本發(fā)明涉及生物，具體涉及一種四環(huán)素單克隆抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、四環(huán)素類抗生素是20世紀(jì)40年代發(fā)現(xiàn)的一類具有菲烷母核的廣譜抗生素，其分子式為c22h24n2o8。四環(huán)素族抗生素主要包括有金霉素、土霉素及四環(huán)素。四環(huán)素族抗生素有共同的化學(xué)結(jié)構(gòu)母體，均為酸堿兩性化合物。金霉素和土霉素都是四環(huán)素的衍生物，前者是氯四環(huán)素，后者是氧四環(huán)素。四環(huán)素本身及其鹽類都是黃色或淡黃色的晶體，在干燥狀態(tài)下極為穩(wěn)定，除金霉素外，其他的四環(huán)素族的水溶液都相當(dāng)穩(wěn)定。四環(huán)素族能溶于稀酸、稀堿等，略溶于水和低級(jí)醇，但不溶于醚及石油醚。對(duì)于大多數(shù)的革蘭氏陽(yáng)性與陰性菌，四環(huán)素均對(duì)其有抑制作用，高濃度的四環(huán)素有殺菌作用，尤其對(duì)革蘭氏陰性桿菌的作用較好。

2、四環(huán)素類抗生素被廣泛應(yīng)用于革蘭陽(yáng)性和陰性細(xì)菌、細(xì)胞內(nèi)支原體、衣原體和立克次氏體引起的感染。四環(huán)素的作用機(jī)制主要是阻止氨?；c核糖核蛋白體的結(jié)合，阻止肽鏈的增長(zhǎng)和蛋白質(zhì)的合成，從而抑制細(xì)菌的生長(zhǎng)。在世界范圍內(nèi)的大多數(shù)國(guó)家中，四環(huán)素作為一種廣譜抗生素，被大量用作飼料添加劑投喂給動(dòng)物從而進(jìn)入食物鏈中。長(zhǎng)期攝入含有四環(huán)素殘留物的食物會(huì)導(dǎo)致人體過(guò)敏反應(yīng)，胃腸道不適，甚至造成肝毒性。因此，建立一種安全、高效的四環(huán)素生物學(xué)檢測(cè)方法勢(shì)在必行。

3、免疫分析方法具有成本低、效率高、靈敏度高、對(duì)技術(shù)人員相對(duì)要求低等優(yōu)點(diǎn)，適用于大量樣品的快速檢測(cè)。本發(fā)明的目的在于提供一種對(duì)四環(huán)素具有極高親和力和檢測(cè)靈敏度的單克隆抗體，為建立膠體金試紙條檢測(cè)方法，形成膠體金試紙條產(chǎn)品的研發(fā)推廣奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為此，本發(fā)明提供一種四環(huán)素單克隆抗體的重鏈和輕鏈可變區(qū)及其應(yīng)用。

2、為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明實(shí)施例提供如下技術(shù)方案：

3、第一方面，本發(fā)明提供一種四環(huán)素單克隆抗體，其特征在于：所述單克隆抗體包括重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)；

4、所述單克隆抗體的重鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.1所示；

5、所述單克隆抗體的輕鏈可變區(qū)的氨基酸序列如seq?id?no.2所示；

6、所述重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)均由互補(bǔ)決定區(qū)和框架區(qū)組成，所述互補(bǔ)決定區(qū)均由cdr1、cdr2和cdr3組成；

7、所述單克隆抗體的重鏈可變區(qū)的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.5所示；

8、所述單克隆抗體的重鏈可變區(qū)的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.6所示；

9、所述單克隆抗體的重鏈可變區(qū)的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.7所示；

10、所述單克隆抗體的輕鏈可變區(qū)的cdr1的氨基酸序列如seq?id?no.8所示；

11、所述單克隆抗體的輕鏈可變區(qū)的cdr2的氨基酸序列如seq?id?no.9所示；

12、所述單克隆抗體的輕鏈可變區(qū)的cdr3的氨基酸序列如seq?id?no.10所示。

13、第二方面，上述所述的四環(huán)素單克隆抗體，其特征在于：

14、編碼所述單克隆抗體的重鏈可變區(qū)的核苷酸序列如seq?id?no.3所示；

15、編碼所述單克隆抗體的輕鏈可變區(qū)的核苷酸序列如seq?id?no.4所示。

16、第三方面，本發(fā)明提供一種四環(huán)素單克隆抗體在制備檢測(cè)四環(huán)素的試紙條中的應(yīng)用。

17、優(yōu)選地，所述試紙條為膠體金檢測(cè)試紙條，或熒光微球檢測(cè)試紙條，或乳膠微球檢測(cè)試紙條；

18、本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

19、本發(fā)明所述單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)，可作為酶聯(lián)免疫檢測(cè)和膠體金免疫檢測(cè)的原料。本發(fā)明的目的是提供一種四環(huán)素單克隆抗體重鏈和輕鏈可變區(qū)及其檢測(cè)應(yīng)用，為elisa、膠體金試紙條及熒光免疫試紙條的研發(fā)推廣奠定基礎(chǔ)。

技術(shù)特征：

1.一種四環(huán)素單克隆抗體，其特征在于：所述單克隆抗體包括重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)；

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素單克隆抗體，其特征在于：

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的四環(huán)素單克隆抗體在制備四環(huán)素檢測(cè)制品中的應(yīng)用。

4.一種四環(huán)素檢測(cè)試紙條，其特征在于：所述試紙條為膠體金檢測(cè)試紙條，其結(jié)合墊上包被權(quán)利要求1或2所述的四環(huán)素單克隆抗體。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明公開(kāi)了一種四環(huán)素單克隆抗體及其應(yīng)用，屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。所述單克隆抗體含有重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)，所述重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)均由互補(bǔ)決定區(qū)和框架區(qū)組成，所述互補(bǔ)決定區(qū)均由CDR1、CDR2和CDR3組成。所述單克隆抗體可用于制備四環(huán)素檢測(cè)制品。本發(fā)明所提供的四環(huán)素膠體金檢測(cè)試紙條，具有靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性強(qiáng)的特點(diǎn)。

技術(shù)研發(fā)人員：趙榮茂,鞏玉潔,楊哲,褚夢(mèng)蕊,杜錦然
受保護(hù)的技術(shù)使用者：北京納百生物科技有限公司
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9