專利名稱:呋喃酮衍生物的制備方法
磷脂酶A2(PLA2)是一種依賴于鈣的酶，它能夠裂解磷脂中的R-2?；?。在哺乳動物組織中這一裂解主要得到游離的花生四烯酸，然后由環(huán)氧化酶系將花生四烯酸轉(zhuǎn)化成前列腺素和凝血噁烷。另外，通過脂氧合酶路徑，花生四烯酸還可以轉(zhuǎn)化成白三烯(Leukotrie-nes)。引自G.Weissman Cellular Immunology第82卷，117(1983)，另引自E.Israel和J.M.Drazen“白三烯和氣喘;基本評論”Current Concepts in Allergy and Clinical Immunology ⅩⅣ卷，No3.pp.11-16(1983)。
許多抗炎劑，如阿斯匹林，消炎痛，布洛芬，都是通過抑制環(huán)氧化酶途徑阻止前列腺素的合成。相似地抑制脂氧合酶途徑，由此阻止白三烯的合成同樣可以產(chǎn)生抗炎作用。具有阻止花生四烯酸釋放的PLA2抑制劑能有效地阻斷上述兩條路徑，并由于阻斷上述兩條路徑中的介體合成，它應(yīng)成為有效的抗炎劑。
本發(fā)明的目的在于提供某些呋喃酮衍生物，通過這些化合物的抑制PLA2酶的能力而作為抗炎劑和抗變應(yīng)劑。
本發(fā)明所提供的化合物分子式為
〔式中;R1為含有總數(shù)0-6個雙鍵和三鍵的C8-C24直鏈或支鏈單價烴基，或R1為分子式如下的基團(tuán);
式中n為0或1，M為-CHO或-CH2OH;或者R1為R-alk其中alk為含有0-2個雙鍵或三鍵的C2-C12的單價烴基，R為萘氧基或芐苯氧基〕上述分子式所限定的化合物可用于治療哺乳動物的炎癥，氣喘，變應(yīng)性疾病及其由于前列腺素，凝血噁烷或白三烯過量而引起的任何其他有關(guān)疾病。
本發(fā)明也提供了一些藥物組方，其中包括分子式(Ⅰ)呋喃酮作為活性成份和藥物上可以接受的載體，稀釋劑或?yàn)榇硕拥馁x形劑配合使用。
前述分子式化合物中最好的一組是;R1為10至20碳，尤其以12-16碳單價無環(huán)烴基團(tuán)為最佳。單價無環(huán)烴基可以是直鏈的或支鏈的，并且最好含有2-4個雙鍵。最理想的R1為
與呋喃酮環(huán)最近的乙烯碳原子相連接的甲基可以任意地用羧乙醛或羥甲基取代。
“萘氧基”應(yīng)為1-，最好是2-萘氧基?！捌S苯氧基”應(yīng)為3-，4-，最好是2-芐苯氧基?！癆lk”為由C2-C12烴而來的二價有機(jī)基團(tuán)，并且最好是二，三，或四亞甲基。
本發(fā)明的化合物可以用本專業(yè)所熟知的幾種方法中的任何一種方法來制備。圖解1歸納了對于制備本發(fā)明中脂肪酸衍生物十分有用的反應(yīng)程序。
圖解1
其中R3為甲基或乙基。
按照圖解1，用還原劑(如氫化鋁鋰)，在非反應(yīng)性溶劑(如四氫呋喃，或乙醚)中，最好的反應(yīng)溫度為-20至20℃，處理甲或乙酯Ⅱ，使它轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的醇Ⅲ。一般用克分子稍過量的酯Ⅱ，以防止任何不飽和鍵的還原。
然后用Swern氧化，將所得到的醇Ⅲ氧化成相應(yīng)的醛。一般在約-60至0℃進(jìn)行這一反應(yīng)，并且要使用近1摩爾當(dāng)量的草酰氯，近2個摩爾當(dāng)量的二甲亞砜，3-8摩爾當(dāng)量的三乙胺，通常是在非反應(yīng)性溶劑，如二氯甲烷中進(jìn)行。
按照Bourguignon等在J.Org.Chem，46卷4889(1981)所報道的方法，可以將醛Ⅳ轉(zhuǎn)化成所希望得到的呋喃酮Ⅰ。通常在二氧噁烷和水的混合物中，在惰性氣體存在下，將醛與相近摩爾當(dāng)量的水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽迴流。在該混合物的迴流溫度加熱時，反應(yīng)要在約24小時內(nèi)完成。
圖解2歸納了制備本發(fā)明中萘氧基化合物中特別有用的另一個方法。以適宜的芐基苯酚為初始原料用同樣的方法可以制備芐基苯氧基衍生物。
圖解2
用x-alk-CH2-CN(x＝氯或溴)將萘酚Ⅴ烷基化得到相應(yīng)的腈衍生物Ⅵ。所用方法為規(guī)范烷化工藝。最好的條件為在非反應(yīng)性溶劑中(如二甲基甲酰胺，用強(qiáng)堿(如氫化鈉)與萘酚Ⅴ反應(yīng)。一般反應(yīng)溫度為約20-100℃，最好是在催化量的堿性碘金屬(如碘化鉀或碘化鈉)存在下進(jìn)行。
用阻滯還原劑還原，然后酸化可直接將腈中間體Ⅵ轉(zhuǎn)化成醛中間體Ⅶ。最好的還原劑為二異丁基氫化鋁。反應(yīng)一般是在非反應(yīng)性溶劑(如四氫呋喃)中，在約-20至20℃，惰性氣體存在下進(jìn)行。一般使用4摩爾當(dāng)量的還原劑。簡單地將酸，如無機(jī)酸(如鹽酸)加到該反應(yīng)混合物中便可完成酸化水解。
用與圖解1中將中間體Ⅳ轉(zhuǎn)化成產(chǎn)物Ⅰ所述的相同方法可將所得到的醛Ⅶ轉(zhuǎn)化成最終產(chǎn)物Ⅷ。
在以萜烯為側(cè)鏈的圖解3中描述了制備分子式Ⅰ化合物的另一方法，該方法對制備其中R1為萜烯的衍生物尤為有用。
圖解3
其中n為1或2。用本專業(yè)所熟知的方法將醇Ⅸ轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的氯代衍生物Ⅺ。當(dāng)涉及萜烯時，2，4，6-可力丁，氯化鋰，二甲基甲酰胺，甲磺酰氯對這一轉(zhuǎn)化十分有效，方法見;Collington等J.Org.Chem.36卷(20)，3044(1971)，通過與丙酮醛二甲基縮醛的二甲腙衍生物的陰離子反應(yīng)，氯代中間體Ⅺ可轉(zhuǎn)化成二甲基縮醛中間體Ⅻ，方法是;Cuvigny等，Synthesis，198(1977)。所需丙酮醛二甲基縮醛之二甲腙的制備方法引自;Newkome等，J.Org.Chem.31卷，677(1966)和Smith等，J.Org.Chem.22卷，358(1957)，以及后面的實(shí)例中的描述。所得到的腙Ⅻ先用酸水解得到相應(yīng)的酮縮醛，然后用三甲基硅烷基乙酸烷基酯的鋰衍生物處理。方法引自;Hartzell等Tetrahedron Letters，15卷，1403(1974);Rathke等，Syn.Comm.，3卷(1).67(1973)。用酸性硅膠處理中間體ⅩⅢ(Larcheveque等，Tetrahedron Letters，22卷(17)，1595(1981)〕得到甲氧基同系物ⅩⅣ，再用約1摩爾當(dāng)量的0.1N的氫氧化鈉或類似堿處理，可將其轉(zhuǎn)化成欲得產(chǎn)物ⅩⅤ。
圖解4歸納了制備具有羧醛取代的萜烯衍生物可以使用的相似程序。
圖解4
式中，Z和Z′各自為甲基或乙基，或者當(dāng)Z和Z′連在一起時為二，三，或四亞甲基。
按照圖解4，用像氫化鋁鋰這樣的還原劑處理中間體ⅩⅢ，得到相應(yīng)的醇ⅩⅥ。按照圖解3所示的一般程序，將醇轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的氯代衍生物ⅩⅦ，然后再將其轉(zhuǎn)化成腙中間體ⅩⅧ。將中間體ⅩⅧ水解成二縮醛中間體ⅩⅨ，再轉(zhuǎn)化成酯ⅩⅩ，再經(jīng)酸性水解便可制備所希望的最終產(chǎn)物ⅩⅪ，及其付產(chǎn)物2-甲氧基同系物，后者可用來作為制備下面所討論的本發(fā)明中羥甲基化合物的中間體。
分子式ⅩⅪ所代表的一類化合物也可用作相應(yīng)的羥甲基同系物的中間體?？墒褂靡?guī)范的還原工藝，如;在非反應(yīng)性溶劑中(如甲醇)用硼氫化鈉還原。另外，最好是用前述中將ⅩⅩ轉(zhuǎn)化成ⅩⅪ時作為付產(chǎn)物而形成的2-甲氧基衍生物來進(jìn)行這一反應(yīng)。將醛還原之后，用前面所講的溫和的堿性水解可將甲氧基轉(zhuǎn)化成所希望的羥基官能團(tuán)。
相應(yīng)地本發(fā)明也提供了一個制備分子式(Ⅰ)化合物的程序。
其中R1為含有0-6個雙鍵或三鍵的C8-C24直鏈或支鏈單價烴基，或者分子式為
的基團(tuán)，式中n為0或1，M為-CHO或-CH2OH;或者是R-烷基，其中烷基為含有0-2個雙鍵或三鍵的C2-C12直鏈或支鏈單價烴基團(tuán)，R為萘氧基或芐基苯氧基，該程序包括(a)通式(Ⅳ)醛與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽的反應(yīng);
式中R1定義同前或(b)通式(ⅩⅣ′)化合物的堿性水解
式中R1的定義同前或(c)通式(ⅩⅩ)化合物的酸性水解，提供分子式為(Ⅰ)的化合物，
式(ⅩⅩ)中Z和Z′各自為甲基或乙基，或當(dāng)Z和Z′連在一起時為二，三，或四亞甲基，以及n為1或2，式(Ⅰ)中R1為
(d)還原分子式(Ⅰ)化合物，式中R1為
提供分子式(Ⅰ)化合物，式中R1為
中間體Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ和Ⅸ，及其他所需試劑是市場上可以買到的，文獻(xiàn)中已知的，或是用文獻(xiàn)已知方法可以制備的，或是用在下述實(shí)例中所描述的方法可以制備的化合物。
分子式(Ⅰ)呋喃酮環(huán)的羥基取代物可以以兩種主體異構(gòu)體的其中之一存在。另外，R1取代物所涉及的雙鍵可以是順式，也可以是反式。本發(fā)明并不限定于分子式(Ⅰ)化合物的任何實(shí)際上的異構(gòu)體，而是包括該化合物可能形成的所有獨(dú)特的異構(gòu)體和清旋體。
下列實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明中化合物的制備過程。這些實(shí)例僅僅是說明，但決不意味著對本發(fā)明的范圍有任何限制。
實(shí)例1(Z，Z)-4-(7，10-十六碳二烯基)-5-羥基-2-(5H)-呋喃酮A.9，12-十八(碳)二烯醇的制備在近0℃，充氬條件下，將溶于20毫升乙醚中的20克亞油酸甲酯溶液加到含有1.8克氫化鋁鋰的150毫升乙醚混懸液中。0℃攪拌該混合物約2小時。緩慢地加入1.8毫升水，使該反應(yīng)驟停，然后加入1.8毫升15%的氫氧化鈉溶液和5.4毫升水。過濾該混合物，濾液蒸干。將所得到的油溶于乙醚，水洗，用硫酸鎂干燥，過濾，蒸除溶劑便得到17.7克9，12-十八(碳)二烯醇。
B.9，12-十八(碳)二烯醛的制備將20.23毫升二甲亞砜溶于47毫升二氯甲烷中，在近-60℃，充氬條件下，將上述溶液滴加到攪拌著的230毫升溶有12.3毫升草酰氯的二氯甲烷溶液中。攪拌該混合物5分鐘，將50毫升含有25克9，12-十八(碳)二烯醇的二氯甲烷溶液加入該混合物，同時維持反應(yīng)溫度在-50℃以下。-50℃攪拌反應(yīng)20分鐘，緩慢溫?zé)嶂?20℃。然后加入60毫升三乙胺使反應(yīng)驟停。在-20℃攪拌5分鐘后，使該混合物溫?zé)嶂潦覝?，蒸干。殘余物溶于乙醚，用水洗兩次，再用飽和氯化鈉溶液洗一次，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。得到的油用薄層色譜法(flash chromatography)，展開劑為10∶1己烷∶乙醚進(jìn)行純化，得到17.1克9，12-十八(碳)二烯醛。
c.(Z，Z)-4-(7.10-十六碳二烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮的制備在充氮條件下，在50毫升的園底燒瓶中，將2.33克含水乙醛酸，3.44克嗎啉鹽酸鹽和10.1毫升二氧噁烷混合快速攪拌。滴加水直到形成均一溶液。加入6 7/10 克9.12-十八碳二烯醛。猛烈地?cái)嚢柙摶旌衔?小時，然后加熱迴流24小時。減壓下蒸餾該反應(yīng)混合物。將所得到的油溶于乙醚中，水洗，硫酸鎂干燥，過濾，蒸除乙醚。所得到的粗油用中壓色譜法在硅膠柱上純化，洗脫劑為3∶1己烷/乙酸乙酯。混合適宜級份，蒸除洗脫劑，便得到4.0克無色油狀題目期望的產(chǎn)物。
元素分析C20H32O3;
計(jì)算值C，75.19 H，9.78實(shí)測值C，75.01 H，10.0113C核磁共振，ppm172.1，170.4，130.0，129.6，128.1，127.7，116.8，99.5，31.5，29.5，29.4，29.2，28.9，27.7，27.2，27.1，26.6，25.7，22.5，14.1。
實(shí)例2-11按照實(shí)例1的方法從適宜的中間體制備了下列化合物。產(chǎn)率以相應(yīng)中間體的摩爾產(chǎn)率表示。
2.(Z，Z，Z)-4-(7，10，13-十六碳三烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以中間體醇計(jì)算，收率為34.9%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
13C核磁共振譜，ppm172.1，170.4，131.6，129.7，128.4，128.1，127.7，126.9，116.8，99.4，30.3，29.4，29.1，28.9，27.6，27.1，26.6，25.6，20.5，14.2。
3.(Z，Z，Z，Z)-5-羥基-4-(3，6，9，12-十八碳四烯基)-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以中間體甲酯計(jì)算，收率為22.8%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
13C核磁共振譜，ppm171.9，169.5，130.2，129.5，128.4，127.7，127.5，117.3，99.4，31.5，29.3，27.5，27.2，26.2，25.9，25.7，24.4，22.5，14.0。
4.(E)-4-(7-十六碳烯基)-5-羥基-2-(5H)-呋喃酮，油狀物，以甲酯中間體計(jì)算，收率為32.0%，紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與欲得產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C20H34O3;
計(jì)算值C，74.49;H，10.63實(shí)測值C，73.88;H，9.8713C核磁共振，ppm171.2，170.6，130.3，129.7，116.7，99.5，32.5，31.9，29.4，29.2，28.7，27.6，26.6，22.6，14.1。
5.(Z，Z，Z)-4-(4，7，10-十六碳三烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以甲酯中間體計(jì)算，產(chǎn)率為51.2%，紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析;C20H30O3;
計(jì)算值;C，75.43;H，7.50實(shí)測值C，75.17;H，7.3113C核磁共振，ppm172.0，170.2，130.2，128.9，128.4，127.6，127.4，116.9，99.5，31.5，29.3，27.2，26.8，26.6，25.7，22.5，14.1，6，4-十六烷基-5-烴基-2(5H)-呋喃酮，油狀物以中間體醛計(jì)算，收率為18.6%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析，C20H36O3;
計(jì)算值C，74.03，H，11.18，實(shí)測值C，73.80，H，10.87，質(zhì)子核磁共振，〔丁烯烴酸內(nèi)酯質(zhì)子(butenoid protons)〕ppm5.97，5.81。
紅外光譜(羰基吸收峰);1759.2cm-17，5-羥基-4-(8-壬烯基)-2(5H)-呋喃酮，油狀物以中間體醛計(jì)算，產(chǎn)率為52.5%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析，C13H20O3;
計(jì)算值;C，69.61;H，8.99，實(shí)測值;C，69.37;H，8.76，13C核磁共振，ppm172.1，170.5，138.7，116.8，114.1，99.4，33.6，29.0，28.9，27.6，26.6，8，(Z)-4-(9-十六碳烯)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以醇計(jì)算，產(chǎn)率為74.9%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析;C20H34O3;
計(jì)算值;C，74.49;H，10.63;
實(shí)測值;C，74.24;H，10.62;
13C核磁共振，ppm172.1，170.4，129.8，129.6，116.9，99.5，31.8，29.5，29.3，29.0，27.7，27.3，26.8，22.7，14.1，9，(Z，Z，Z，Z，Z，Z，)-4-(2，5，8，11，14，17-二十碳六烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以甲酯中間體計(jì)算，產(chǎn)率為46.4%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
13C核磁共振，ppm171.7，168.5，131.9，131.7，128.6，128.4，128.2，127.8，127.6，127.0，126.8，122.4，117.4，99.1，25.8，25.6，20.5，14.2。
10.(Z)-4-(11-二十碳烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以甲酯中間體計(jì)算，產(chǎn)率為56.1%，紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C24H42O3;
計(jì)算值C，76.14;H，11.18;O，12.68;
實(shí)測值C，76.43;H，11.12;O，12.92;
13C核磁共振，ppm171.9，170.3，129.7，117.0，99.3，31.9，29.8，29.6，29.3，27.7，27.3，26.7，22.7，14.0。
11.(Z)-4-(7-十六碳烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮，油狀物，以中間體醛計(jì)算，產(chǎn)率為47.2%。質(zhì)子核磁共振譜，質(zhì)譜與產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
質(zhì)譜;分子離子峰(M+)＝322。
實(shí)例125-羥基-4-〔4-(2-萘氧基)丁基〕-2(5H)-呋喃酮。
A.6-(2-萘氧基)己腈的制備將2.91克含量為60%的溶于油的氫化鈉逐漸加到溶有10克2-萘酚的185毫升二甲基甲酰胺溶液中。放氫停止后，加入7.52毫升6-溴己腈，在60℃加熱反應(yīng)約18小時。加入催化量的碘化鈉，在60℃攪拌反應(yīng)約24小時。在80℃再加熱24小時后，將反應(yīng)混合物冷卻，用2毫升水處理。減壓下濃縮該溶液。殘余物溶于乙醚，用水洗數(shù)遍，用硫酸鎂干燥，蒸餾得到粗油。在乙醚/戊烷中結(jié)晶，得到7.5克所期望得到的付標(biāo)題中間體，m.p.55-56℃B.6-(2-萘氧基)-己醛的制備將4克6-(2-萘氧基)己腈溶于170毫升四氫呋喃中。將該溶液冷至近0℃，并在充氬條件下滴加57.6毫升。濃度為1.2摩爾的二異丁基氫化鋁的己烷溶液，在0℃攪拌反應(yīng)6小時，在此期間加入33.5毫升濃度為2摩爾鹽酸溶液。將該反應(yīng)混合物，減壓濃縮，殘余物溶于1∶1的乙醚/乙酸乙酯溶液中。分離有機(jī)層，水洗三次，硫酸鎂干燥，過濾，蒸除溶劑得到3.3克黃色油狀的付標(biāo)題中間體，該產(chǎn)物不經(jīng)進(jìn)一步純化便可用于下一步反應(yīng)。
C.5-羥基-4-〔4-(2-萘氧基)丁基〕-2(5H)-呋喃酮的制備。
按照實(shí)例1C所述方法，3.3克的6-(2-萘氧基)己醛可轉(zhuǎn)化成1.84克的標(biāo)題產(chǎn)物，m.p.105-107℃。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C18H18O4計(jì)算值C，72.47;H，6.08;
實(shí)測值C，72.47;H，6.08。
13C核磁共振，ppm171.1，169.1，156.7，134.5，129.4，129.0，127.5，126.6，126.3，123.6，118.7，117.6，106.9，99.0，67.4，28.9，27.5，23.6。
實(shí)例135-羥基-4-(4，8，12-三甲基-3，7.11-三-十三碳三烯基)-2(5H)-呋喃酮。
A、氯代法呢基的制備用381毫克的氯化鋰溶解在近5毫升二甲基甲酰胺中，在充氬條件下，處理不斷攪拌著的2.0克法呢醇和1.31毫升2，4，6-可力丁的混合物。將該溶液冷卻至近0℃，此時形成混懸液，用0.766毫升的甲磺酰氯處理該混懸液。攪拌3小時后，將此混懸液倒入冰水中，用1∶1的乙醚/戊烷抽提。合并的有機(jī)提取液用硝酸銅的濃溶液洗四次，直到蘭色銅溶液的顏色不再加深為止，即說明可力丁清除干凈了。用硫堿鎂干燥有機(jī)層，過濾，蒸除溶劑，便得到2.0克無色油狀的付標(biāo)題要求的中間體，該中間體不經(jīng)進(jìn)一步純化便可使用。
B、法呢基酮縮醛的制備將1.29毫升的二異丙基胺溶在50毫升四氫呋喃中，并通過外冰浴將此溶液冷至0℃。通入氬氣，隨后加入5.7毫升濃度為1.6摩爾的正-丁基鋰的己烷溶液。攪拌15分鐘后，加入含有1.31克丙酮醛縮二甲腙縮醛(pyruvaldehyde dimethylhydrazone dimethyl acetal)的5毫升四氫呋喃溶液。攪拌30分鐘后，將5毫升含有2克氯代法呢烷的四氫呋喃溶液加到反應(yīng)混合物中。將該反應(yīng)混合物在近-10℃條件下放置三天。將3毫升1∶1水/四氫呋喃液加入該溶液，減壓下濃縮該反應(yīng)液。殘余物溶于乙醚中，水洗，用硫酸鎂干燥，過濾，蒸除溶劑得到2.6克黃色粗油。將該油溶于20毫升四氫呋喃中，用13毫升2N的鹽酸處理。另外再加175毫升乙醚，然后使之分層。用水，5%的碳酸氫鈉，水，依次洗滌有機(jī)層，用硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸餾。所得到的油用中壓液相硅膠層折純化，洗脫劑為6∶1的己烷/乙醚，這樣得到1.4克付標(biāo)題所要求的中間體。質(zhì)子核磁共振譜證實(shí)了所要求的中間體的結(jié)構(gòu)。
C、3-二甲氧基甲基-7，11，15-三甲基-2，6，10，14-十六碳四烯酸特丁酯的制備。
將含有0.47毫升二異丙基胺的25毫升四氫呋喃溶液冷卻至0℃。在通氬條件下，加入2.0毫升濃度為1.67摩爾的正-丁基鋰的己烷溶液。將該反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，然后用外部干冰/丙酮浴將其冷卻至-78℃。然后滴加5毫升含0.57克三甲基硅甲乙酸特丁酯的四氫呋喃溶液，并攪拌反應(yīng)13分鐘，加入5毫升含1.0克法呢酮縮醛的四氫呋喃溶液，攪拌反應(yīng)，同時使溫度回升至室溫。再次將溶液冷卻至-78℃，加入2毫升飽和氯化銨溶液。減壓蒸餾該混合物，殘余物用乙醚稀釋，水洗兩次，用硫酸鎂干燥，過濾，蒸除溶劑，得到1.27克付標(biāo)題所要求的中間體，質(zhì)子核磁共振譜和分析高壓液相色譜均證實(shí)，該產(chǎn)物為1∶3的E/Z異構(gòu)體混合物。
D.5-甲氧基-4-(4，8，12-三甲基-3，7，11-十三碳三烯基)-2(5H)呋喃酮的制備用7.4克酸性硅膠(由50克Woelm硅膠(100-200微米)與14克15%硫酸混合成漿在40℃過夜干燥制得)處理溶于30毫升二氯甲烷中的1.28克3-二甲氧基甲基-7.11，15-三甲基-2，6，10，14-十六碳四烯酸特丁酯溶液。充氬條件下攪拌反應(yīng)近18小時。將該反應(yīng)混合物過濾，用二氯甲烷將硅膠洗幾次。將合并的二氯甲烷溶液蒸至干。用乙醚溶解所得油狀物，水洗，硫酸鎂干燥，過濾，蒸除溶劑。將所得到的油用中壓液相硅膠層折，洗脫劑為4∶1己烷/乙酸乙酯，經(jīng)此處理得到580毫克無色油狀付標(biāo)題所要求的中間體。該化合物是所有8個3位及7位雙鍵的異構(gòu)體和異構(gòu)的甲氧基取代物的混合物。
E.5-羥基-4-(4，8，12-三甲基-3，7，11-十三碳三烯基)-2(5H)-呋喃酮的制備將310毫克由實(shí)例13D所得的中間體溶解在200毫升四氫呋喃中。用9.9毫升0.1N的氫氧化鈉處理該溶液，攪拌3天。將該反應(yīng)物冷至0℃，加0.1N的鹽酸調(diào)至pH4。用乙醚提取該混合物，用硫酸鎂干燥該有機(jī)提取液，過濾，蒸除溶劑，得到一油狀物。進(jìn)行中壓液相硅膠層折純化，洗脫劑為3∶1己烷/乙酸乙酯;得到180毫克油狀物標(biāo)題所要求的產(chǎn)物。該產(chǎn)物為3位及7位側(cè)鏈雙鍵的異構(gòu)體以及異構(gòu)的羥基取代物的8個異構(gòu)體混合物。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜均與所期產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)相符。
元素分析，C20H30O3計(jì)算值C，75.43;H，9.50;
實(shí)測值C，74.03;H，10.08。
13C核磁共振，ppm171.8，169.8，137.1，137.0，134.9，124.5，124.2，123.8，123.7，122.8，122.0，117.2，99.4，39.9，39.7，32.3，32.0，28.0，27.8，26.8，26.6，26.4，25.6，25.2，25.0，23.3，17.6，16.1，16.0。
實(shí)例14(E，E)-4-(4，8-二甲基-3，7-壬二烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮。
按照實(shí)例13所述程序，由牻牛兒醇為原料制備了標(biāo)題產(chǎn)物，總收率為17.9%。紅外，質(zhì)子核磁共振，13C核磁共振譜，與所要求的產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C15H22O3;
計(jì)算值C，71.97;H，8.86;O，19.17;
實(shí)測值CC，71.76;H，8.66;O，19.37;
13C核磁共振，ppm171.8，169.8，137.0，131.2，123.9，122.0，117.2，99.4，39.6，27.8，26.6，25.6，25.2，17.6，16.1。
實(shí)例152-〔3-(2，5-二氫-2-羥基-5-氧-3-呋喃基)-亞丙基〕-6，10-二甲基-5，9-十一碳二烯醛。
A、3-二甲氧基甲基-7，11，-二甲基-2，6，10-十一碳三烯酸特丁基酯的制備將1.16毫升二異丙胺溶于50毫升四氫呋喃中0℃攪拌30分鐘。充氬條件下加入5.16毫升濃度為1.68克分子的正-丁基鋰的己烷溶液。攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物冷卻至-78℃并攪拌30分鐘。將三甲基硅甲乙酸特丁酯(1.56克)加入該反應(yīng)混合物。攪拌1小時后，加入5毫升含有2.0克牻牛兒基酮縮醛中間體的四氫呋喃溶液，該酮縮醛是由實(shí)例14中所得到的以牻牛兒醇為原料按照實(shí)例13A和13B所述一般方法制得的。將該反應(yīng)混合物攪拌15分鐘，并溫?zé)嶂潦覝?。然后再將該溶液再冷卻至-78℃，加入2毫升飽和氯化銨溶液使其水解。減壓下蒸發(fā)該反應(yīng)混合物，殘余物溶于乙醚，水洗兩次，再用飽和氯化鈉溶液洗一次，用硫酸鎂干燥，過濾，蒸除溶劑得到一油狀物，用中壓液相色譜法純化得到2.49克副標(biāo)題所要求的中間體，由質(zhì)子核磁共振證實(shí);該化合物為1∶4的E/Z異構(gòu)體混合物。
B.3-二甲氧基甲基-7，11-二甲基-2，6，10-十一碳三烯-1-醇的制備。
在充氬條件下，0℃，將1克由實(shí)例15A所述中間體加入25毫升乙醚溶有82.3毫克氫化鋁鋰混懸液中。1小時后加入0.08毫升水，隨后加入0.08毫升15%氫氧化鈉溶液和0.24毫升水。過濾該混合物，濾液用乙醚提取數(shù)次。有機(jī)提取液合并，用水及飽和氯化鈉溶液洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓濃縮濾液，得到881毫克無色油狀付標(biāo)題所要求的中間體。
C.3-二甲氧基甲基-7，11-二甲基-2，6，10-十一碳三烯氯代物的制備。
按照實(shí)例13A所述一般程序，將由實(shí)例15B所得到的醇(430毫克)轉(zhuǎn)化成458毫克副標(biāo)題中間體，該中間體立即用于下一步反應(yīng)。
D.1，1-二甲氧基-6-二甲氧基甲基-10，14-二甲基-5，9，13-十五碳三烯-2-酮二甲基腙的制備。
按照實(shí)例13B所述一般程序，3.77克的丙酮醛縮二甲腙二甲縮醛(pyruvaldehyde dimethyl hydrazone dimethylacetal)與276毫克由實(shí)例15C所得氯代物反應(yīng)得到5.18克的粗產(chǎn)物，經(jīng)中壓液相色譜法純化得到1.19克付標(biāo)題所要求的中間體。
E.1，1-二甲氧基-6-二甲氧基甲基-10，14-二甲基-5，9，13-十五碳三烯-2-酮的制備。
充氬條件下，將5克Woelm硅(膠)(100-200微米，活化)與30毫升二氯甲烷制成漿狀物。加入5/10毫升水。攪拌后，加入1.2克由實(shí)例15D所得到的腙，攪拌反應(yīng)2小時。另外再加0.1毫升水，再攪拌1小時。加入1克硅膠，攪拌反應(yīng)一小時，再加一克硅膠和0.1毫升水，再攪拌反應(yīng)2小時。過濾該反應(yīng)液，用丙酮洗滌硅膠。合并有機(jī)濾液并濃縮至干，殘余物溶于乙醚，水洗，飽和氯化鈉溶液洗滌，硫酸鎂干燥，濃縮至干，得到829毫克油狀付標(biāo)題中間體，該中間體不經(jīng)純化直接使用。
F.3，7-二甲氧基甲基-11，15-二甲基-2，6，10，14-十六碳四烯酸特丁酯的制備按照實(shí)例13C所述一般程序，829毫克由實(shí)例15E所得的酮與551毫克三甲基硅乙酸叔丁酯反應(yīng)，得到720毫克付標(biāo)題所要求的中間體。
G.2-〔3-(2，5-二氫-2-羥基-5-氧-3-呋喃基)亞丙基〕-6，10-二甲基-5，9-十一碳二烯醛的制備按照實(shí)例13D所述一般程序，用3.9克濃度為10%的硫酸/硅膠溶于16毫升二氯甲烷去處理由實(shí)例15F所得的720毫克酯6小時。經(jīng)規(guī)范操作及層析純化后，可得62.0毫克的標(biāo)題所期產(chǎn)物及回收166毫克2-甲氧基中間體。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜，質(zhì)譜與所期產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C20H28O4計(jì)算值C，72.26;H，8.49;
實(shí)測值C，72.14;H，8.62;
13C核磁共振，ppm194.5，170.9，167.6，151.1，144.3，136.2，131.1，123.9，122.8，117.9，99.0，39.7，26.7，25.9，25.6，24.4，17.6，16.0。
實(shí)例16-18按照實(shí)例12所述程序，由適宜的萘酚或芐基苯酚和相應(yīng)的ω-鹵代烷基腈制得了下列化合物。
16、5-羥基-4-〔5-(2-萘氧苯)戊基)-2(5H)-呋喃酮，m.p.89-94℃，以2-萘酚計(jì)算，收率為11.8%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振，13C核磁共振譜均與所期產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C19H20O4;
計(jì)算值C，73.06;H，6.45;
實(shí)測值C，73.21;H，6.48。
17、5-羥基-4-〔4-(2-芐基苯氧基)丁基〕-2(5H)-呋喃酮，m.p.72-75℃，以2-羥基二苯甲烷計(jì)算，收率為24.4%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜與所期產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C21H22O4計(jì)算值C，74.54;H，6.55;
實(shí)測值C，74.31;H，6.35。
18、5-羥基-4-〔5-(2-芐基苯氧基)戊基〕-2(5H)-呋喃酮，m.p.98-99℃，以2-羥基二苯甲烷計(jì)算，收率為33.2%。紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，13C核磁共振譜，質(zhì)譜均與所期產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)例195-羥基-4-〔4-(羥甲基)-8，12-二甲基-3 3.7.11-十三碳三烯基〕-2(5H)-呋喃酮將100毫克2-〔3-(2，5-二氫-2-甲氧基-5-氧-3-喃喃基)亞丙基〕-6，10-二甲基-5，9-十一碳二烯醛(實(shí)例15G)和10.9毫克硼氫化鈉置于30毫升無水甲醇中，充氬條件下，室溫?cái)嚢?小時，然后在35℃攪拌4小時。緩緩加入水，使反應(yīng)驟停，用乙醚提取該混合物。用水洗滌有機(jī)層，然后再用飽和氯化鈉溶液洗滌，硫酸鎂干燥，減壓蒸除溶劑。在室溫和氬氣下將剩余物溶于3毫升四氫呋喃，和0.34毫升0.1N的氫氧化鈉中。將該溶液迴流2小時，冷卻，緩緩加入0.1N的鹽酸調(diào)至pH4。用乙醚提取，并用0.01N的鹽酸和飽和氯化鈉溶液洗滌該提取液，用硫酸鎂干燥，減壓濃縮。得到的油狀物用中壓硅膠液相色譜法純化，洗脫劑為;己烷/乙酸乙酯1∶2，得到56.8毫克油狀的題目產(chǎn)物。質(zhì)子核磁共振，13C核磁共振，質(zhì)譜數(shù)據(jù)與所期產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
實(shí)例204-十七烷基-5-羥基-2(5H)-呋喃酮將相應(yīng)的5-甲氧基衍生物與濃鹽酸共熱，制得了題目化合物，收率為54%。質(zhì)子核磁共振譜，質(zhì)譜與所期產(chǎn)物結(jié)構(gòu)相符。
質(zhì)譜(FD)339(M++1)，338(M+)，336(M+-1)，321(M+-OH)實(shí)例21(Z)-4-(11-十六碳烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮按照實(shí)例1所述程序，由相應(yīng)的醛中間體以69.4%的收率制得了題目化合物，紅外光譜，質(zhì)子核磁共振譜，質(zhì)譜與所期產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)相符。
元素分析C20H34O3;
計(jì)算值C，74.49;H，10.63;
實(shí)測值C，74.28;H，10.44。
分子式Ⅰ化合物抑制磷脂酶A2，5-脂氧合酶及脂肪酸環(huán)氧化酶。因此這些化合物可用作抗炎劑，抗變應(yīng)劑和抗氣喘劑。下面的試驗(yàn)系統(tǒng)說明了本發(fā)明中的化合物的這些藥效作用。
5-脂氧合酶(5-LPO)的測定取數(shù)只體重為250-300克的豚鼠，腹腔注射10毫升2%的酪蛋白溶液。16-18小時后，在二氧化碳箱內(nèi)將豚鼠窒息致死。腹腔注入70毫升鹽水并從腹腔內(nèi)抽出40-50毫升液體。經(jīng)離心后，用無C++aHank平衡鹽水(HBSS)將細(xì)胞粒洗滌兩遍。
將細(xì)胞混懸于5毫升pH為7.1，含有1毫摩爾EDTA和0.1%明膠的磷酸鈉緩沖液中。一只豚鼠約可得20-30×107個細(xì)胞。細(xì)胞組份分析表明95%以上的細(xì)胞為多形核白細(xì)胞(PMNL)。
用裝有微探頭的350型Branson聲納器，調(diào)至3，通過5次1/2秒脈沖聲頻將該P(yáng)MNL混懸物粉碎。將聲頻粉碎物(soni-cates)合并，并在30，000×g離心10分鐘。上清液在-70℃冷凍保存待用。
酶活量是通過5-HETE的量來測定首先用試驗(yàn)化合物，1毫摩爾的CaCl2，2毫摩爾的ATP，及1毫摩爾GSH以及0.2毫升從PMNL聲頻粉碎物所得到的上清液在37℃培養(yǎng)5分鐘。然后用5微摩爾的14C標(biāo)記花生四烯酸處理，再在37℃培養(yǎng)10分鐘。然后加入10微升濃度為1摩爾的檸檬酸及10微升含有消炎痛和丁基烴茴香醚(BHA)各為20mg/ml的乙醇溶液來停止酶反應(yīng)。將該反應(yīng)混合物在硅膠板(Baker薄層層析板S1250-PA-19C)上點(diǎn)樣(50微升)，然后在乙酸乙酯/2，2，4-三甲基戊烷/冰乙酸/水(90∶50∶20∶100)的溶劑系統(tǒng)中進(jìn)行薄層層析。
將X光片放在薄層層析板上曝光1-2天后顯影可以具體地觀察到花生四烯酸及其代謝產(chǎn)物(5-HETE和LTB4)的放射活性。把與X光片上的點(diǎn)相應(yīng)的硅膠板上的點(diǎn)切下來可以定量測定所生成5-HETE的量，并以Isocap/300液閃計(jì)數(shù)器(Searle Analytic公司)測定其放射活性。
將每一濃度的試驗(yàn)化合物與對照實(shí)驗(yàn)(不加試驗(yàn)化合物)相比較來確定對5-HETE的產(chǎn)生的抑制百分率。濃度和抑制百分率在半對數(shù)紙上做點(diǎn)并用插值法確定抑制50%5-HETE形成(IC50)所需濃度。結(jié)果歸納于表1。
脂肪酸環(huán)氧化酶(FCO)測定用185個人體血小板袋(每個袋含有用差速離心程序制備的一品脫血液中的血小板)制得微粒體。同時用近60個袋制備了血小板。將含有大量血小板的血清(500克)在10000×g離心20分鐘，將血小板顆?；鞈矣?00毫升0.1摩爾pH為8.0的磷酸鉀緩沖液放在聚四氟乙烯勻漿器的瓣形杯里在冰水浴中用Bronson聲納器(350型)在聲頻粉碎5分鐘。將破裂的血小板在10000×g離心15分鐘。上清液在100，000×g再離心90分鐘，用25毫升濃度為20%的含有1.0%Triton x-100去污劑的蔗糖均化微粒化的血小板。在4℃，30分鐘后，將溶解了的微粒體在100，000×g離心60分鐘。取出黃色上清液并于-70℃保存。
將溶解的脂肪酸環(huán)氧化酶施于一個體積為440毫升的聚焦電冰柱(electrofousing column)(LKB-8012)，該柱含有1%的Phisolytes(Brinkman Instrumenti West-burgh，Ny)，pHZ-11，并在柱頂裝有負(fù)極。在適宜的時間，酶在柱上分層，使得其蔗糖濃度與柱梯度濃度相等。用手提蔗糖折射計(jì)定時地測定梯度濃度就可以完成這一測定。聚焦電泳經(jīng)16小時完成，所用的初始電壓為400伏，終止電壓為900-1000伏。分段收集(20毫升)并測定PGE2形成。收集活性峰部分，并用超濾(XM100A)濃縮至3-5毫升體積。
將由聚焦電泳而得的活性組份通過G-200 Sephadex柱(2cm×46cm)，用10毫摩爾，pH為7的磷酸鉀緩沖液洗脫，每5毫升收集。測定后，合并活性組份，用超濾(XM100A)濃縮至1毫升體積，并于-70℃冷凍保存。
酶活是通過檢測PGE2的形成來確定的，方法如下將酶和總體積為0.2毫升的10毫摩爾/升的磷酸咪唑緩沖液，PH＝8.0，2毫摩爾/升的腎上腺素，2毫摩爾/升的正鐵血紅蛋白，及試驗(yàn)化合物(30微克/毫升)的混合液在37℃預(yù)培養(yǎng)1分鐘，預(yù)培養(yǎng)后，加入濃度為5毫摩爾/升的14C-花生四烯酸，并將該混合物在37℃再培養(yǎng)0.5分鐘。通過加入20微升的消炎痛乙醇溶液(2毫克/毫升)來停止酶反應(yīng)。
將該反應(yīng)混合物在硅膠(LQ6D)板上點(diǎn)樣(50微升)，然后進(jìn)行薄層層析。溶劑系統(tǒng)為氯仿-甲醇-冰醋酸(90∶5∶5，V/V/V)，相對的代謝物為;PGF2d＝0.235，和PGE2＝0.47。以1厘米分段刮下板上的硅膠，并混懸于5毫升閃爍液中，〔即把5.88克2，5-二苯基噁唑和118毫克1，4-雙(5-苯基噁唑-2-)苯溶解于650毫升甲苯和350毫升Triton x-100中制得〕，并用Isocap/300液閃計(jì)數(shù)器(Searle Analytic，Inc.，Southfield，MI)測定其放射性。將另外50微升反應(yīng)混合物加入10毫升Triton x-100基底閃爍液中，測定其放射性，這樣就可以確定由薄層層析板回收的放射性量。與不加試驗(yàn)化合物的對照試驗(yàn)百分率相比較，確定相應(yīng)于每一試驗(yàn)化合物的PGE2生成量。表1的數(shù)據(jù)以濃度為30微克/毫升的試驗(yàn)化合物對形成PGE2的抑制百分率。
磷脂酶A2(PLA2)的測定檢測緩沖液含有10毫摩爾Tris-Hcl緩沖液，pH＝8.0，100毫摩爾NaCl，1毫摩爾的CaCl2及1毫克/毫升的牛血清清蛋白。在充氮條件下，在燒瓶中，將卵磷脂，L-α二棕櫚酰基-(2-棕櫚?；?1-14C)(該化合物由New Englard Nuc-lear提供)的甲苯-乙醇(1∶1V/V)溶液蒸干，加入檢測緩沖液使底物濃度為9.0×10-5摩爾的溶液(放射性比度＝27.7毫居里/毫摩爾)。在Bransonic220聲納浴中，將該混合物聲裂5分鐘。用檢測緩沖液稀釋胰磷脂酶A2(放射性比度＝600單位/毫克)使其酶濃度為0.1毫克/毫升。將30微克/毫升的試驗(yàn)化合物加到0.1毫升的這一酶溶液中，并將該混合物在37℃培養(yǎng)15分鐘。將0.1毫升含有底物的這一混合物加到酶溶液中以誘發(fā)酶反應(yīng)，并將反應(yīng)混合物在37℃進(jìn)一步培養(yǎng)30分鐘。加入20微升濃度為1摩爾的檸檬酸使反應(yīng)停止。
將50微升該混合物加到10毫升閃爍液中〔即將5.88克2，5-二苯基噁唑和118毫克1，4-雙〔(5-苯基噁唑-2-基)〕苯溶于650毫升甲苯和350毫升Triton X-100中制得)，并在Isocap/300液閃計(jì)數(shù)器中測定其放射性(Searle Analytic Inc.，Southfield，Michigan)。另取50微升混合液直接點(diǎn)在硅膠板(LK6D，Whatman.Clifton，N.J.)上，然后在一溶劑系統(tǒng)中進(jìn)行薄層層析;該溶劑系統(tǒng)為乙酸乙酯∶乙酸∶2，2，4三甲基戊烷∶水(90∶20∶50∶100，V/V/V)。以1厘米分段將板上的硅膠刮下，并混懸于5毫升Triton-X100基底閃爍液中，測定其放射性。卵磷脂停留在原點(diǎn)，而脂肪酸移至溶劑前沿下2-3厘米處。與不加試驗(yàn)化合物的空白實(shí)驗(yàn)中所形成的脂肪酸相比較從而計(jì)算出實(shí)驗(yàn)化合物中14C游離脂肪酸的形成百分率。表1所列的數(shù)據(jù)為試驗(yàn)化合物濃度為30微克/毫升時所形成14C游離脂肪酸的抑制百分率。
在大鼠體內(nèi)輔藥誘發(fā)關(guān)節(jié)炎試驗(yàn)本發(fā)明試驗(yàn)了化合物改變大鼠后爪腫脹和骨損傷的能力，這些病灶由輔藥誘發(fā)水腫形成。為了定量地說明對由輔藥誘發(fā)關(guān)節(jié)炎而引起的后爪水腫的抑制作用，將炎癥規(guī)定為兩種(1)原發(fā)性和繼發(fā)性充血型后爪，(2)繼發(fā)性非充血型后爪，這里癥狀一般從充血型爪中引入炎癥約11天開始形成。后一類型炎癥的減輕是免疫抑制活性的一種表現(xiàn)。參見Chang，Arth.Rheum.，第20卷，1135-1141(1977)。
輔藥關(guān)節(jié)炎的誘發(fā)方法是;取雄性LeWis-Wistar大鼠(200-210克)向右后爪內(nèi)單足底下注射0.1毫升0.5%的經(jīng)熱殺死的凍干結(jié)核分枝桿菌(Calbiochem-Perri gen-c)的礦物油混懸液(Winter等報道的改進(jìn)方法，Arth.Rheum.，第9卷，394-397(1966))。10只大鼠為一組(“TB對照”)只接受這一處理。另取5只大鼠為一組不受任何處理(正常對照)。將每一個待試化合物混懸于1%的羧甲基纖維素中，在大鼠身上(以5只為一組分組)腹腔注射給藥;具體方法是在注入輔藥后第二天開始，每天劑量是50毫克/公斤，連續(xù)給藥28天(共29次)。用Statham壓力轉(zhuǎn)換器和數(shù)字伏特計(jì)(digital voltmeter)通過汞置換法測定爪體積。在第16，18，21，23，25，28，30天測量注射的和未注射的后爪體積。在第30天將動物擊斃后照X光片。從第16天開始至第30天對未注射爪的爪體積測量結(jié)果對TB對照組，正常對照組，和給藥組進(jìn)行計(jì)算機(jī)繪圖，并確定曲線下面積〔(TB對照組減去正常對照組)和(給藥組減去正常對照組)〕。結(jié)果歸納于表Ⅱ。
表Ⅱ?qū)ξ醋⑸渥w積炎癥的抑制作用從第16至第30天化合物 劑量實(shí)例號毫克/公斤.I.P.×29 抑制百分率＊1 50 56.0%7 50 37.6%10 50 100.0%11 50 69.0%12 50 40.6%17 50 28.4%＊根據(jù)下列公式對第16，18，21，23，25，28，30天的平均未注射爪體積繪圖而得的曲線下面積(AUC)之差即為抑制百分率;
抑制百分率＝〔1- ((用藥組的AUC)-(正常對照AUC))/((TB對照AUC)-(正常對照AUC)) 〕×100肉眼觀察未注射爪的X光片可以看到;與TB對照相比較，用藥動物的骨損傷有十分明顯的抑制作用。與注射爪相比也可見到對骨損傷的實(shí)質(zhì)性抑制作用。
本發(fā)明化合物在鹿角萊(carrageenan)鼠爪水腫試驗(yàn)，膠原Ⅱ型關(guān)節(jié)炎試驗(yàn)，及延遲性過敏試驗(yàn)中也顯示出了活性。
本發(fā)明化合物可以通過各種途徑給藥，包括口服，直腸，經(jīng)皮，皮下，靜脈，肌注或鼻內(nèi)途徑。這些化合物通常是以藥物組方形式使用的。這些組方可以以本專業(yè)所熟知的方法制備，其中至少一個有效量的本發(fā)明化合物。因此，本發(fā)明涉及以活性成份，即分子式Ⅰ化合物與藥物上可以接受的載體共同組成的藥物組方。
在本發(fā)明組方的制備中，活性組份通常與載體混合，或用載體稀釋，或封閉在載體中，后者的形式可以是膠囊，小藥囊，紙片或其他容器。當(dāng)載體用作稀釋劑時，它可以是固體，半固體或液體材料，該載體起著賦形劑或活性組份媒介的作用。因此，組方可以是下述劑形片劑，小丸劑，粉劑，錠劑，小藥囊，扁囊劑，配劑，混懸劑，乳劑，溶液，糖漿劑，氣霧劑(以固體或在液體介質(zhì)中)，軟膏(例如含有高到10%(以重量)活性化合物)，軟和硬明膠膠囊，栓劑，無菌注射液或無菌包裝的粉劑。
適宜做載體，賦形劑，稀釋劑的一些實(shí)例有乳糖，
糖，蔗糖，山梨醇，甘露醇，淀粉，阿拉伯樹膠，磷酸鈣，藻酸鹽，黃蓍膠，明膠，硅酸鈣，微晶纖維素，聚乙烯吡咯烷酮，纖維素，水，糖漿，甲基纖維素，羥基苯甲酸甲酯和丙酯，滑石粉，硬脂酸鎂，礦物油。組方另外還包括潤滑劑，濕潤劑，乳化劑，混懸劑，防腐劑，甜化劑或調(diào)味劑。本發(fā)明中的組方可以用本專業(yè)熟知的方法格式化的配制，以便使患者用藥后活性組份迅速，持續(xù)或延緩釋放。
組方通常含有約1%到95%(重量)的本發(fā)明化合物作為活性成份，并最好以單位劑形格式化配制，每一劑形含有約0.5至約500毫克(更經(jīng)常為約1至300毫克)活性成份。所謂“單位劑形”是指對人和其他哺乳動物適用的單位劑量的物理分立單位，每一單位含有預(yù)先定量的活性物質(zhì)聯(lián)合適當(dāng)?shù)乃幬镙d體，這些活性物質(zhì)的量經(jīng)計(jì)算可以產(chǎn)生預(yù)期的療效。
活性化合物的有效劑量范圍很廣，每天的典型的劑量，正常情況下在約0.020至約300毫克/公斤體重范圍之內(nèi)。用于成人時，最好為0.020至50毫克/公斤，一次或分次給藥。然而，應(yīng)當(dāng)明白實(shí)際給藥量應(yīng)由醫(yī)生根據(jù)不同情況而定，如治療條件所選的給藥化合物，選的給藥途徑，年令，體重，各個患者的反應(yīng)，患者癥狀的嚴(yán)重性，因此，上述劑量范圍決不意味著對本發(fā)明的范圍有任何限制。
下列組方實(shí)例可以使用本發(fā)明中任何藥效化合物作為活性成份。這些實(shí)例僅僅是說明，而決不意味著對本發(fā)明的范圍有任何限制。
實(shí)例22用下列組分制備硬質(zhì)明膠膠囊含量(毫克/囊)5-羥基-4-〔12-(1-萘基氧基) 250十二烷基〕-2(5H)-呋喃酮干淀粉 200硬脂酸鎂 10上述組份混合后加滿硬質(zhì)明膠膠囊，每個膠囊460毫克。
實(shí)例23以下列組份制備片劑含量(毫克/片)(Z，Z)-4-(7，10-十六碳二烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮 250
纖維素，(微晶) 400二氧化硅〔霧狀(fumed)〕 10硬脂酸 5將上述成份混合，壓片，每片重665毫克。
實(shí)例24含有下列組份的氣霧劑溶液的制備含量%5-羥基-4-(4，8，12-三甲基- 0.253，7，11-十三碳三烯基)-2(5H)-呋喃酮乙醇 29.75氣流劑22 70.00(氯二氟甲烷)將活性化合物和乙醇混合再加到部分氣流劑22中，冷卻至-30℃，移至添充器內(nèi)。然后將所需量的上述混合物加到一不銹鋼容器內(nèi)，并用剩余氣流劑稀釋。最后在該容器上裝上噴霧閥。
實(shí)例25按下列方法制備每片含60毫克活性成份的片劑4-(18-二十碳烯基)-5-羥基- 60毫克2(5H)-呋喃酮淀粉 45毫克微晶纖維素 35毫克聚乙烯吡咯烷酮(10%水溶液) 4毫克羧甲基淀粉鈉 4.5毫克硬脂酸鎂 0.5毫克滑石粉 1.0毫克總量 150毫克將活性組份，淀粉，纖維素過No.45目u.s篩，并充分混合。此粉與聚乙烯吡咯烷酮溶液混合，然后過No.14目u.s篩。由此而成的顆粒在50-60℃干燥，過No.18目u.s篩。預(yù)先將羧甲基淀粉鈉，硬脂酸鎂，滑石粉過No.60目u.s篩，然后加到上述顆粒中，混合后在壓片機(jī)上壓片，每片含150毫克。
實(shí)例26按下列方法制備每個含80毫克治療成份的膠囊(Z，Z)-4-(7，10-十六碳二烯基)-5-羥基-2(5H)-呋喃酮 80毫克淀粉 59毫克微晶纖維素 59毫克硬脂酸鎂 2毫克總量 200毫克將活性組份，纖維素，淀粉，硬脂酸鎂混合，過No.45目u.s篩，裝滿硬質(zhì)明膠膠囊中，每囊200毫克量。
實(shí)例27按下列方法制備每個含225毫克活性成份的栓劑4-(7.14-十六碳二烯基)- 225毫克5-羥基-2(5H)-呋喃酮飽和脂肪酸甘油酯加至 2，000毫克將活性組份過No.60目u.s篩，混懸于預(yù)先以所需最低熱量熔化好的飽和脂肪酸甘油酯中。然后將該混合物倒入公稱為2克容積的栓模中，冷卻即得。
實(shí)例28每5毫升含有50毫克治療成份的混懸液按下述方法制備5-羥基-4-壬基-2(5H)-呋喃酮 50毫克羧甲基纖維素鈉 50毫克糖漿 1.25毫升苯甲酸溶液 0.1毫升增香劑 適量色素 適量純水加至 5毫升將治療組份過No.45目u.s篩，并與羧甲基纖維素鈉和糖漿混合成均勻糊狀物。用一些水稀釋苯甲酸溶液，香料，色素，加入上述糊漿攪拌，然后加水至所需體積。
實(shí)例29混合下列組份制成每克含100毫克活性成份的外用軟膏毫克/克軟膏5-羥基-4-(4，8，12-三甲基-3，7，11-十三碳三烯基) 100-2(5H)-呋喃酮聚乙二醇300(N.F) 600聚乙二醇4，000(u.s.P) 300
勘誤表 CPCH86628權(quán)利要求
1.制備分子式(Ⅰ)化合物的方法
式中R1為含有0-6個雙鍵或三鍵的C8-C24直鏈或支鏈單價烴基，或分子式為
的基團(tuán)，式中n為0或1，M為-CHO或-CH2OH；或?yàn)镽-alk-，其中alk為含有0-2個雙鍵或三鍵的C2-C12直鏈或支鏈單價烴基；R為萘基氧基或芐基氧基，該方法包括(a)分子式(Ⅳ)中的醛與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽的反應(yīng)，
R1定義同前，或(b)分子式(ⅩⅣ′)化合物的堿性水解
R1定義同前或(c)分子式(ⅩⅩ)化合物
(式中Z和Z′各自為甲基或乙基或一起構(gòu)成二-，三-，或四次甲基，n為1或2)經(jīng)酸性水解得到分子式(Ⅰ)化合物，式中R1為
或(d)分子式(Ⅰ)化合物(式中R1為
n為1或2)經(jīng)還原得到分子式(Ⅰ)化合物(式中R1為
2.權(quán)利要求
1所述方法其中分子式(Ⅳa)的醛
(式中R1a為C12-C16直鏈或支鏈單價烴基)與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽反應(yīng)得到分子式(Ⅰ)化合物，式中R1為R1a。
3.權(quán)利要求
1所述方法，其中分子式(Ⅳb)的醛
(式中R1b為一個C16直鏈或支鏈單價烴基)與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽反應(yīng)得到分子式(Ⅰ)化合物，式中R1為R1b。
4.權(quán)利要求
1所述方法，其中分子式(Ⅳc)的醛
(式中，R1c為(Z，Z)-7，10-十六碳二烯基)與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽反應(yīng)得到(Z，Z)-4-(7，10-十六碳二烯基)-5-烴基-2(5H)-呋喃酮。
5.權(quán)利要求
1所述方法，其中分子式(Ⅳd)的醛
(式中，R1d為4，8，10-三甲基-3，7，11-十三碳三烯基)與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽反應(yīng)，得到5-羥基-4-(4，8，12-三甲基-3，7，11-十三碳三烯基)-2(5H)呋喃酮。
6.權(quán)利要求
1所述方法，其中分子式(Ⅳe)醛
〔式中R1e為4-(2-萘基氧基)丁基〕與水合乙醛酸和嗎啉鹽酸鹽反應(yīng)，得到5-羥基-4-〔4-(2-萘基氧基)丁基〕-2(5H)呋喃酮。
7.由權(quán)利要求
1-6中任一要求所涉及的方法制備的分子式(Ⅰ)化合物。
專利摘要
分子式(I)呋喃酮衍生物抑制磷脂酶A式(I)中R式中n為0或1，M為-CHO或-CH
文檔編號C07D307/38GK86104450SQ86104450
公開日1986年12月31日 申請日期1986年6月30日
發(fā)明者羅莎納·邦朱克利安, 愛德華·戴維·朱赫利奇, 邁克爾·勒魯瓦·菲利普斯, 克里斯托弗·約翰·蒙塔古·米德 申請人:伊萊利利公司導(dǎo)出引文BiBTeX, EndNote, RefMan