專利名稱:金龜子綠僵菌殺螨制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類防治植食性害螨的絲孢類真菌殺螨制劑。
背景技術(shù)：
葉螨泛指葉螨科的種類，屬植食性螨類，一般為多食性作物和經(jīng)濟(jì)植物害螨，種類 多，分布廣。在我國(guó)棉區(qū)危害的葉螨種類主要有朱砂葉螨、截形葉螨、二斑葉螨、敦煌葉螨和 土耳其斯坦葉螨等5種。在廣大柑桔園區(qū)危害最嚴(yán)重的植食性葉螨是柑桔全爪螨，近年來(lái) 已明顯上升成為柑桔主要害蟲(chóng)。除柑桔之外，還危害梨、桃、柿、棗、茶、桑、桂花、垂柳、月季 和冬青等植物。葉螨通常以成螨、若螨和幼螨在植物葉背吸取汁液，使葉面水分蒸騰增強(qiáng)， 葉綠素變色，光合作用受到抑制，從而使葉面變紅、干枯、脫落、甚至整個(gè)植株枯死，降低產(chǎn) 量和影響品質(zhì)。例如頗具代表性的朱砂葉螨(又名紅葉螨、棉紅蜘蛛等)，能危害全球100 多種大田作物和經(jīng)濟(jì)植物，造成巨大經(jīng)濟(jì)損失。
葉螨對(duì)農(nóng)作物的明顯危害始見(jiàn)于20世紀(jì)60年代以后，一般認(rèn)為是化學(xué)殺蟲(chóng)劑大 量使用而導(dǎo)致的再增猖獗。自此以來(lái)，化學(xué)防治是大面積螨害控制的主要手段，有機(jī)氯(如 三氯殺螨醇)和有機(jī)錫(如螨完錫)制劑是常用的高效殺螨劑，但因其高毒高殘留而在許 多作物(尤其瓜果、蔬菜、茶葉)上被禁用。由于螨類特殊的生態(tài)對(duì)策和環(huán)境適應(yīng)性，螨類 的抗藥性問(wèn)題越來(lái)越突出。葉螨對(duì)有機(jī)氯殺螨劑的抗藥性可在6 16代內(nèi)增強(qiáng)數(shù)十至上 百倍；對(duì)有機(jī)磷、有機(jī)氮類化學(xué)殺蟲(chóng)劑很不敏感或抗藥性極強(qiáng)，菊酯類殺蟲(chóng)劑甚至對(duì)其種群 繁衍具有助增作用。目前被廣泛用于常見(jiàn)害蟲(chóng)防治的低毒低殘留殺蟲(chóng)劑吡蟲(chóng)啉也被發(fā)現(xiàn)具 有刺激葉螨產(chǎn)卵的作用。由此可見(jiàn)，葉螨的危害和抗藥性問(wèn)題十分突出。如何有效控制植 食性葉螨的問(wèn)題已成為國(guó)內(nèi)外共同關(guān)注的焦點(diǎn)。
綠僵菌、白僵菌、擬青霉等絲孢類生防真菌是一類能侵染昆蟲(chóng)和螨類的蟲(chóng)生真菌， 為半知菌亞門絲孢綱真菌。該類生防真菌對(duì)土壤環(huán)境具有良好的適應(yīng)性，寄主范圍廣泛， 生產(chǎn)工藝和劑型化技術(shù)已趨成熟，因而真菌殺蟲(chóng)劑研發(fā)的較理想菌種。自1995年以來(lái)， 歐美國(guó)家先后登記注冊(cè)了球孢白僵菌Beauveria bassiana的系列制劑，如Mycotrol-ES、 Mycotrol-WP、Mycotrol_0、BotaniGuard-ES、BotaniGuard-WP、CornGuard-ES、ComGuard-G、 Naturalis (美國(guó))、Ago BiocontrolBassiana 50 (哥倫比亞)、0strinil (法國(guó))、Beauveria Schwerzer (瑞典)及Engerlingspliz (德國(guó))等產(chǎn)品，主要用于防治各種不允許化學(xué)農(nóng)藥 殘留存在的高附加值有機(jī)蔬菜瓜果等經(jīng)濟(jì)作物上的的蚜蟲(chóng)、粉虱等刺吸式口器害蟲(chóng)，還用 于防治地下害蟲(chóng)和蝗蟲(chóng)。玫煙色擬青霉也是國(guó)外90年代以來(lái)研究開(kāi)發(fā)的重點(diǎn)，問(wèn)世的商品 制劑包括 Biocon (荷蘭)、Pae-sin (墨西哥)、Ago Biocontrol Paecilomyces 50 (哥倫比 亞)、Bemisin (委內(nèi)瑞拉)以及美國(guó)和歐洲研制的制劑PFR-97和PreFeRal等，它們也主要 用于防治粉虱等刺吸式口器害蟲(chóng)。還有在南非注冊(cè)生產(chǎn)的綠僵菌制劑GreenMuscle，主要用 于大面積蝗蟲(chóng)防治。國(guó)外近年這些成就的取得，主要得益于不斷加大的研發(fā)投入與接種體 生產(chǎn)、劑型加工及應(yīng)用配套技術(shù)的不斷進(jìn)步。
在害螨微生物防治研究中，直接侵染螨類的少數(shù)病原菌長(zhǎng)期受到優(yōu)先關(guān)注，如湯 普森被毛孢和佛州新接霉。遺憾的是這些螨類專性病原真菌很難開(kāi)發(fā)成為具有商品意義的
3制劑，只能在特定作物生態(tài)系統(tǒng)(如果園)考慮利用它們的自然流行而起到一定程度的控 制作用，很難作為正常干預(yù)手段使用。國(guó)外一些學(xué)者于是轉(zhuǎn)向幾種經(jīng)典的害蟲(chóng)生防真菌，希 望它們也能在害螨防治中發(fā)揮作用。但是，由于成螨個(gè)體很小，又非?；钴S，以高效殺螨菌 種菌株篩選為目的的生物測(cè)定技術(shù)難度很高，相關(guān)的研究報(bào)道卻寥寥無(wú)幾，目前仍處于初 級(jí)探索階段。篩選獲得高效殺螨菌株，并研制出成本低、應(yīng)用方便的高純度孢子粉生產(chǎn)工藝 和孢子制劑的配方和配制工藝，并成功應(yīng)用于田間害螨防治的案例則更為罕見(jiàn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明首先提供了兩種絲孢類真菌，它們分別為金龜子綠僵菌ZJUIM24-562菌 株(拉丁學(xué)名為Metarhizium anisopliae)，其保藏號(hào)為CGMCC No. 2375。球孢白僵菌 ZJUIM17-340 菌株(拉丁學(xué)名為 Beauveria bassiana)，其保藏號(hào)為 CGMCCNo. 2374 ；它們的 保藏時(shí)間均為2008年2月25日，保藏單位均為中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生 物中心。它們分別為可以高效殺滅多種農(nóng)作物上的植食性害螨的高效高毒力絲孢類真菌菌 株。
本發(fā)明的金龜子綠僵菌個(gè)體形態(tài)特征為菌落在SDAY平板上培養(yǎng)呈絨毛狀， 最初白色，產(chǎn)孢時(shí)橄欖綠色，后期為灰綠色至深綠色；菌絲具分隔和分枝，透明，直徑為 1. 5-2. 0 μ m。分生孢子梗很難與菌絲區(qū)別，直徑約2 μ m，其末端產(chǎn)生瓶形小梗，通常從瓶梗 的末端以向基式連續(xù)形成長(zhǎng)鏈的分生孢子。分生孢子單細(xì)胞，呈長(zhǎng)橢圓形至圓柱狀，兩端鈍 截形或鈍園，大小變化大，5 9X2 4. 5 μ m。單個(gè)存在時(shí)色亮，成堆時(shí)橄欖綠色。
本發(fā)明的球孢白僵菌個(gè)體形態(tài)特征為菌落在SDAY平板上培養(yǎng)菌落呈絨狀，背面 呈淺紫紅色；產(chǎn)孢細(xì)胞濃密簇生于菌絲、分生孢子?；蚺虼蟮呐菽?，球形至瓶形，頸部明顯 延長(zhǎng)成粗1 μ m、長(zhǎng)達(dá)20 μ m左右的產(chǎn)孢軸，軸上具小齒突，呈膝狀彎曲；分生孢子球形或近 球形，光滑透明，大小為2 3X2 2. 5μπι。
本發(fā)明另一個(gè)所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服現(xiàn)有技術(shù)的上述缺陷，針對(duì)目前農(nóng)業(yè)生 產(chǎn)中為害性較大、抗藥性突出、一般藥劑防治效果差的植食性害螨，提供具有高效的葉螨控 制效果、能顯著減少化學(xué)殺螨劑的實(shí)用而且具有環(huán)境友好特點(diǎn)的絲孢類真菌殺螨制劑。為 此，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案它為以絲孢類真菌孢子粉為活性成分的油懸劑，其連續(xù)相為 礦物油或植物油。
所述的絲孢類真菌孢子粉可以是由金龜子綠僵菌CGMCC 2375或球孢白僵菌 CGMCC 2374采用兩相發(fā)酵工藝制成的高純度孢子粉，孢子粉含孢量大于1000億個(gè)/克粉， 活孢率大于90%，含水量小于8%;在礦物油中可再加入抗壞血酸(紫外保護(hù)劑)和羧甲基 纖維素納(穩(wěn)定劑)，攪拌混合均勻制成真菌孢子油懸劑，所述高純度孢子粉與礦物油的投 料比為100 150克/升，所述抗壞血酸和羧甲基纖維素納與礦物油的投料比分別為1 5克/升和5 10克/升。
所述油懸劑中所用的載體油為工業(yè)石蠟油或工業(yè)石蠟油的復(fù)合配方。
本發(fā)明再一個(gè)所要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種用上述絲孢類真菌殺螨制劑制成 的真菌孢子懸乳劑，它將上述的絲孢類真菌殺螨制劑與具備生物相容性的乳化劑按照5 10 100的體積比混合而成。
所述的生物學(xué)相容性良好的乳化劑可以采用非離子性乳化劑，比如脂肪醇聚氧乙
4烯醚和羥基聚環(huán)氧乙烷嵌段共聚物復(fù)合物。但由于長(zhǎng)期混貯對(duì)真菌分生孢子具有一定的影 響，故作臨用時(shí)混合配制處理。
經(jīng)過(guò)對(duì)所述絲孢類真菌殺螨菌株對(duì)以朱砂葉螨為代表的植食性葉螨的室內(nèi)殺螨 活性進(jìn)行測(cè)定，金龜子綠僵菌ZJUIM24-562和球孢白僵菌ZJUIM17-340對(duì)朱砂葉螨具有 很強(qiáng)的侵染殺蟲(chóng)活性。采用Potter噴塔法按從低至高的順序接種朱砂葉螨卵和雌成螨兩 個(gè)生長(zhǎng)階段，在25V 12L: 12D的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察7 9天，統(tǒng)計(jì)分析獲得所述金龜子綠 僵菌ZJUIM24-562菌株對(duì)朱砂葉螨卵和成螨的半致死劑量(LC5tl)分別為179(99-325)和 135(75-224)個(gè)孢子/mm2 ；所述球孢白僵菌ZJUIM17-340菌株對(duì)朱砂葉螨卵和成螨的半致 死劑量(LC50)分別為 191(80-450)和 42(22-82)個(gè)孢子/mm2。
所述絲孢類真菌殺螨菌株在田間對(duì)于柑桔紅蜘蛛和棉花紅蜘蛛等植食性葉螨同 樣具有優(yōu)異的控螨效果。先將所述絲孢類真菌殺螨菌株的分生孢子粉按上述方法配制成 孢子懸乳劑進(jìn)行機(jī)動(dòng)彌霧，機(jī)具為1. 6馬力WFB-18AC型背負(fù)式機(jī)動(dòng)彌霧器，按5000轉(zhuǎn)/ min的額定功率，孢子懸乳劑濃度標(biāo)準(zhǔn)化為1 X IO10個(gè)孢子/mL，使用時(shí)用水稀釋100倍， 按150L/ha的用液量機(jī)動(dòng)定功率運(yùn)行，隔15天噴霧1次，共噴霧2次。35天內(nèi)金龜子綠僵 菌ZJUIM24-562菌株處理后的棉花紅蜘蛛平均蟲(chóng)口減退率和相對(duì)防效分別達(dá)到80. 7%和 85. 8%；球孢白僵菌ZJUIM17-340菌株所致的棉花紅蜘蛛平均蟲(chóng)口減退率和相對(duì)防效分別 達(dá)到69. 8%和77. 9%。同樣的試驗(yàn)方法下，近45天的試驗(yàn)觀察期內(nèi)，所述兩種殺螨菌株對(duì) 柑桔紅蜘蛛的相對(duì)防效均達(dá)到85%以上。
試驗(yàn)表明，本發(fā)明的絲孢類真菌殺螨制劑，對(duì)植食性葉螨具有較好的控制效果，能 大量減少化學(xué)殺螨劑的使用，提高農(nóng)產(chǎn)品的安全性。
具體實(shí)施方式
實(shí)施例1、絲孢類生防真菌的保存與培養(yǎng)
金龜子綠僵菌ZJUIM24-562和球孢白僵菌ZJUIM17-340等絲孢類生防真菌以干燥 分生孢子粉和滅菌白沙混合的形式保存于_72°C超低溫冰箱中。保藏菌種均在薩氏培養(yǎng)基 SDAY平板上于25°C下活化7天左右，用于孢子粉的生產(chǎn)。其中薩氏培養(yǎng)基SDAY配方(W/W) 為葡萄糖4%、蛋白胨1%、酵母和瓊脂2%。
實(shí)施例2、高純度分生孢子粉的生產(chǎn)
絲孢類生防真菌的高純度分生孢子粉的生產(chǎn)采用一種立式多層產(chǎn)孢箱(專利公 開(kāi)號(hào)CN 1710059A)，以低值陳米作為主要原料的液-固兩相發(fā)酵方法(專利公開(kāi)號(hào)CN 1415736)生產(chǎn)，具體按照以下步驟進(jìn)行
1)將所述絲孢類高效殺螨菌株，使用薩氏培養(yǎng)液或麥麩浸提液進(jìn)行液相發(fā)酵，獲 得菌絲液。
2)選用低值稻米洗凈浙干后經(jīng)蒸汽滅菌并熟化至5 6成熟，冷卻后作為固相發(fā)
酵基質(zhì)。
3)在上述固相發(fā)酵基質(zhì)中按8 12升/100公斤米的比率混入上述液相發(fā)酵所得 的菌絲液，機(jī)器攪拌均勻即成接種物料。
4)將接種物料放入產(chǎn)孢箱進(jìn)行封閉式發(fā)酵產(chǎn)孢，產(chǎn)孢箱內(nèi)的溫度控制在 25士2°C，依靠加濕器保持產(chǎn)孢箱內(nèi)相對(duì)濕度> 95%，接種物料在產(chǎn)孢箱內(nèi)發(fā)酵反映72
596小時(shí)。
5)關(guān)閉加濕器，是產(chǎn)孢箱保持密封狀態(tài)控制產(chǎn)孢箱內(nèi)溫度為25士2°C，繼續(xù)發(fā)酵 反應(yīng)72 120小時(shí)，得發(fā)酵物料；
6)表面長(zhǎng)滿所述殺螨菌株孢子粉的發(fā)酵物料在不超過(guò)35°C下通風(fēng)干燥至含水量 40 %以下，用MK-V型收孢機(jī)收獲孢子粉。所獲孢子粉含孢量達(dá)1000億/克，活孢率大于 90 %。再經(jīng)常溫真空抽干后，孢子粉的含水量小于8 %。
實(shí)施例3、絲孢類生防真菌的殺螨活性測(cè)定
將實(shí)施例2中獲得的高純度孢子粉用0. 02% Tween 80溶液稀釋成高、中、低三個(gè) 孢子劑量孢子懸浮液，以僅含0. 02% Tween 80的水溶液為空白對(duì)照。試驗(yàn)采用Potter噴塔 法按從低至高的順序，在0. 7kg/cm2的壓力下將2ml的孢子水懸液噴霧到直徑Ilcm的載物 臺(tái)的載滿葉螨雌成螨或者螨卵的葉片上。各濃度下的實(shí)際接種劑量用平放于葉片旁的蓋玻 片(20CmX20Cm)收集孢子，棉蘭染色后在顯微鏡下5點(diǎn)取樣鏡檢(0. 2165mm2/視野)孢子 數(shù)，從而將降沉降到螨體及其葉片上的孢子附著量標(biāo)準(zhǔn)化為孢子數(shù)/mm2。接種后將雌成螨 或螨卵置于25°C 12L: 12D的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)觀察7 9天，所獲數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)算獲得 供試生防真菌對(duì)朱砂葉螨雌成螨和螨卵的殺滅活性。其中，所述金龜子綠僵菌ZJUIM24-562 菌株對(duì)朱砂葉螨卵和成螨的半致死劑量(LC5tl)分別為179(99-325)和135(75-224)個(gè)孢子 /mm2;所述球孢白僵菌ZJUIM17-340菌株對(duì)朱砂葉螨卵和成螨的半致死劑量(LC5tl)分別為 191 (80-450)和 42(22-82)個(gè)孢子 /mm2。
實(shí)施例4、絲孢類真菌殺螨菌株孢子油懸劑的制備
采用市售的工業(yè)石蠟油或工業(yè)石蠟油復(fù)合物作為惰性液相介質(zhì)，加入實(shí)施例2中 所制得的高效殺螨絲孢類真菌菌株高純度分生孢子粉、作為穩(wěn)定劑的羧甲基纖維素納和作 為紫外保護(hù)劑的抗壞血酸。其中高純度孢子粉與礦物油的投料比為100 150克/升，羧 甲基纖維素納與礦物油的投料比為1 5克/升，抗壞血酸與礦物油的投料比也為1 5 克/升，攪拌混合均勻后即制成絲孢類真菌殺螨菌株的孢子油懸劑。所用的工業(yè)石蠟油經(jīng) 長(zhǎng)期貯存試驗(yàn)測(cè)定有利于菌劑的貯存，并且生物學(xué)相容性良好。
配制的金龜子綠僵菌ZJUIM24-562和球孢白僵菌ZJUIM17-340孢子油懸劑的有效 孢子含量不低于100億個(gè)/毫升，含水量不超過(guò)2%?；旌暇鶆虻慕瘕斪泳G僵菌孢子油懸劑 為墨綠色或近黑色液體，而球孢白僵菌孢子油懸劑為淡黃色或土黃色。
實(shí)施例5、絲孢類真菌殺螨菌株孢子懸乳劑的配制
將實(shí)施例4所制得的孢子油懸劑與生物學(xué)相容性良好脂肪醇聚氧乙烯醚和羥基 聚環(huán)氧乙烷嵌段共聚物復(fù)合物，按照5 10 100的體積比混合，攪拌均勻即制成金龜子 綠僵菌和球孢白僵菌孢子懸乳劑。
真菌殺螨孢子懸乳劑可以用水稀釋進(jìn)行常規(guī)容量(500 1000倍稀釋液)或低容 量(100 150倍稀釋液)噴霧。
實(shí)施例6、絲孢類真菌殺螨菌株孢子懸乳劑在田間的應(yīng)用及殺螨效果
1)新疆棉花紅蜘蛛防治試驗(yàn)
于2006年7月至8月在新疆阿拉爾市塔克拉瑪干沙漠北緣中段棉區(qū)選擇螨害較 重的兩塊棉田進(jìn)行了棉花紅蜘蛛的田間藥效試驗(yàn)。試驗(yàn)將實(shí)施例5所制得的孢子懸乳劑用 水稀釋100 150倍進(jìn)行低容量的機(jī)動(dòng)噴霧。稀釋液中的用菌量是使其內(nèi)含的孢子油懸
6劑用量達(dá)到1. 5 2. 3公升/公頃。
試驗(yàn)間隔10 15天連續(xù)用菌2次，都能有效地控制棉紅蜘蛛對(duì)棉花的為害。用 菌后5 10天的所述兩株絲孢類殺螨菌株對(duì)棉紅蜘蛛的相對(duì)防效都達(dá)到了 70 %以上，第二 次用菌后則穩(wěn)定在75% 95%之間。
2)浙江柑桔紅蜘蛛防治試驗(yàn)
于2007年10月至11月在衢州市和臺(tái)州市兩個(gè)浙江柑桔主產(chǎn)區(qū)選取具有代表性 的桔園進(jìn)行了為期45天的柑桔紅蜘蛛田間藥效試驗(yàn)。試驗(yàn)同樣將實(shí)施例5所制得的孢子 懸乳劑用水稀釋100 150倍進(jìn)行低容量的機(jī)動(dòng)噴霧。
試驗(yàn)也間隔10 15天連續(xù)用菌2次，結(jié)果發(fā)現(xiàn)所述絲孢類真菌殺螨制劑對(duì)柑桔 紅蜘蛛的田間控制效果顯著，有效地控制柑桔紅蜘蛛對(duì)柑桔的危害。在衢州和臺(tái)州兩地用 菌后第5天的相對(duì)防效為64. 5% 72. 7%和58. 9% 72. 2%，而到第2次用菌后近30天 內(nèi)兩地的相對(duì)防效分別達(dá)到了 85%和90%以上，顯著高于化學(xué)農(nóng)藥噠螨靈的防治效果。而 且菌劑的持效期很長(zhǎng)，截止至次年的3月份仍沒(méi)有明顯地種群密度反彈的跡象，表明所述 絲孢類真菌殺螨制劑的跨季節(jié)效應(yīng)顯著。
7
權(quán)利要求
金龜子綠僵菌ZJUIM24 562菌株(Metarhizium anisopliae)，其保藏號(hào)為CGMCC No.2375。
2.絲孢類真菌殺螨制劑，其特征在于它為以絲孢類真菌孢子粉為活性成分的油懸 劑，其連續(xù)相為礦物油或植物油，所述絲孢類真菌為權(quán)利要求
1所述的金龜子綠僵菌 ZJUIM24-562 菌株。
3.如權(quán)利要求
2所述的絲孢類真菌殺螨制劑，其特征在于孢子粉與連續(xù)相的投料比為 100 150克/升。
4.如權(quán)利要求
2所述的絲孢類真菌殺螨制劑，其特征在于所述油懸劑中加入有抗壞血 酸作為紫外保護(hù)劑，抗壞血酸與連續(xù)相的投料比分別為1 5克/升。
5.如權(quán)利要求
2所述的絲孢類真菌殺螨制劑，其特征在于所述油懸劑中加入有羧甲基 纖維素納作為穩(wěn)定劑，羧甲基纖維素納與連續(xù)相的投料比分別為5 10克/升。
6.一種用權(quán)利要求
2所述絲孢類真菌殺螨制劑制成的真菌孢子懸乳劑，其特征在于它 將權(quán)利要求
2所述的絲孢類真菌殺螨制劑與具備生物相容性的乳化劑按照5 10 100 的體積比混合而成。
7.如權(quán)利要求
6所述的真菌孢子懸乳劑，其特征在于所述具備生物相容性的乳化劑為 脂肪醇聚氧乙烯醚和羥基聚環(huán)氧乙烷嵌段共聚物復(fù)合物。
專利摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種能有效控制植食性害螨、減少化學(xué)農(nóng)藥使用、提高農(nóng)產(chǎn)品安全性的高效絲孢類真菌殺螨制劑。本發(fā)明的金龜子綠僵菌ZJUIM24-562菌株(Metarhizium anisopliae)和球孢白僵菌ZJUIM17-340菌株(Beauveria bassiana)于2008.2.25保藏，保藏編號(hào)分別為CGMCC No.2375和CGMCC No.2374。所述的制劑由絲孢類真菌分生孢子、礦物油、乳化劑、紫外保護(hù)劑和穩(wěn)定劑成分組成。室內(nèi)外試驗(yàn)結(jié)果表明，本發(fā)明的絲孢類真菌殺螨制劑對(duì)各類植食性害螨均具有十分理想的殺滅活性和田間防治效果。因此，本發(fā)明將填補(bǔ)國(guó)內(nèi)真菌殺螨劑研究知識(shí)和技術(shù)上的空白。
文檔編號(hào)A01P7/02GKCN101338279 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請(qǐng)?zhí)朇N 200810061575
公開(kāi)日2011年3月16日 申請(qǐng)日期2008年5月7日
發(fā)明者馮明光, 施衛(wèi)兵 申請(qǐng)人:浙江大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (2), 非專利引用 (2),