專利名稱:具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物的制備方法及用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及植物蛋白開發(fā)利用領(lǐng)域，特指一種具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物及其高效制備方法。
技術(shù)背景
玉米黃粉是淀粉工業(yè)的下腳料，蛋白質(zhì)含量高達(dá)60%以上。由于水溶性差，組成復(fù)雜，口感粗糙，主要用于生產(chǎn)飼料或自然排放，造成極大的浪費(fèi)和環(huán)境污染。玉米黃粉蛋白中含有高比例的LeU、Val、Ala等疏水性氨基酸和Pro、Glu等，很少含有Lys等堿性氨基酸。這種特殊氨基酸組成使玉米蛋白中含有大量活性肽片段，可以水解生成活性肽。
目前國內(nèi)利用玉米黃粉生產(chǎn)活性肽已有報道。如中國發(fā)明專利“玉米蛋白高F 值低聚肽的生產(chǎn)方法” O00510017037. 6)利用玉米蛋白粉為原料生產(chǎn)高F值低聚肽，可用于肝病的輔助治療；“玉米蛋白粉降血壓多肽與分離方法及其應(yīng)用” O00510104787. 7)、 “玉米蛋白粉多肽與分離方法及其應(yīng)用” O00510136699. 5)、“一種降血壓多肽與分離方法及其應(yīng)用” O00510136700. 4)、已公開的發(fā)明專利“一種降血壓活性肽產(chǎn)品的制備”(CN101130801)、都提到用玉米蛋白為原料生產(chǎn)具有降血壓活性的多肽片段或多肽混合物，但是這些多肽都是用傳統(tǒng)的酶解方法來生產(chǎn)的。玉米黃粉難溶于水，利用傳統(tǒng)酶解方法生產(chǎn)存在水解速率較慢、過程較長、酶利用率低和生產(chǎn)成本較高等缺點(diǎn)。已公開的發(fā)明專利 “一種提高玉米蛋白水解度和降解率的方法”(公開號CN1710091)提到利用加熱的辦法來提高玉米蛋白的水解度和降解率，但沒有提到產(chǎn)品可以用于輔助治療高血壓。
超聲波是頻率高于20kHz的彈性機(jī)械波，具有波動與能量的雙重屬性，在液體介質(zhì)中形成空化作用，產(chǎn)生強(qiáng)大的沖擊波和微射流，可以提高化學(xué)反應(yīng)速度，促進(jìn)大分子降解。已有有關(guān)超聲促進(jìn)糖類酶解的報道。如已公開的發(fā)明專利“一種利用超聲波輔助酶解制備麥麩膳食纖維的方法”(公開號CN101156684)利用超聲促進(jìn)淀粉酶解?！稗r(nóng)作物秸稈生物轉(zhuǎn)化制備琥珀酸工藝”(公開號CN101215584)利用超聲促進(jìn)纖維素酶解。
本發(fā)明正是利用超聲波對酶解的促進(jìn)作用，來進(jìn)行玉米蛋白水解物的生產(chǎn)方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物及其高效制備方法。
本發(fā)明的上述目的是通過以下手段來實(shí)現(xiàn)的原料利用超臨界(X)2脫除油脂，萃取壓力30MPa，萃取溫度35°C，分離壓力5MPa，分離溫度40°C，萃取時間池。脫脂后的原料粉碎，直至全部通過40目篩。粉碎后的原料加5 20倍重量的水調(diào)配后進(jìn)行超聲波處理，超聲波頻率為20、22、25、28、33、40kHz中的一種或幾種結(jié)合使用，超聲功率500 2000W，整個超聲過程中超聲波以脈沖而非連續(xù)的形式發(fā)出，即超聲工作一段時間若干秒再停止若干秒，以次往復(fù)，直至超聲過程結(jié)束。超聲工作/間歇時間1S:1S 10S:10S，料液初始溫度 20 45°C，超聲時間20 80min。超聲波處理的過程中持續(xù)對料液進(jìn)行攪拌，以保證超聲波處理均勻。超聲波處理結(jié)束后加入中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一種或數(shù)種相結(jié)合使用，加酶量為原料質(zhì)量的0. 1 0. 5% (蛋白酶活力符合QB/T 1805. 3—93中合格品的規(guī)定)，中性蛋白酶酶解溫度55°C，pH6. 0，堿性蛋白酶酶解溫度60°C，pH8. 5，木瓜蛋白酶酶解溫度60°C，pH6. 5，，酶解過程中維持溫度和pH不變(持續(xù)加入Ca(OH)2溶液以中和水解過程中產(chǎn)生的氨基酸的酸性)，酶解結(jié)束后煮沸IOmin滅酶，若為多種酶聯(lián)合使用則再調(diào)到另外一種酶的最適條件并加入該酶進(jìn)行酶解，以此類推。酶解結(jié)束后煮沸IOmin滅酶。酶解液6000r/min離心25min，上清液300目過濾后得酶解液，酶解液噴霧干燥或冷凍干燥得到產(chǎn)品。
本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn)是利用聚能式超聲波處理玉米黃粉混懸液并進(jìn)行酶解，與相同酶解條件下常規(guī)酶解相比，超聲處理后酶解產(chǎn)物對的ACE抑制率提高30 80%，產(chǎn)品得率提高20 80%。。在酶解過程中使用Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH，避免引入可能升高人體血壓的Na離子，簡化了生產(chǎn)工藝，降低了成本。


圖1本發(fā)明生產(chǎn)具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物的工藝路線圖。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但本發(fā)明不限于下述實(shí)施例，對于本領(lǐng)域一般技術(shù)人員而言，在不背離本發(fā)明原理的前提下對它所做的任何顯而易見的改動，都屬于本發(fā)明的構(gòu)思和所附權(quán)利要求
的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1
原料利用超臨界(X)2脫除油脂，萃取壓力30MPa，萃取溫度35°C，分離壓力5MPa，分離溫度40°C，萃取時間3h。脫脂后的原料粉碎，直至全部通過40目篩。稱取上述原料50kg， 加250kg的水調(diào)配后進(jìn)行超聲波處理，分別在萃取罐圓周上等位放入超聲波頻率為20kHz 的聚能式超聲頭4只，超聲功率500W，超聲工作/間歇時間1S/1S，料液初始溫度20°C，超聲時間80min。超聲波處理的過程中持續(xù)對料液進(jìn)行攪拌，以保證超聲波處理均勻。超聲波處理結(jié)束后加入中性蛋白酶0. 25kg(蛋白酶活力符合QB/T 1805. 3—93中合格品的規(guī)定)， 溫度55 °C，pH6. 0，酶解過程中維持溫度和pH不變(持續(xù)加入Ca (OH) 2溶液以中和水解過程中產(chǎn)生的氨基酸的酸性)，酶解200min后煮沸滅酶lOmin，酶解液6000r/min離心25min，上清液300目過濾后得酶解液，酶解液噴霧干燥得到產(chǎn)品。
測定產(chǎn)品的得率(產(chǎn)品與原料的重量比率)和對ACE抑制率，具體測定方法如下先將5 μ L的ACE加入10 μ L樣品(0. 35mg/ml產(chǎn)品溶液)在37°C下恒溫5min，然后加入 50μ L 的 6. 5mmol/LHip-His-Leu(用 100mmol/L 的硼酸鹽緩沖液配制，含 300mmol/L 的 NaCl，pH為8.3)，在37°C下恒溫反應(yīng)30min后加入85yL的lmol/L HCl溶液終止反應(yīng)。用 HPLC進(jìn)行分析，記錄對應(yīng)組分峰面積，同時用10 μ LlOOmmol/L、pH為8. 3的硼酸鹽緩沖液作空白試驗(yàn)。
水解肽對ACE的抑制率可用下式計算
權(quán)利要求
1.具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物制備方法，該方法包括下述順序的步驟 原料利用超臨界CO2脫除油脂，萃取壓力30MPa，萃取溫度35°C，分離壓力5MPa，分離溫度 40°C，萃取時間池；脫脂后的原料粉碎，直至全部通過40目篩；粉碎后的原料加5 20倍重量的水調(diào)配后進(jìn)行超聲波處理，超聲波頻率為20、22、25J8、33、40kHz中的一種或幾種結(jié)合使用，超聲功率500 2000W，整個超聲過程中超聲波以脈沖而非連續(xù)的形式發(fā)出，即超聲工作一段時間若干秒再停止若干秒，以次往復(fù)，直至超聲過程結(jié)束；超聲工作/間歇時間IS IS 10S: 10S，料液初始溫度20 45°C，超聲時間20 80min ；超聲波處理的過程中持續(xù)對料液進(jìn)行攪拌，以保證超聲波處理均勻；超聲波處理結(jié)束后加入中性蛋白酶、堿性蛋白酶、木瓜蛋白酶中的一種或數(shù)種相結(jié)合使用，加酶量為原料質(zhì)量的0. 1 0. 5%，中性蛋白酶酶解溫度^°C，pH6. 0，堿性蛋白酶酶解溫度60°C，pH8. 5，木瓜蛋白酶酶解溫度60°C， pH6. 5，酶解過程中維持溫度和pH不變，持續(xù)加入Ca (OH) 2溶液以中和水解過程中產(chǎn)生的氨基酸的酸性，酶解結(jié)束后煮沸IOmin滅酶，若為多種酶聯(lián)合使用則再調(diào)到另外一種酶的最適條件并加入該酶進(jìn)行酶解，以此類推；酶解結(jié)束后煮沸IOmin滅酶；酶解液eOOOr/min離心25min，上清液300目過濾后得酶解液，酶解液噴霧干燥或冷凍干燥得到產(chǎn)品。
專利摘要
具有降血壓功能的玉米黃粉蛋白水解物制備方法，該方法包括下述順序的步驟(1)玉米黃粉脫脂；(2)過篩；(3)加水調(diào)配；(4)超聲波處理；(5)酶解；(6)離心；(7)過濾；(8)干燥。本發(fā)明所具有的優(yōu)點(diǎn)是利用聚能式超聲波處理玉米黃粉混懸液并進(jìn)行酶解，與相同酶解條件下常規(guī)酶解相比，超聲處理后酶解產(chǎn)物對的ACE抑制率提高30～80％，產(chǎn)品得率提高30～70％。在酶解過程中使用Ca(OH)2溶液調(diào)節(jié)pH，避免引入可能升高人體血壓的Na離子，簡化了生產(chǎn)工藝，降低了成本。利用該方法制備得到的玉米黃粉蛋白水解物可用于制備降血壓藥物或者輔助調(diào)節(jié)血壓功能的保健食品。
文檔編號A61P9/12GKCN101487038 B發(fā)布類型授權(quán) 專利申請?zhí)朇N 200810235767
公開日2011年12月21日 申請日期2008年12月5日
發(fā)明者丁青芝, 何榮海, 王振斌, 馬海樂, 駱琳 申請人:江蘇大學(xué)導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan