本發(fā)明屬于微生物，尤其是涉及一種干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法。

背景技術：

1、益生菌是一類有益于人體健康的活性微生物食品原料，常用的益生菌有嗜酸乳桿菌和雙歧桿菌兩大類，與干酪乳桿菌一起被稱為“健康三益菌”。干酪乳桿菌具有良好的耐酸及膽汁抗性，可降低血漿膽固醇，增強宿主對微生物病原體的非特異性抵抗力，加快清除腸道內病原體，治療腸道菌群紊亂和增強腸道透性，從而防止食物過敏和急性腹瀉。此外，干酪乳桿菌還可使抗低密度氧化脂抗體和淋巴細胞增加，使粒細胞的噬菌作用明顯增強，對宿主進行免疫調節(jié)，防止腫瘤的產生。由于能夠在人體腸道內穩(wěn)定存活并具有眾多的醫(yī)療保健功能，干酪乳桿菌作為益生菌被廣泛應用于功能性食品，特別是乳制品的開發(fā)中，并逐漸為人們所關注。目前，干酪乳桿菌作為益生菌之一被用作牛奶、酸乳、豆奶、奶油和干酪等乳制品的發(fā)酵劑及輔助發(fā)酵劑，尤其在干酪中的應用較多。干酪乳桿菌的生長會受到培養(yǎng)基組成成分的影響，因此，獲得高密度、高活性的干酪乳桿菌以進行工業(yè)化應用的前提是需要找到適合該菌的增殖培養(yǎng)基。

技術實現思路

1、有鑒于此，本發(fā)明旨在提出一種干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，以解決上述問題。

2、為達到上述目的，本發(fā)明的技術方案是這樣實現的：

3、一種干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基，包括培養(yǎng)基a和培養(yǎng)基b，培養(yǎng)基a包括碳源10-30g/l、氮源15-25g/l、黑玉米汁1-2g/l、吐溫0.5-1.5g/l、蒼耳亭0.1-0.5μg/ml、抗壞血酸0.1-0.5?g/l，培養(yǎng)基b包括碳源10-30g/l、氮源20-40g/l、無機鹽1.5-7g/l、吐溫0.5-1.5g/l、蒼耳亭0.5-1μg/ml、萘乙酸鈉鹽5-10μg/ml、抗壞血酸0.1-0.5g/l。

4、進一步，培養(yǎng)基a中，碳源包括15-20g/l的葡萄糖和5-15g/l的果糖；氮源包括5-10g/l胰蛋白胨、10-15g/l牛肉浸膏和1-5g/l酵母浸粉。

5、進一步，培養(yǎng)基b中，碳源包括15-20g/l的葡萄糖和5-15g/l的果糖；氮源包括8-15g/l胰蛋白胨、15-25g/l牛肉浸膏和3-9g/l酵母浸粉；無機鹽包括1-5g/l檸檬酸氫二銨、0.05-0.15g/l硫酸鈣、0.2-0.8g/l乙酸鈉、0.5-1g/l硫酸鎂、0.03-0.8g/l硫酸錳、1-5g/l磷酸氫二鉀。

6、進一步，培養(yǎng)基a中，蒼耳亭與抗壞血酸的添加比例為1:1000。

7、進一步，培養(yǎng)基a和培養(yǎng)基b中添加的抗壞血酸的濃度保持一致。

8、本發(fā)明還提供了如上述所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)干酪乳桿菌的方法，包括如下步驟：

9、1）將活化后的干酪乳桿菌接入培養(yǎng)基a中，35-37℃培養(yǎng)10-18小時；

10、2）將步驟1）培養(yǎng)結束的菌懸液再接種至培養(yǎng)基b中，繼續(xù)35-37℃培養(yǎng)12-48小時。

11、進一步，步驟1）中接種量為4%-8%。

12、接種量是指移入種子液的體積和接種后培養(yǎng)液體積的比例。例如，種子液的接種量可以為4％(v/v)、4.5％(v/v)、5％(v/v)、5.5％(v/v)、6％(v/v)、6.5％(v/v)、7％(v/v)、7.5％(v/v)、8％(v/v)等。

13、進一步，步驟1）和步驟2）總共培養(yǎng)時間大于36小時。

14、相對于現有技術，本發(fā)明所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法具有以下優(yōu)勢：

15、本發(fā)明所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基包括2種培養(yǎng)基，且培養(yǎng)基中通過添加蒼耳亭、萘乙酸鈉鹽、抗壞血酸能夠提高干酪乳桿菌的生長增殖，提高菌體濃度，從而獲得高密度、高活性的干酪乳桿菌。

技術特征：

1.一種干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基，其特征在于：包括培養(yǎng)基a和培養(yǎng)基b，培養(yǎng)基a包括碳源10-30g/l、氮源15-25g/l、黑玉米汁1-2g/l、吐溫0.5-1.5g/l、蒼耳亭0.1-0.5μg/ml、抗壞血酸0.1-0.5?g/l，培養(yǎng)基b包括碳源10-30g/l、氮源20-40g/l、無機鹽1.5-7g/l、吐溫0.5-1.5g/l、蒼耳亭0.5-1μg/ml、萘乙酸鈉鹽5-10μg/ml、抗壞血酸0.1-0.5g/l。

2.根據權利要求1所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基，其特征在于：培養(yǎng)基a中，碳源包括15-20g/l葡萄糖和5-15g/l果糖；氮源包括5-10g/l胰蛋白胨、10-15g/l牛肉浸膏和1-5g/l酵母浸粉。

3.根據權利要求1所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基，其特征在于：培養(yǎng)基b中，碳源包括15-20g/l葡萄糖和5-15g/l果糖；氮源包括8-15g/l胰蛋白胨、15-25g/l牛肉浸膏和3-9g/l酵母浸粉；無機鹽包括1-5g/l檸檬酸氫二銨、0.05-0.15g/l硫酸鈣、0.2-0.8g/l乙酸鈉、0.5-1g/l硫酸鎂、0.03-0.8g/l硫酸錳、1-5g/l磷酸氫二鉀。

4.根據權利要求1所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基，其特征在于：培養(yǎng)基a中，蒼耳亭與抗壞血酸的添加比例為1:1000。

5.根據權利要求1所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基，其特征在于：培養(yǎng)基a和培養(yǎng)基b中添加的抗壞血酸的濃度保持一致。

6.如權利要求1-5任一項所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)干酪乳桿菌的方法，其特征在于：包括如下步驟：

7.根據權利要求6所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)干酪乳桿菌的方法，其特征在于：步驟1）中接種量為4%-8%。

8.根據權利要求6所述的干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)干酪乳桿菌的方法，其特征在于：步驟1）和步驟2）總共培養(yǎng)時間大于36小時。

技術總結
本發(fā)明提供了一種干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基及培養(yǎng)方法，包括培養(yǎng)基A和培養(yǎng)基B，培養(yǎng)基A包括碳源10?30g/L、氮源15?25g/L、黑玉米汁1?2g/L、吐溫0.5?1.5g/L、蒼耳亭0.1?0.5μg/mL、抗壞血酸0.1?0.5?g/L，培養(yǎng)基B包括碳源10?30g/L、氮源20?40g/L、無機鹽1.5?7g/L、吐溫0.5?1.5g/L、蒼耳亭0.5?1μg/mL、萘乙酸鈉鹽5?10μg/mL、抗壞血酸0.1?0.5g/L。該干酪乳桿菌增殖培養(yǎng)基通過添加蒼耳亭、萘乙酸鈉鹽、抗壞血酸能夠提高干酪乳桿菌的生長增殖，提高菌體濃度，從而獲得高密度、高活性的干酪乳桿菌。

技術研發(fā)人員：王堅,王娟,文靜瑤,舒剛強,肖響
受保護的技術使用者：天津喜仕萊乳業(yè)有限公司
技術研發(fā)日：
技術公布日：2025/1/2