專利名稱：海蘊熱水提取物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及狹果藻科海藻熱水提取物及其用途。更具體的，本發(fā)明涉及在胃腸道中吸收過量攝入的鈉離子以促進排泄由此進入糞便的作用極好的狹果藻科海藻熱水提取物；以及由此在食物和藥品上的應(yīng)用。
發(fā)明公開按照健康和福利省公布的國家營養(yǎng)調(diào)查結(jié)果，日本人自1975年每天攝入食鹽不低于11.5g，并且特別在1993年，日攝入食鹽量為12.8g。由于日攝入食鹽量與高血壓發(fā)病有關(guān)系，健康和福利部建議減少日攝入食鹽量到10g或更少以防止高血壓及其它，中風(fēng)等的發(fā)病。在美國，日攝入食鹽量已有類似限制并且美國聯(lián)合委員會推薦建議高血壓病人日攝入食鹽量必須控制在6g或更少。
據(jù)說食鹽的攝入量與胃癌致死率也有關(guān)聯(lián)。按照進一步得到的數(shù)據(jù)，在食鹽攝入量高的地區(qū)，例如，富山市或廣崎市，胃癌致死率高；另一方面，在食鹽攝入量小的地區(qū)，例如，別府市或沖繩市，胃癌致死率低。
據(jù)報道食物纖維如藻酸鹽有某種程度鈉吸收能力(日本家庭經(jīng)濟雜志，39卷，第3期，第187-195頁(1988))，但它的吸收能力仍不足。
過量食鹽攝入如此對人身體有不良影響。因此，強烈需要開發(fā)新技術(shù)以向體外排泄過量攝入的食鹽。
于是，本發(fā)明的主題就是提供向體外主動安全地排泄過量攝入的食鹽的成分，并且提供含有該成分的食物和藥品。
發(fā)明公開本發(fā)明人在食物材料的廣擴范圍中進行各種調(diào)查以發(fā)現(xiàn)有上述作用的成分。結(jié)果，發(fā)現(xiàn)狹果藻科海藻熱水提取物有極好的鈉離子吸收能力和排泄促進能力，并且可將其用于做食物或藥品。從而完成了本發(fā)明。
即是，本發(fā)明提供分子量不低于30,000的狹果藻科海藻熱水提取物；和包含熱水提取物的食物；鈉離子吸附劑，排泄促進劑和防止和治療由過度食鹽攝入誘導(dǎo)的疾病的藥劑，每種均含有有效成分的熱水提取物。
實現(xiàn)本發(fā)明的最佳方式本發(fā)明用的狹果藻科海藻是一種海藻且可作食物食用。狹果藻科海藻提取物已知有血脂降低作用(長原學(xué)園西九州大學(xué)，佐賀短期大學(xué)紀(jì)要，第25期，第171-173頁(1995))，但狹果藻科海藻熱水提取物的有效成分和結(jié)果提取物對鈉離子的作用是不知道的。
用在本發(fā)明中狹果藻科海藻的例子包括面條藻(Tinocladiacrassa)、海蘊(Nemacystus decipieus)、Cladosiphon okamura nus。從狹果藻科海藻獲得提取物，例如，用60至100℃熱水，優(yōu)選80到90℃，30分鐘到3小時，更優(yōu)選約1小時提取，然后用透析移走低分子量物質(zhì)。產(chǎn)生的熱水提取物可以就這樣用或如果需要，經(jīng)過乙醇沉淀、離子交換樹脂層析，或凝膠濾過層析而純化。
產(chǎn)生的熱水提取物優(yōu)選的生理特征如下(1)平均分子量50,000到500,000(2)中性糖含量50％到90％(3)硫含量3％到17％由于熱水提取物的主要成分是糖鏈，認為在這里含有巖藻聚糖。然而，在下面的測試例中顯示，本發(fā)明的熱水提取物比純化甚至約100％的巖藻聚糖有更顯著地極好的鈉離子吸收能力。從而，有巖藻聚糖之外的物質(zhì)包括在本發(fā)明的熱水提取物中，并且，這種物質(zhì)增強鈉離子的吸收能力。
本發(fā)明的熱水提取物有鈉離子吸收能力。特別地，當(dāng)口服時，他有在胃腸道中吸收鈉離子而促進其排泄的作用。于是，它用作藥品或食物以防止和治療各種由過量攝入食鹽而引起的疾病，例如，高血壓，胃癌和中風(fēng)。
含有本發(fā)明的熱水提取物的食物或藥品能用傳統(tǒng)方法將上述步驟獲得的狹果藻科海藻的熱水提取物加工制備成各種形式。形式的實例包括固體，液體、乳化和膠狀形式。
作為藥品形式實例包括片劑、粉末、顆粒體、微粒和液體。這些制劑可以通過和在傳統(tǒng)方法中藥用載體一起處理本發(fā)明的熱水提取物而制備。
按照本發(fā)明，食物的實例包括可食食物沒有任何處理，可食食物經(jīng)過烹調(diào)或其他相似過程，和預(yù)先混合作為食物產(chǎn)品的材料。固體食物可以是任何固體、粉末和顆粒形式，如各種甜食(餅干、小甜餅干、蛋糕、馬鈴薯片和米餅干等)，面包、和粉末飲料(咖啡飲料粉末和可可飲料粉末等)。液體、乳化和膠狀形式食物實例包括各種飲料，如果汁，碳酸飲料、和乳桿菌飲料，其中，本發(fā)明中飲料較合適。
按照本發(fā)明約1g狹果藻科海藻熱水提取物能吸收約150mg食鹽?；谏厦娴膬r值用狹果藻科海藻計算的結(jié)果，較適合的是每天攝入約10到20g的狹果藻科海藻熱水提取物。
實施例為了更具體說明本發(fā)明，將在實例中描述按照本發(fā)明從狹果藻科海藻獲得熱水提取物的步驟和含有這種熱水提取物的藥品和食物的生產(chǎn)步驟，并且在這些實例中得到的狹果藻科海藻熱水提取物用于測試實例也將描述。然而，本發(fā)明并不限于這些。
實施例1來自伊勢-志摩可食海蘊用作粗海藻。用水洗去海蘊表面的不純附著物。水通過篩子移去，稱252g濕海蘊用于提取。用紅外加熱型濕度表測量濕海蘊的水含量，結(jié)果為95.4％。在韋林氏攪拌器中，252g海蘊和1200ml水一起粉碎。產(chǎn)生的溶液保持90℃1小時作熱水提取處理。產(chǎn)生的溶液冷卻到室溫且離心(15000G,10min)以移走不溶物。上清液轉(zhuǎn)移到纖維素制的透淅管中且用離子交換水透淅移去分子量為10,000或更小的低分子量物質(zhì)。透淅的溶液再離心(15000G,10min)以徹底移去不溶物。上清液冷凍干燥，得到2g海蘊熱水提取物。
(1)分子量的測定使用液相層析泵(“CCCP”由TOSOH公司生產(chǎn))，凝膠濾過柱(“TSK凝膠GM-PWXL”由TOSOH公司生產(chǎn))示差折光儀(“RI-410”由Waters公司生產(chǎn))和脫氣裝置(“SD-8022”，由TOSOH公司生產(chǎn))。0.1 M的氯化鈉水溶液為流動相，溫度40℃和流速0.8ml/min測分子量。保留時間比較標(biāo)準(zhǔn)的出芽短梗霉聚糖(Pullulan)樣品(由昭和電工株式會社生產(chǎn))和用層析積分儀計算平均分子量重(積分儀21由TOSOH公司生產(chǎn))。
海蘊熱水提取物在上述條件測量，平均分子量為50,000到500,000。
(2)中性糖含量測定使用試劑，(a)濃硫酸(試劑等級最高質(zhì)量)和(b)5％的苯酚水溶液(新鮮不為黃色)。巖藻糖(試劑級別最高質(zhì)量)溶于純水以得到精確地濃度為20μg到600μg/ml的溶液。從這些，5種不同濃度的溶液可選擇。在試管中，5種溶液每個裝0.5ml和加上上述試劑(b)0.5ml。產(chǎn)生的混合物完全攪拌。然后，反應(yīng)混合液，加上述試劑(a)2.5ml，隨后攪拌。反應(yīng)混合液室溫放置15分鐘，用吸收分光光度計在480nm處測吸收。中性糖的標(biāo)準(zhǔn)曲線和480nm的吸收度就可制出了。然后，準(zhǔn)確稱量海蘊的上述提取物150μg且溶于10ml的純水。在試管中，加0.5ml所得溶液，并且加上0.5ml試劑(b)。產(chǎn)生混合液充分攪拌。向反應(yīng)混合液中加2.5ml試劑(a)，并且攪拌所得溶液。讓反應(yīng)混合液在室溫放置15分鐘后，用吸收分光光度計在480nm處測吸收。從進一步制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線，中性糖濃度就可算出。關(guān)于用于中性糖含量測定的樣品，其水的含量由紅外濕度表算出，且糖含量經(jīng)重量對比后分析。
在上述方法中測量的海蘊熱水提取物中性糖含量為50％到90％。
(3)硫含量的測定海蘊熱水提取物中硫含量通過燃燒分析，由此樣品在氧氣中氧化和通過沉淀滴定法決定產(chǎn)生的硫氧化物。這方法根據(jù)JISK-0103實施。硫含量定義為(硫重/樣品重)×100。
上述方法測量海蘊熱水提取物硫含量為3％到17％。
實施例2細粒的制備70重量份實施例1制備的本發(fā)明的海蘊熱水提取物，20重量份乳糖和10重量份玉米淀粉組成混合物置于流化床和5％的羥丙基甲基纖維素形成顆粒從而得到細粒。
實施例3餅干的制備在下例子中，“份”是指重量。
對混合物由8份使面粉松脆的油脂和18份糖，42份軟面粉，7.2份由在實施例1中得到的本發(fā)明海蘊熱水提取物，0.8份發(fā)酵粉，16份雞蛋，1份葡萄糖和25份水相加，通過攪拌得到一個生面團。生面團壓到5mm厚且切成片，每片重16到17g。片在90℃的爐上烤32到36分鐘得到約為12g重餅干。根據(jù)計算，12g重的餅干含有1g熱水的海蘊提取物。即，當(dāng)攝入時，這片餅干能吸收約60mg鈉離子(約150mg食鹽)。
實施例4飲料的制備裝有12.5g顆粒狀糖，0.2g檸檬酸晶體，1g在實施例1中得到本發(fā)明的海蘊熱水提取物和平衡的離子交換水加到總量100ml的瓶子，且在80℃滅菌10分鐘，得到含有海蘊提取物的飲料。
測試例1(1)食鹽溶液的制備Na,K和Ca各自在小腸液中濃度為119,4.2和4(mEq/L)。對于日本人每天平均離子吸收，Na,K和Ca各為5072,2700和541毫克。分三頓飯每餐得結(jié)果分別為1691,900和180.3mg。
如果飯后在胃和十二指腸中水含量各為0.75L和0.5L,Na,K和Ca的食鹽濃度各為58.8,18.5和7.2。當(dāng)上述食鹽濃度加到小腸里，最后的食鹽溶液Na,K和Ca各在小腸里的濃度成為89,11.4和5.6mM。
(2)巖藻聚糖鈣鹽的制備在含有500ml D.W.的1L燒杯中，填料1.0g巖藻聚糖(由Sigma化學(xué)公司生產(chǎn))，用攪拌器攪拌，且完全溶解。在所得溶液中，加入10.0g的二水氯化鈣(片山化學(xué)公司生產(chǎn))且得到的混合液攪拌，且完全溶解。讓反應(yīng)混合液放置2小時以完成巖藻聚糖鈣鹽化反應(yīng)。從產(chǎn)生的糖溶液，產(chǎn)生的鹽通過纖維素透析膜(直徑3.5mm，由Sanko Junyaku有限公司生產(chǎn))移去，且冷凍干燥以獲得1.042g的巖藻聚糖Ca鹽。
(3)Na離子鍵程度測定在上面(1)中制備的鹽溶液50ml加入幾滴濃鹽酸以調(diào)pH為1.2。在產(chǎn)生的溶液里，溶1g在實施例1中獲得的本發(fā)明的海蘊熱水提取物，和對照物1g巖藻聚糖鈣鹽和1g藻酸鈣(“由Nisshinbo工業(yè)公司生產(chǎn)，商品名為“Flavikafine”。)攪拌，得到的溶液室溫放置60分鐘。在反應(yīng)混合液中，加入幾滴濃氫氧化鈉水溶液以調(diào)pH到8.0。攪拌，反應(yīng)混合液放室溫中60分鐘。然后，每種離子交換樹脂通過含有一個截斷分子量為5,000的超濾膜移去。在濾液中的離子濃度由原子吸收分析決定。
(4)結(jié)果作為對照物的巖藻聚糖鈣鹽，吸收鈉離子16.37(mg/g樹脂)。藻酸鈣也作為對照物，吸收鈉離子34.5(mg/樹脂g)。
另一方面，本發(fā)明海蘊熱水提取物吸收鈉離子49.87(mg/g樹脂)且比對照物表現(xiàn)更高的吸收能力。
測試例2實驗動物用5周齡的雄大鼠(日本查里江)。經(jīng)過用商用固體食物(“CRF1”，東方發(fā)酵有限公司)初步喂養(yǎng)5天，大鼠轉(zhuǎn)入代謝籠。他們用粉末食物CRF1初步喂。然后，稱重和根據(jù)測得重量分組(n=5)且以在初期飼喂攝入量為指標(biāo)。海蘊的粗提物作測試藥且他們用含有下面表1顯示的組分的測試藥喂7天。相同的，纖維素(“纖維素粉”商品名；由東方發(fā)酵有限公司生產(chǎn))作負對照和鈣藻酸鹽(商品名“Flavikafine”，由Nisshinbo工業(yè)公司生產(chǎn))作正對照用在實驗中。在實驗中，每天測量食物攝入和水的攝入。從用含有測試藥食物喂后第3天起，每24小時收集糞便，共40天以供在Na的測量中用。
經(jīng)過方差分析，測量的每組值用Tukey-Kramer方法檢驗且顯著差異設(shè)定在P＜0.01。
表1食物的組分(％)

*1 ATN-76維生素混合物(含有二酒石酸膽堿)*2 ATN-76礦物質(zhì)混合物表2每種測試藥物的礦物含量(mg/100g)

結(jié)果測量3在糞便中鈉排泄總量和鈉攝入總量的比率(以后稱為“排泄率”)。結(jié)果，本發(fā)明的海蘊粗提物組鈉的排泄率(10.1％)顯著高于纖維素組(0.4％)或藻酸鈣鹽組(1.4％)。
產(chǎn)業(yè)應(yīng)用性狹果藻科海藻的熱水提取物在胃腸道吸收鈉離子且促進他們的排泄，因此含有該提取物的食物或藥品可用來防止或治療由過量攝入食鹽而引起的疾病。
權(quán)利要求
1．狹果藻科海藻的熱水提取物，其中熱水提取物分子量至少是30,000。
2．權(quán)利要求1的狹果藻科海藻熱水提取物，其平均分子量為50,000到500,000而中性糖含量是50％到90％。
3．權(quán)利要求1的狹果藻科海藻熱水提取物，其平均分子量為50,000到500,000，中性糖含量為50％到90％且硫含量為3到17％。
4．一種食物，包括權(quán)利要求1～3任一項的狹果藻科海藻熱水提取物。
5．鈉離子吸收劑，包括作為有效成分的權(quán)利要求1到3任一項的狹果藻科海藻的熱水提取物。
6．鈉離子排泄促進劑，包括作為有效成分的權(quán)利要求1到3任何一項的狹果藻科海藻熱水提取物。
7．一種防止或治療由過量攝入食鹽而引起的疾病的藥劑，包括作為有效成分的權(quán)利要求1到3任何一項的狹果藻科海藻的熱水提取物。
全文摘要
分子量不低于30,000的海蘊熱水提取物在消化道中吸收鈉離子并促進排泄,且由此,含有相同成分的食物和藥品可用于預(yù)防和治療由過量攝入食鹽而引起的疾病。
文檔編號C08B37/00GK1228786SQ97197418
公開日1999年9月15日 申請日期1997年6月24日 優(yōu)先權(quán)日1996年7月1日
發(fā)明者佐藤貴哉, 上原勉, 山岡一平, 淺木幸造, 郡英明 申請人:株式會社大塚制藥工場, 日清紡績株式會社