制作用，并且該類化合物還能夠通過抑制MDA?MB?231細(xì)胞中的犬尿氨酸促進(jìn)CD4+T細(xì)胞的分化；能夠有效逆轉(zhuǎn)拉帕替尼介導(dǎo)的MDA?MB?231細(xì)胞耐藥。

技術(shù)研發(fā)人員：王茹媛,劉飛,陳雨,馮煦,別雪松
受保護的技術(shù)使用者：江蘇省中國科學(xué)院植物研究所
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2024/12/30