本發(fā)明涉及基因工程，特別是涉及橡膠樹erf類轉(zhuǎn)錄因子hberf105基因及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、橡膠樹是典型的熱帶經(jīng)濟作物，原產(chǎn)于巴西亞馬遜河流域，世界上公認的適宜種植區(qū)為南緯10°至北緯15°，而部分橡膠樹種植區(qū)位于北緯18°至24°，被列為非傳統(tǒng)植膠區(qū)，屬于世界植膠區(qū)的最北端，經(jīng)常遭遇10℃以下的低溫寒害。當環(huán)境溫度低于橡膠樹的臨界寒害溫度(15℃)時，就會對樹體造成寒害，氣溫越低寒害越嚴重。一般情況下，氣溫≤10℃，對橡膠樹幼樹的新陳代謝產(chǎn)生有害影響，光合作用停止；當氣溫≤5℃時，橡膠樹出現(xiàn)不同程度的寒害，割面和樹莖接合處就會有少量爆皮流膠，樹梢和樹干枯死，導(dǎo)致橡膠產(chǎn)量下降。

2、低溫脅迫已成為制約天然橡膠產(chǎn)業(yè)發(fā)展的主要瓶頸。目前橡膠樹耐寒育種主要采用雜交育種，需要近30年才能培育一個新品種。橡膠樹育種周期長，效率低，已不能滿足天然橡膠產(chǎn)業(yè)對品種的需求。因此發(fā)掘耐寒相關(guān)的基因，解析其響應(yīng)低溫脅迫的分子機制，通過基因工程等分子育種技術(shù)改良橡膠樹品種耐寒性，增強品種的適應(yīng)性，加快橡膠樹品種的培育速度，已成為橡膠樹育種工作的重要內(nèi)容。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明的目的是提供橡膠樹erf類轉(zhuǎn)錄因子hberf105基因及其應(yīng)用，以解決上述現(xiàn)有技術(shù)存在的問題。本發(fā)明在橡膠樹中克隆了一種erf類轉(zhuǎn)錄因子hberf105基因，通過分子生物學(xué)實驗和基因工程手段證明，該基因積極響應(yīng)低溫脅迫，能有效提高轉(zhuǎn)基因植物的耐寒性，為橡膠樹耐寒分子育種提供了基因資源，有效解決橡膠樹耐寒品種缺乏和育種效率低的現(xiàn)狀。

2、為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供了如下方案：

3、本發(fā)明提供橡膠樹erf類轉(zhuǎn)錄因子hberf105基因，所述hberf105基因的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

4、優(yōu)選的，所述hberf105基因編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列如seq?id?no.4所示。

5、本發(fā)明還提供一種重組載體，所述重組載體上包含上述hberf105基因。

6、本發(fā)明還提供一種重組菌，所述重組菌中包含上述hberf105基因或上述重組載體。

7、本發(fā)明還提供上述hberf105基因及其編碼的蛋白質(zhì)、上述重組載體或上述重組菌在調(diào)控植物耐寒性中的應(yīng)用。

8、本發(fā)明還提供一種調(diào)控植物耐寒性的方法，包括利用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，將上述hberf105基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，提高所述植物耐寒性的步驟。

9、本發(fā)明還提供上述hberf105基因及其編碼的蛋白質(zhì)、上述重組載體或上述重組菌在培育耐寒植物品種中的應(yīng)用。

10、本發(fā)明還提供一種培育耐寒植物品種的方法，包括利用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，將上述hberf105基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，構(gòu)建所述hberf105基因穩(wěn)定過表達的轉(zhuǎn)基因耐寒植物的步驟。

11、本發(fā)明還提供檢測上述hberf105基因表達量的試劑在耐寒性植物品種早期篩選中的應(yīng)用。

12、本發(fā)明還提供檢測上述hberf105基因的試劑在培育耐寒植物品種中的應(yīng)用。

13、本發(fā)明中，上述植物包括但不限于擬南芥和橡膠樹。

14、本發(fā)明公開了以下技術(shù)效果：

15、（1）本發(fā)明首次克隆了一種橡膠樹erf類轉(zhuǎn)錄因子基因hberf105，該基因dna序列無內(nèi)含子，開放閱讀框為825bp，編碼274個氨基酸，為后續(xù)該基因的研究和應(yīng)用奠定了理論基礎(chǔ)。

16、（2）本發(fā)明證實了橡膠樹hberf105基因與耐寒性相關(guān)，能夠積極響應(yīng)低溫脅迫，并公開了該基因在橡膠樹內(nèi)的表達模式及在低溫脅迫下的響應(yīng)方式，為橡膠樹耐寒品種篩選方法的建立提供了技術(shù)支持。

17、（3）本發(fā)明證實了在橡膠樹遺傳育種研究中，利用轉(zhuǎn)基因技術(shù)將hberf105基因在植物中過表達，能夠加快植物對環(huán)境的適應(yīng)速度，提高植物存活率，有效提高其耐寒性，對改良品種耐寒性，培育新品種，加快育種進程有積極作用。

技術(shù)特征：

1.橡膠樹erf類轉(zhuǎn)錄因子hberf105基因，其特征在于，所述hberf105基因的核苷酸序列如seq?id?no.3所示。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的hberf105基因，其特征在于，所述hberf105基因編碼的蛋白質(zhì)的氨基酸序列如seq?id?no.4所示。

3.一種重組載體，其特征在于，所述重組載體上包含權(quán)利要求1所述的hberf105基因。

4.一種重組菌，其特征在于，所述重組菌中包含權(quán)利要求1所述的hberf105基因或權(quán)利要求3所述的重組載體。

5.權(quán)利要求1所述的hberf105基因及其編碼的蛋白質(zhì)、權(quán)利要求3所述的重組載體或權(quán)利要求4所述的重組菌在調(diào)控植物耐寒性中的應(yīng)用。

6.一種調(diào)控植物耐寒性的方法，其特征在于，包括利用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，將權(quán)利要求1所述的hberf105基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，提高所述植物耐寒性的步驟。

7.權(quán)利要求1所述的hberf105基因及其編碼的蛋白質(zhì)、權(quán)利要求3所述的重組載體或權(quán)利要求4所述的重組菌在培育耐寒植物品種中的應(yīng)用。

8.一種培育耐寒植物品種的方法，其特征在于，包括利用遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù)，將權(quán)利要求1所述的hberf105基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，構(gòu)建所述hberf105基因穩(wěn)定過表達的轉(zhuǎn)基因耐寒植物的步驟。

9.檢測權(quán)利要求1所述的hberf105基因表達量的試劑在耐寒性植物品種早期篩選中的應(yīng)用。

10.檢測權(quán)利要求1所述的hberf105基因的試劑在培育耐寒植物品種中的應(yīng)用。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開了橡膠樹ERF類轉(zhuǎn)錄因子HbERF105基因及其應(yīng)用，屬于基因工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明在橡膠樹中克隆了一種ERF類轉(zhuǎn)錄因子HbERF105基因，其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.3所示，通過分子生物學(xué)實驗和基因工程手段證明，該基因積極響應(yīng)低溫脅迫，能有效提高轉(zhuǎn)基因植物的耐寒性，為橡膠樹耐寒分子育種提供了基因資源，有效解決橡膠樹耐寒品種缺乏和育種效率低的現(xiàn)狀。

技術(shù)研發(fā)人員：安澤偉,胡彥師,鄧治,吳文冠,王小波,袁淵,程漢,曾霞
受保護的技術(shù)使用者：中國熱帶農(nóng)業(yè)科學(xué)院三亞研究院
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6