專利名稱:一種提取百合多糖的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種以蘭州百合鱗莖為原料，微波輔助提取百合多糖的方法。
技術背景
蘭州百合(Lilium david var. unicolor Salisb.)是百合科百合屬川百合的一個交種，是一種多年生鱗莖類草本植物。其鱗莖碩大，因其地下莖塊由數(shù)十瓣鱗片相累抱合， 有“百片合成”之意而得名，且顏色潔白，鱗片豐滿白嫩，質(zhì)地細膩，口味甜美而幽香；其花單生，大而美麗，香味濃郁，有很高的食用、藥用、保健和觀賞價值，不僅是中國百合中的上品， 而且是中國唯一的甜百合。由于百合多糖顯著的生物學活性，因此對百合多糖的研究也就成為一個當前的熱點。中國專利公開號為CN100999554A的專利申請公開了一種抗疲勞百合多糖的制備方法，報道了此多糖能增強力竭平均時間，具有良好的抗疲勞效果。中國專利公開號為CN101270167A的專利申請公開了一種增強免疫力的百合多糖的制備方法，報道了此多糖能夠提高巨噬細胞的吞噬能力，促進其非特異性免疫功能，拮抗環(huán)磷酰胺及恢復T 細胞介導的細胞免疫反應，提高T淋巴細胞的應答功能。
常規(guī)多糖提取方法多采用熱水浸提，利用多糖在熱水中的溶解度隨時間、溫度、 PH值等的變化而不同，通過調(diào)整浸提時間、溫度和pH值來增加提取率，普遍存在設備投資較大，運行成本高且提取率較低等問題。而微波是通過磁控管所產(chǎn)生的每秒24. 5億次超高頻快速震蕩使溶劑分子尤其是極性介質(zhì)發(fā)生高速震蕩、自旋，增大了溶劑進入溶質(zhì)內(nèi)部的能力，利用分子極化或離子導電效應而直接對物質(zhì)進行加熱，微波的體積加熱與選擇性加熱能使原料的細微組織結構發(fā)生變化，使目標成分更容易從基質(zhì)中釋放出來，使得整個提取時間縮短，提取率增高，同時由于微波的穿透力，也使得對原料處理的粒度要求降低。針對當前植物多糖較高的利用價值，多糖的高效提取也就成為目前研究的一個主要方向。中國專利公開號為CN 101147537A的專利申請公開了一種從苦瓜中高效提取苦瓜多糖的方法，公開了一處用纖維素酶法與微波輔助提取苦瓜多糖的方法，用質(zhì)量分數(shù)為0. 6% 纖維素酶處理10-ianin，然后用700W-1000W處理3_5min，55_60°C熱水煮3_4h，得率可達 19. 53% ；中國專利公開號為CN101240036A的專利申請公開了一種微波輔助提取沙蒿多糖的方法，報道了在功率在600W-800W，時間在20-30min，多糖得率高于30% ；中國專利公開號為CN1277209A的專利申請公開了微波提取茶葉中多糖和多酚類物質(zhì)的方法，該方法采用微波功率在500-1500W從茶葉中提取多糖的方法，提取物多糖含量為30% -45% ；中國專利公開號為CN101(^9086A的專利申請公開了一種精制黃芪多糖的方法，在微波輔助提取下，黃芪多糖的得率為8. 50% ；中國專利公開號為CN 1569854A的專利申請公開了微波提取苦參堿工藝，報道了一種在12-36W/L的微波強度下照射40-70分鐘后，苦參堿濃度達到0. 22%以上，當提取濃度相同時，可節(jié)約沈小時，節(jié)能約40%。；中國專利公開號為 CN1281856A的專利申請公開了一種微波提取銀杏黃酮和銀杏內(nèi)酯類物質(zhì)的方法，采用微波功率在500-1500W，水和有機溶劑的混合物中進行提取，提取物中銀杏總黃酮和內(nèi)酯的含量為38-40% /10-12%。在上述眾多的專利文獻中，均未涉及以蘭州百合鱗莖為原料的微波輔助提取天然生物多糖的方法及應用，本發(fā)明首次使用微波法輔助提取百合多糖，發(fā)明了一種微波輔助提取百合多糖的方法。
相比而言，微波輔助提取通過使用較少溶劑和能量來支持，是一項環(huán)境友好的綠色生產(chǎn)技術。本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術中存在的缺點，利用微波萃取的特點，提供從蘭州百合鱗莖中提取天然生物多糖的新方法，即提供一種可以取代上述傳統(tǒng)的溶劑浸提和超聲波提取的簡便、易行、高效、快速、成本低以及廢液排放量少的環(huán)境友好的綠色生產(chǎn)技術。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術問題是利用微波萃取的特點，提供一種微波輔助提取百合多糖的新方法；該方法是以蘭州百合鱗莖為原料，利用微波萃取技術，快速、高效的提取天然生物多糖的新方法。
為解決上述技術問題，本發(fā)明所述的一種微波輔助提取百合多糖的方法，包括如下步驟
1)稱取烘干的蘭州百合鱗莖，置微波提取設備中，用蒸餾水充分溶解、攪拌，所述蘭州百合鱗莖與蒸餾水的重量與體積比為1 10 70，然后在微波頻率為M50MHz，功率為100W 700W的條件下提取15 60分鐘，控制提取溫度為40°C 80°C，收集提取液， 在0. 06 0. 08MPa的條件下抽濾，收集濾液，在0. 07 0. 08MPa下減壓濃縮至原體積的 1/6 1/3，在濃縮液中加入乙醇，所述乙醇含量占加入乙醇后溶液總體積的70 85%，室溫下靜置M小時，然后在4000 5000轉/分鐘的轉速下離心分離，收集沉淀；將沉淀物在-65 -55°C，1 101 下的條件下冷凍干燥18 30小時，得物質(zhì)A ；
2)稱取物質(zhì)A，用100 200倍重量的水溶解，再用體積比為1 3 5的正丁醇和氯仿混合液萃取4 10次，收集上層水溶液，在50 55°C、0. 07-0. 09MPa下減壓濃縮至原體積的1/9 1/15時，減壓濃縮后倒入截留分子量8000 14000Da的透析袋中透析30 48小時，然后向透析袋內(nèi)加入乙醇，使乙醇含量占加入乙醇后溶液總體積的80 85%，靜置14 20小時；在4500 5000轉/分鐘的轉速下離心分離，收集沉淀；將沉淀物-65 -55°C，1 101 下的條件下冷凍干燥20 30小時，得純化的百合多糖。
紅外光譜顯示在3432-1!!!!!處有一特征峰，O-H的伸縮振動在3200 3600CHT1處出現(xiàn)一寬峰，2925.1!!!!!為C-H鍵的變角振動引起的，1620-1!!!!!為-C00—的伸縮振動峰，1070-1!!!!! 為-CO的伸縮振動，這些均為多糖的吸收峰。利用GPC測得微波提取所得百合多糖的分子量結果為 Mn :1. 539X 105、Mp :4. 325X IO4 ；Mw :2. 013X 1065 ；Mz :3. 634X 107 ；Mw/Mn 13. 081。通過GC-MS分析，所得百合多糖的單糖組成為D-甘露糖和D-葡萄糖，其摩爾比為 47. 76 52. 24。
本發(fā)明的特點和產(chǎn)生的有益效果是
本發(fā)明是蘭州百合鱗莖為原料的微波輔助提取，步驟簡便，易于操作，提取率高達 35%,提取時間為15 60分鐘，大大降低了能源消耗，屬典型的環(huán)境清潔綠色生產(chǎn)工藝。本發(fā)明充分利用蘭州百合良好的資源優(yōu)勢，利用微波技術開發(fā)本產(chǎn)品，市場前景十分看好，經(jīng)濟效益廣闊。


下面結合附圖對本發(fā)明的具體實施方式
作進一步詳細的說明
圖1為本發(fā)明的方法制備出的天然多糖產(chǎn)品的紅外掃描圖；
圖2為本發(fā)明的方法制備出的天然多糖產(chǎn)品的分子量圖；
圖3為本發(fā)明的方法制備出的天然多糖產(chǎn)品的單糖組成圖。
具體實施方式
下面結合附圖和實施例對本發(fā)明進一步說明。
實施例1:
1)稱取烘干的蘭州百合鱗莖50g，置微波提取設備中，用蒸餾水充分溶解、攪拌 (原料與水的重量與體積比為1 70)，用頻率為M50MHZ，功率為400W的微波提取30分鐘，控制提取溫度為80°C，收集提取液，在0. OSMPa的條件下抽濾，收集濾液，在0. 07MPa下減壓濃縮至原體積的1/6，在濃縮液中加入乙醇，使乙醇含量占加入乙醇后溶液總體積的 70%，室溫下靜置M小時，然后在4000轉/分鐘的轉速下離心分離，收集沉淀；將沉淀物在-65°C，IPa下的條件下冷凍干燥18小時，得物質(zhì)A ；
2)稱取IOg物質(zhì)A，用100倍重量的水溶解，用體積比為1 3的正丁醇和氯仿混合液萃取4次，收集上層水溶液，在50°C、0. 07MPa下減壓濃縮至原體積的1/9時，減壓濃縮后倒入截留分子量8000 14000Da的透析袋中透析30小時，然后向透析袋內(nèi)液中加入乙醇，使乙醇含量占加入乙醇后溶液總體積的80%，靜置14小時；在4500轉/分鐘的轉速下離心分離，收集沉淀；將沉淀物_65°C，1 下的條件下冷凍干燥20小時，得純化的百合多糖。
微波輔助提取百合多糖的得率
權利要求
1. 一種提取百合多糖的方法，其特征在于，該方法包括以下步驟1)稱取烘干的蘭州百合鱗莖，置微波提取設備中，用蒸餾水充分溶解、攪拌，所述蘭州百合鱗莖與蒸餾水的重量與體積比為1 10 70，然后在微波頻率為M50MHZ，功率為100W 700W的條件下提取15 60分鐘，控制提取溫度為40°C 80°C，收集提取液， 在0. 06 0. 08MPa的條件下抽濾，收集濾液，在0. 07 0. 08MPa下減壓濃縮至原體積的 1/6 1/3，在濃縮液中加入乙醇，所述乙醇含量占加入乙醇后溶液總體積的70 85%，室溫下靜置M小時，然后在4000 5000轉/分鐘的轉速下離心分離，收集沉淀；將沉淀物在-65 -55°C，1 101 下的條件下冷凍干燥18 30小時，得物質(zhì)A ；2)稱取物質(zhì)A，用100 200倍重量的水溶解，再用體積比為1 3 5的正丁醇和氯仿混合液萃取4 10次，收集上層水溶液，在50 55°C、0. 07-0. 09MPa下減壓濃縮至原體積的1/9 1/15時，減壓濃縮后倒入截留分子量8000 14000Da的透析袋中透析 30 48小時，然后向透析袋內(nèi)加入乙醇，使乙醇含量占加入乙醇后溶液總體積的80 85%，靜置14 20小時；在4500 5000轉/分鐘的轉速下離心分離，收集沉淀；將沉淀物-65 -55°C，1 101 下的條件下冷凍干燥20 30小時，得純化的百合多糖。
專利摘要
本發(fā)明公開了一種提取百合多糖的方法，該方法是以蘭州百合鱗莖為原料，利用微波萃取技術，快速、高效的提取百合多糖。該方法步驟簡便，易于操作，提取率高達35％，提取時間為15～60分鐘，大大降低了能源消耗，屬典型的環(huán)境清潔綠色生產(chǎn)工藝。
文檔編號C08B37/00GKCN101921344 B發(fā)布類型授權 專利申請?zhí)朇N 201010247166
公開日2012年5月23日 申請日期2010年8月6日
發(fā)明者付麗娟, 姚健, 孔維寶, 張繼, 彭小鳳, 梁俊玉, 王俊龍, 趙保堂, 趙美榮, 郭肖, 馬君義 申請人:西北師范大學導出引文BiBTeX, EndNote, RefMan專利引用 (3),