專利名稱：在其結(jié)構(gòu)中具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、其制備方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在其結(jié)構(gòu)中具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的新型化合物、制備該化合物的方法、含有該化合物的藥物組合物以及在其側(cè)鏈結(jié)構(gòu)中具有該化合物的聚合物、使用它們生產(chǎn)的模塑制品以及使用模塑制品作為組分生產(chǎn)的人造器官、醫(yī)學(xué)裝置和細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備。
背景技術(shù)：
近年來，血栓形成在西方國家和日本已經(jīng)成為死亡的主要原因之一。它是超過癌癥的死亡的主要原因，如果該原因包括動(dòng)脈疾病如心肌梗塞和大腦梗塞的話。在血栓形成中涉及各種因素，且血管損傷如動(dòng)脈硬化通常構(gòu)成血栓形成的基礎(chǔ)。血管內(nèi)皮細(xì)胞使正常的血管具有高抗血栓形成性。然而，血小板在血管損傷的位置如動(dòng)脈硬化的病灶處附著于活化的血管內(nèi)皮細(xì)胞上，或附著于因損傷而暴露的血管內(nèi)皮下組織上，因而趨于形成病理性血栓。作為抑制病理性血栓形成的藥物，用于抑制血小板的附著或聚集的藥物，即“抗血小板藥”已經(jīng)引起人們的注意，且已經(jīng)廣泛用于臨床?？寡“逅幍臍v史相對(duì)較短，且期望開發(fā)更好的這類藥物。
如上所述，血管內(nèi)皮細(xì)胞使正常的血管具有高抗血栓形成性。血管內(nèi)皮細(xì)胞的作用將更詳細(xì)討論。血管內(nèi)皮細(xì)胞是一類單層細(xì)胞，其連續(xù)覆蓋全身的血管腔。正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞起著寬范圍的作用，如①抑制血管通透，②血管腔的抗血栓形成，③調(diào)節(jié)血管平滑肌的松弛和收縮，和④控制血管壁細(xì)胞的游移或生長(zhǎng)。因此，血管內(nèi)皮細(xì)胞據(jù)說在維持血管呈原樣上具有核心作用。
據(jù)說人隨血管老化而老化，且血管壁隨老化而損傷。當(dāng)血管壁損傷和破裂時(shí)，血管的破裂表現(xiàn)為心血管疾病，如心肌梗塞、主動(dòng)脈瘤、大腦出血或壞死。血管壁破裂的最主要原因是動(dòng)脈硬化。
目前治療或預(yù)防動(dòng)脈硬化的絕大多數(shù)方法集中于改進(jìn)脂質(zhì)代謝，且通常將抗血脂藥用作藥物。給予的其他藥物是在動(dòng)脈硬化的部位防止血管阻塞的抗血小板藥或抗凝藥。然而，這些藥物不能可靠地治療血管壁的破裂。它們被預(yù)期通過抑制為破裂的原因的高脂血癥或?yàn)槠屏寻l(fā)展的原因的血栓形成而具有預(yù)防破裂發(fā)展的間接作用。
對(duì)于動(dòng)脈硬化的產(chǎn)生或發(fā)展，血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷或功能喪失被認(rèn)為是重要且比不可少的。如前所述，對(duì)于常規(guī)的治療，只有機(jī)體的修復(fù)功能一直依賴于血管破裂的主要原因的消除，這是最重要的治療方法，即血管內(nèi)皮細(xì)胞的再生和機(jī)能恢復(fù)。因此，“血管內(nèi)皮再生治療”-一種促進(jìn)已經(jīng)損傷且失去其固有機(jī)能的血管內(nèi)皮細(xì)胞的再生和機(jī)能恢復(fù)的治療-據(jù)信是非常有用的治療，能克服常規(guī)治療的缺點(diǎn)。然而，可用于血管內(nèi)皮再生治療的藥物一直還未投入實(shí)際使用，且需要高質(zhì)量藥物的開發(fā)。血管內(nèi)皮再生治療的一個(gè)實(shí)例由一個(gè)研究報(bào)告(Asahara,T.等，循環(huán)(Circulation),94,3291,1996)提供，在該研究中，在試驗(yàn)損傷的兔的血管內(nèi)皮損傷部位引入血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的基因，以表達(dá)VEGF，且研究了其效力。
經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀血管成形術(shù)(PTCA)是一種使插入血管中的氣囊導(dǎo)管膨脹以使因動(dòng)脈硬化的發(fā)展而形成的狹窄部位擴(kuò)張的方法(即氣脹術(shù))。該方法是冠狀動(dòng)脈硬化的已知治療方法之一。然而，在手術(shù)6個(gè)月后，在30-50％患者中發(fā)現(xiàn)再狹窄，因此該方法存在大的問題。再狹窄據(jù)說是一種由氣脹術(shù)引起的動(dòng)脈硬化，且發(fā)展迅速。除了氣脹術(shù)的工具和對(duì)導(dǎo)管的改進(jìn)外，至今已經(jīng)嘗試了使用各種藥物進(jìn)行的治療。它們?nèi)圆怀浞?，且希望開發(fā)較好的治療方法和藥物。血管內(nèi)皮再生治療可以有效預(yù)防PTCA后再狹窄(參見Asahara等的報(bào)告)，且希望開發(fā)用于該治療的優(yōu)異藥物。
局部缺血疾病如心肌梗塞的預(yù)測(cè)受許多因素影響，且側(cè)副管發(fā)展的程度已被認(rèn)為是預(yù)測(cè)的最重要的決定性因素之一。在充分發(fā)展的側(cè)副管的存在下，甚至如果發(fā)生狹窄或阻塞(梗塞)，組織的局部缺血或壞死被抑制，并且梗塞尺寸的減小和對(duì)預(yù)測(cè)的改進(jìn)均可達(dá)到。作為側(cè)副管形成的機(jī)理，一直強(qiáng)調(diào)血管內(nèi)壓和血流的變化。然而，曾報(bào)道在側(cè)副管形成過程中在血管內(nèi)皮細(xì)胞或血管平滑肌細(xì)胞中觀察到伴有DNA合成的細(xì)胞分裂圖象。應(yīng)理解的是側(cè)副管形成的過程不能簡(jiǎn)單地認(rèn)為是現(xiàn)有的吻合血管因物理因素而擴(kuò)張，但該過程的至少一部分是涉及構(gòu)成血管壁的細(xì)胞生長(zhǎng)的新血管形成。近年來，已有人嘗試用稱為“血管生成治療法”的新治療法來治療缺血性心臟病(例如，Yanagisawa-Miwa,A.等，《科學(xué)》，257,1401,1992)。血管生成治療法試圖促進(jìn)缺血組織周圍的血管生成，從而主動(dòng)固定側(cè)副管并保護(hù)缺血組織。它是一種可以稱為“藥理分流治療法”的新治療法。然而，該治療法一直未投入實(shí)際使用，且希望開發(fā)可用于該法的優(yōu)異藥物和治療方法。也曾嘗試?yán)醚苌缮L(zhǎng)因子(如成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)來治療創(chuàng)傷(例如參見Hockel,M.等，Arch.Surg.,128,423,1993)。
人造器官被設(shè)計(jì)用于通過使用人造材料的模塑制品或使用它們作為組分的裝置補(bǔ)充或替換各種活組織和器官如心臟、血管、心臟瓣膜、肺、胰、腎、肝、皮膚和粘膜的機(jī)能。人造器官在植入體內(nèi)時(shí)或與通過在血管中插入套管而取出的血液接觸時(shí)發(fā)揮其功能。因此，用于它的材料必須具有可用性而不對(duì)人體造成傷害，即生物相容性。限定人造器官的生物相容性的最重要體內(nèi)反應(yīng)是血栓形式反應(yīng)。
血小板附著和聚集是參與血栓形成反應(yīng)的重要生物反應(yīng)，與凝血蛋白的活化并列。這些反應(yīng)提供正常的體內(nèi)防御系統(tǒng)必需的止血功能。還有一種可能性是當(dāng)血液與人造器官接觸時(shí)，發(fā)生血小板附著和聚集所介導(dǎo)的血栓形成。在血栓形成時(shí)，人造器官不能發(fā)揮其因有功能。為了避免諸如血栓形成的缺點(diǎn)，曾嘗試開發(fā)既不引起血小板附著也不引起其聚集的材料，即抗血栓形成材料。已進(jìn)行了各種研究，但材料的研究仍不令人滿意。希望開發(fā)出優(yōu)異人造器官的開發(fā)所必需的較好抗血栓形成材料。
為了避免血栓形成，已嘗試開發(fā)在與血液接觸時(shí)不引起血栓形成的材料，即抗血栓形成材料。在體內(nèi)直接接觸血液的是構(gòu)成血管內(nèi)皮的血管內(nèi)皮細(xì)胞，且在正常的血管內(nèi)皮細(xì)胞上無血栓形成。當(dāng)然，最好的抗血栓形成材料是血管內(nèi)皮細(xì)胞，它是天然的抗血栓形成材料。若與血液接觸的人造器官表面象完整器官一樣用血管內(nèi)皮細(xì)胞涂敷，則不發(fā)生血栓形成反應(yīng)。作為積極利用血管內(nèi)皮細(xì)胞的抗血栓形成性能開發(fā)人造器官的嘗試，已試圖在臨床上應(yīng)用新生緊密愈合促進(jìn)人造血管等，得到了一些成功結(jié)果(例如，Noishiki,Y.等，Trans.Am.Soc.,Artif.Intern.Organs.,27,309,1986)。已經(jīng)采取的方法如使用嗜細(xì)胞材料以及增加模塑制品的孔隙率以促進(jìn)細(xì)胞穿入。然而，很少有人嘗試通過使用促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的物質(zhì)來促進(jìn)用該細(xì)胞的涂敷。
除了人造器官外，具有接觸血液機(jī)會(huì)的醫(yī)學(xué)裝置理想的是應(yīng)使用抗血栓形成材料，因?yàn)槿羝渑c血液的接觸引起血小板附著和聚集則是不利的。由于這些原因，希望開發(fā)較好的抗血栓形成材料。
此外，具有促進(jìn)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用的物質(zhì)可用作細(xì)胞培養(yǎng)組合物或細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備的材料。
發(fā)明公開從上述描述可以清楚地看出，醫(yī)學(xué)實(shí)踐中的一個(gè)重要挑戰(zhàn)是提供優(yōu)異的抗血栓形成藥和優(yōu)異的抗血栓形成材料。
此外，細(xì)胞生物學(xué)中醫(yī)學(xué)實(shí)踐和試驗(yàn)的一個(gè)重要挑戰(zhàn)是提供優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)物質(zhì)和具有血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)活性的優(yōu)異高分子物質(zhì)。
為滿足這些挑戰(zhàn)，本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行了廣泛的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物具有優(yōu)異的血小板附著/聚集抑制作用。他們還發(fā)現(xiàn)以這些化合物作側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物具有優(yōu)異的血小板附著抑制作用。這些發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致他們完成了本發(fā)明。
本發(fā)明的發(fā)明人還發(fā)現(xiàn)，通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用和優(yōu)異的血管生成促進(jìn)作用。他們還發(fā)現(xiàn)以這些化合物作側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的離分子物質(zhì)具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。這些發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致他們完成了本發(fā)明。
也就是說，本發(fā)明提供了在其結(jié)構(gòu)中具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的下述通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物。
本發(fā)明還提供了一種制備通式(1)的化合物的方法，其特征在于包括解聚透明質(zhì)酸(hyaluronan)或其鹽的步驟。
本發(fā)明還提供了一種含有至少一種通式(1)化合物作為活性成分的藥物組合物。該藥物組合物可以用于治療和預(yù)防血栓形成的藥物、治療和預(yù)防心血管疾病的藥物、治療和預(yù)防腦血管疾病的藥物以及治療和預(yù)防外周血管疾病的藥物。
本發(fā)明還提供一種含有至少一種通式(1)化合物作為活性成分的抗血小板藥。
本發(fā)明還提供一種含有通式(1)的化合物作為活性成分的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑。該血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑可用作血管內(nèi)皮再生治療的治療或預(yù)防藥或血管生成治療的治療或預(yù)防藥。
本發(fā)明還提供具有至少一種通式(1)化合物作為側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物。
本發(fā)明還提供含有至少一種通式(1)化合物或上述聚合物作活性成分的涂敷劑。
本發(fā)明還提供使用至少一種聚合物作材料的模塑制品。
本發(fā)明還提供使用至少一種涂敷劑生產(chǎn)的模塑制品。
本發(fā)明還提供使用至少一種模塑制品作組分的人造器官。
本發(fā)明還提供使用至少一種模塑制品作組分的醫(yī)學(xué)裝置。
本發(fā)明還提供一種含有聚合物作活性成分的細(xì)胞培養(yǎng)組合物。
本發(fā)明還提供一種使用模塑制品和/或涂敷劑生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備。
實(shí)施本發(fā)明的最佳方式 本發(fā)明的化合物是在其結(jié)構(gòu)中具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的如下通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物。式(1) 其中R1表示保護(hù)性基團(tuán)，或下式(2)-(5)中的任一個(gè)，其中R10表示氫原子、保護(hù)性基團(tuán)、或下式(6)-(8)中的任一個(gè)，且R11表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，條件是當(dāng)R10和R11各自為氫原子或保護(hù)性基團(tuán)時(shí)，R1可以相對(duì)于COOR4以反式或順式鍵合，式(2)-OR10式(3)-NHR11式(4)-CH2R11式(5)-SR11式(6) 式(7) 式(8) 或當(dāng)R10為式(6)-(8)中的任一個(gè)時(shí)，在式(6)-(8)中的R12-R28，除R13,R17和R26外，是相同或不同的且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，且R13,R17和R26各自表示疊氮基或下式(9)式(9)-NR29R30其中R29和R30是相同或不同的，且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，R2-R8是相同或不同的，且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，R9表示氫原子保護(hù)性基團(tuán)或下式(10)或(11)式(10) 式(11) 其中R31-R37是相同或不同的，且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，以及n表示0-25的整數(shù)，條件是當(dāng)n為0時(shí)，R1為式(2)的基團(tuán)，R10為式(8)的基團(tuán)，且R9為式(10)或(11)的基團(tuán)，條件是在式(1),(6)-(8)和(10)-(11)中，保護(hù)性基團(tuán)是相同或不同的，且各自表示具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈烷基、具有2-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈鏈烯基、具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的酰基、任選被取代的芳族?；蛉芜x被取代的芳族烷基，除R13,R17和R26外，作為R2-R37的保護(hù)性基團(tuán)中的任何兩個(gè)可以一起形成具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的亞烷基、具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的環(huán)狀亞烷基、任選被取代的亞芐基或任選被取代的鄰苯二甲?；?，和當(dāng)n為2或更大時(shí)，R2-R8在各重復(fù)單元中可以是相同或不同的。
也就是說，式(1)所示的本發(fā)明化合物具有包含式(12)的D-葡糖胺衍生物和鍵合在一起的式(13)的D-葡糖醛酸衍生物的結(jié)構(gòu)。式(12) 其中R38-R43各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)。式(13) 其中R44表示羥基或保護(hù)性基團(tuán)，且R45-R48各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)。
在式(1)中，n表示0-25的整數(shù)，且當(dāng)n為0時(shí)，R1為式(2)的基團(tuán)，R10為式(8)的基團(tuán)且R9為式(10)或(11)的基團(tuán)。也就是說，式(1)的化合物由下式(14)或(15)表示。式(14) 式(15) 本文中的保護(hù)性基團(tuán)指包括Theodra W.Green“有機(jī)合成中的保護(hù)性基團(tuán)”，第二版，1991中所示的各種保護(hù)性基團(tuán)的那些。
示于式(1)-(11)中的保護(hù)性基團(tuán)如下具有1-8個(gè)碳原子的任選取代的直鏈或支鏈烷基的實(shí)例是甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、叔丁基、戊基、辛基、甲氧基甲基、叔丁基硫代甲基、1-乙氧基乙基、甲硅烷氧基甲基和2-甲氧乙氧基甲基。具有2-8個(gè)碳原子的任選取代的直鏈或支鏈鏈烯基的實(shí)例是乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、丁烯基和辛烯基。具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈酰基的實(shí)例是甲醛基、乙?；?、丙酰基、丁?；⑽祯；蛐挛祯；?，以及鹵代酰基，鹵代?；膶?shí)例是氯乙?；?、二氯乙?；?、三氯乙?；腿阴；?。任選被取代的芳族酰基的實(shí)例是苯甲?；蛯?duì)氯苯甲酰基。任選被取代的芳族烷基的實(shí)例是任選被取代的芐基、任選被取代的二苯基甲基或任選被取代的三苯基甲基，任選被取代的芐基實(shí)例是4-甲氧芐基。就式(1)-(11)中所示的保護(hù)性基團(tuán)而言，除R13、R17和R26外，作為R2-R37的保護(hù)性基團(tuán)中任何兩個(gè)可一起形成一個(gè)保護(hù)性基團(tuán)，即具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的亞烷基、具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的環(huán)狀亞烷基、任選被取代的亞芐基或任選被取代的鄰苯二甲酰基。具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的亞烷基實(shí)例是亞丙基、亞丁基和亞辛基。具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的環(huán)狀亞烷基實(shí)例是亞環(huán)戊基、亞環(huán)己基和亞環(huán)庚基。其他實(shí)例是任選被取代的亞芐基和任選被取代的鄰苯二甲?；Ｗ鳛榱u基的保護(hù)性基團(tuán)優(yōu)選具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈?；?，任選被取代的芳族烷基、具有2個(gè)或更多碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈鏈烯基或任選被取代的亞芐基。更優(yōu)選乙?；?、芐基、1-丙烯基或亞芐基。作為氨基的保護(hù)性基團(tuán)優(yōu)選具有1個(gè)或多個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈酰基或任選被取代的鄰苯二甲?；?。更優(yōu)選乙?；蜞彵蕉柞；?。作為羧基的保護(hù)性基團(tuán)的優(yōu)選具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈烷基或任選被取代的芳族烷基。更優(yōu)選甲氧基、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、異丁基、戊基、異戊基或二苯基甲基。上述保護(hù)性基團(tuán)在相同化合物中可以是相同或不同的且可任意選擇。
在式(1)中，n為0-25的整數(shù)，優(yōu)選0-10，特別優(yōu)選0-5。
R9可以與前述描述一致，且優(yōu)選式(11)。也就是說，式(1)化合物優(yōu)選下式(16)。式(16) 此時(shí)，更優(yōu)選在式(11)存在下，R1為式(6)-(8)中任一個(gè)，即式(1)化合物可以是下式(17)-(19)中任一個(gè)。式(17) 式(18) 式(19)
此外，在式(17)-(19)中，特別優(yōu)選R13、R17和R26為式(9)。
本發(fā)明化合物具有兩類不同的作用，(A)血小板附著/聚集抑制作用和(B)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用和血管生成促進(jìn)作用。當(dāng)化合物用于目的(B)時(shí)，特別優(yōu)選式(16)化合物。
可藥用鹽這里指當(dāng)本發(fā)明化合物以治療必需量給藥時(shí)對(duì)人體無不利影響的鹽，或本發(fā)明化合物轉(zhuǎn)化為鹽形式時(shí)不會(huì)損害其有效藥理性質(zhì)的鹽。此類鹽的實(shí)例是堿金屬或堿土金屬的鹽，如鈉鹽、鉀鹽和鈣鹽；氫鹵酸鹽，如氫氟酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽和氫碘酸鹽；低級(jí)烷基磺酸鹽，如甲磺酸鹽、三氟甲磺酸鹽和乙磺酸鹽，芳基磺酸鹽，如苯磺酸鹽和對(duì)甲苯磺酸鹽；有機(jī)酸鹽，如富馬酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽和馬來酸鹽；以及氨基酸鹽，如谷氨酸鹽和天冬氨酸鹽。此外，本發(fā)明化合物及其鹽包括與各種可藥用溶劑如水、有機(jī)溶劑和緩沖劑的溶劑化物以及呈多晶型的那些。
本發(fā)明化合物可具有不對(duì)稱碳原子，這取決于取代基的類型，且可以基于不對(duì)稱中心的存在而以光學(xué)異構(gòu)體存在。因此，本發(fā)明化合物包括所有的各異構(gòu)體及其混合物。例如，化合物包括某些光學(xué)異構(gòu)體與其對(duì)映體的混合物，尤其是為等量D和L異構(gòu)體的混合物的外消旋體，或某些光學(xué)異構(gòu)體及其非對(duì)映體的混合物。
〔生產(chǎn)本發(fā)明化合物的方法〕不用說，可以使用各種方法得到本發(fā)明化合物。該類方法的實(shí)例是有機(jī)化學(xué)法，即通過使用葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物作原料的有機(jī)化學(xué)技術(shù)合成或改性中間體或所需化合物的方法，或通過用酸或堿分解多糖而得到中間體或所需化合物的方法；生化方法，即通過利用葡糖醛酸和N-乙?；咸前纷髟?、利用轉(zhuǎn)移酶或解聚酶的逆反應(yīng)合成或改性中間體或所需化合物的方法，或通過用酶解聚多糖得到中間體或所需化合物的方法；以及涉及基因工程技術(shù)的方法，即通過將酶的基因引入微生物或細(xì)胞中而獲得原料、中間體或所需化合物或用于合成或改性的酶的方法。這些方法單獨(dú)或組合使用。不用說本發(fā)明化合物不受這些生產(chǎn)方法的限制，且可以使用任何方法，只要它們得到所需化合物。
在各種制造方法中，最有效且優(yōu)選的方法是使用天然物質(zhì)，尤其是多糖或低聚糖作原料或中間體的生產(chǎn)方法。此外，更優(yōu)選使用其中使用從動(dòng)物組織或微生物培養(yǎng)物中提取、然后必要的話提純的透明質(zhì)酸及其鹽作為原料并解聚透明質(zhì)酸以得到解聚產(chǎn)物，將這些解聚產(chǎn)物用作中間體或所需化合物的方法。解聚方法可以是例如使用熱或超聲處理的物理方法，使用酸或堿的化學(xué)方法，或使用酶的生化方法。這些方法可以單獨(dú)或組合使用。在這些方法中，優(yōu)選使用酶的方法，因?yàn)槠浞磻?yīng)具有特異性、有效性或安全性。所用酶可以是具有催化透明質(zhì)酸的解聚反應(yīng)活性的那些且不受限制。該酶可以單獨(dú)使用或多種組合使用，這取決于目的。酶的實(shí)例是動(dòng)物組織源性酶，如睪丸透明質(zhì)酸酶(EC 3.2.1.35)，水蛭透明質(zhì)酸酶(EC 3.2.1.36),Inimicus japonicus毒液中的透明質(zhì)酸酶(EC 3.2.1)，β-葡糖醛酸酶(EC 3.2.1.31)和β-N-乙?；被禾擒彰?EC 3.2.1.52)，以及微生物源性酶，如來自Streptomyces hyalurolyticus的透明質(zhì)酸酶(EC 4.2.2.1)，透明質(zhì)酸酶SD(EC 4.2.2)，軟骨素酶(chondroitinase)ABC(EC 4.2.2.4)，軟骨素酶AC Ⅰ(EC 4.2.2.5)和軟骨素酶AC Ⅱ(EC 4.2.2.5)。在這些酶中，優(yōu)選微生物源性酶，因?yàn)樗鼈兡芤苑€(wěn)定質(zhì)量穩(wěn)定提供這一優(yōu)點(diǎn)。其中特別優(yōu)選源于Streptomyces hyalurolyticus的酶。
可以進(jìn)行酶反應(yīng)，根據(jù)酶的特性設(shè)置各種反應(yīng)條件，如溫度和pH。為了省去在進(jìn)行隨后的分級(jí)、提純或改性極可能需要的脫鹽步驟，該反應(yīng)優(yōu)選在基本無鹽的狀態(tài)下進(jìn)行，或在基本無非揮發(fā)性鹽和不溶于有機(jī)溶劑中的鹽的狀態(tài)下進(jìn)行。基本無鹽的狀態(tài)是指含有的鹽量不超過使得可能容易地進(jìn)行隨后的分級(jí)、提純或改性步驟而不在酶反應(yīng)之后進(jìn)行脫鹽步驟的量的狀態(tài)。優(yōu)選反應(yīng)混合物中的鹽含量為所需化合物的10％(w/w)或更少，更優(yōu)選1％(w/w)或更少。本文中反應(yīng)混合物中的鹽是指用于調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度和pH的緩沖劑的組分，如乙酸鈉、磷酸鈉、檸檬酸鉀、氯化鈉、氯化鉀和氯化鈣。非揮發(fā)性鹽本文是指通過減壓步驟較易揮發(fā)的揮發(fā)性鹽以外的鹽，如乙酸銨和碳酸氫銨。揮發(fā)性鹽的使用使得可能在從中間體或所需化合物的溶液中通過減壓或其他方法除去液體組分的同時(shí)除去該鹽。不溶于有機(jī)溶劑中的鹽本文指不僅溶于水而且溶于有機(jī)溶劑(如乙醇、甲醇和丙醇)的鹽以外的鹽，如乙酸銨、乙酸鈉、乙酸鉀和乙酸鈣。當(dāng)使用可溶于有機(jī)溶劑中的鹽時(shí)，用合適的有機(jī)溶劑洗滌含有可溶于摻有可溶于有機(jī)溶劑的鹽的水但不溶于有機(jī)溶劑的中間體或所需化合物的混合物，從而可以容易地分離摻入的鹽。
必要時(shí)可以通過常規(guī)方法如萃取、濃縮、過濾、重結(jié)晶、再沉淀或色譜法分離和提純所得解聚產(chǎn)物。優(yōu)選包括通過色譜法分離和提純的步驟，更優(yōu)選離子交換色譜法，因?yàn)槠渚哂懈咝А８鼉?yōu)選的是使用離子交換劑作為載體。色譜儀可以為間歇型、循環(huán)型、移動(dòng)床型或假移動(dòng)床型，且最佳的色譜儀可以根據(jù)情況具體選擇。用于色譜法中的洗脫液可以根據(jù)所用方法具有最佳組成。為了省去在進(jìn)行隨后的提純或改性極可能需要的脫鹽步驟，優(yōu)選使用基本不含非揮發(fā)性鹽和不溶于有機(jī)溶劑中的鹽的洗脫液?！盎静缓菗]發(fā)性鹽和不溶于有機(jī)溶劑中的鹽的洗脫液”指不含非揮發(fā)性鹽或不溶于有機(jī)溶劑中的鹽的洗脫液，該鹽的量超過使得可能容易地進(jìn)行隨后的分級(jí)、提純或改性步驟而不在色譜法之后進(jìn)行脫鹽步驟的量。優(yōu)選洗脫液中各鹽的量為0.5M或更小，更優(yōu)選0.1M或更小。通常而言，用于離子交換色譜法中的洗脫液含有用于調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度和pH的鹽。當(dāng)使用含有鹽的洗脫液時(shí)，優(yōu)選使用基本僅含揮發(fā)性鹽作為鹽的洗脫液。作為揮發(fā)性鹽，從操作容易性、安全性、獲取的容易性和價(jià)格上考慮優(yōu)選銨鹽。進(jìn)一步優(yōu)選乙酸銨。另外，優(yōu)選使用基本僅含可溶于有機(jī)溶劑中的鹽作為鹽的洗脫液。作為可溶于有機(jī)溶劑中的鹽，從操作容易性、安全性、獲取的容易性和價(jià)格上考慮優(yōu)選乙酸鹽。進(jìn)一步優(yōu)選乙酸銨或乙酸鈉。
所得中間體可以通過使用各種方法如有機(jī)化學(xué)方法或生物化學(xué)方法或其組合進(jìn)行提純或改性而轉(zhuǎn)化為所需化合物。

本發(fā)明化合物、其可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物通常全身或局部給藥、口服給藥或腸胃外給藥。對(duì)于劑量而言，最佳劑量應(yīng)根據(jù)基于狀態(tài)如疾病的類型、癥狀的嚴(yán)重性、接受治療的主體的年齡和體重的總體判斷而確定。劑量并不受限制，但在成人中，通常的日服劑量為0.01-100mg/kg口服，或0.001-10mg/kg腸胃外服用。該劑量可以一天給藥一次或必要時(shí)分次給藥。
本發(fā)明化合物、其可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物可以任何形式給藥，如口服形式，包括固體組合物、液體組合物和其他組合物，或腸胃外形式，包括注射液、外用制劑和栓劑。最合適的形式根據(jù)需要選擇。含有至少一種本發(fā)明化合物、其可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物的藥物組合物可以通過使用載體、賦形劑和其他用于常規(guī)藥物制造的添加劑制備。用于制劑的載體和賦形劑的實(shí)例是乳糖、硬脂酸鎂、淀粉、滑石、明膠、瓊脂、果膠、阿拉伯膠、橄欖油、芝麻油、可可脂、乙二醇和其他常用材料。
作為口服給藥的固體組合物，使用片劑、丸劑、膠囊、粉劑和顆粒劑。在這種固體組合物中，至少一種活性物質(zhì)(活性成分)與至少一種惰性稀釋劑如乳糖、甘露糖醇、葡萄糖、羥丙基纖維素、微晶纖維素、淀粉、聚乙烯吡咯烷酮或硅酸鎂/鋁酸鎂混合。根據(jù)常規(guī)方法，該組合物可以含有惰性稀釋劑以外的添加劑，如潤滑油如硬脂酸鎂，崩解劑如羧甲基纖維素鈣以及溶解助劑如谷氨酸或天冬氨酸。若需要，片劑或丸劑可以用糖包衣或包含蔗糖、明膠、羥丙基甲基纖維素鄰苯二甲酸酯等的胃溶性或腸溶性膜包衣。另外，片劑或丸劑可以用兩層或更多層包衣。此外，可吸收性物質(zhì)如明膠的膠囊也包括在內(nèi)。
用于口服給藥的液體組合物包括可藥用乳液、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑，且可以含有常用的惰性稀釋劑，如提純的水和乙醇。除惰性稀釋劑外，該組合物可以含有助劑如潤濕劑或懸浮劑、甜味劑、調(diào)味劑、芳香劑和防腐劑。
用于腸胃外給藥的注射液含有無菌的含水或非水增溶劑、懸浮劑或乳化劑。含水增溶劑和懸浮劑的實(shí)例是注射用水和注射用生理鹽水。非水增溶劑和懸浮劑的實(shí)例是丙二醇、聚乙二醇、植物油如橄欖油、醇如乙醇以及POLYSORBATE 80(注冊(cè)商標(biāo))。該組合物還可含有助劑，如防腐劑、潤濕劑、乳化劑、分散劑、穩(wěn)定劑(如乳糖)和溶解助劑(如谷氨酸和天冬氨酸)。這些試劑可以通過常規(guī)消毒方法如用微濾膜過濾消毒、加熱消毒如濕熱消毒或摻入殺菌劑而消毒。另外，生產(chǎn)無菌固體組合物且可以在在使用前溶于注射用無菌水或無菌溶劑中之后使用。
其他腸胃外給藥的藥物組合物含有至少一種本發(fā)明化合物作活性成分。它們包括外用液體、軟膏、搽劑、栓劑、透皮制劑和眼用溶液?！脖景l(fā)明聚合物及其生產(chǎn)方法〕本發(fā)明聚合物為以本發(fā)明化合物作側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的高分子化合物且可用作具有抗血栓形成性能的聚合材料。作為用于生產(chǎn)本發(fā)明聚合物的主鏈的聚合物優(yōu)選為生物相容性聚合物。該聚合物的實(shí)例為聚乙烯、聚苯乙烯、聚氨酯、聚氯乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、聚丙烯、聚碳酸酯、聚硅氧烷、聚甲基丙烯酸甲酯、聚四氟乙烯、聚對(duì)苯二甲酸乙二醇酯、聚酰胺、聚砜、ABS樹脂、聚縮醛以及這些聚合物的衍生物。在主鏈和側(cè)鏈之間可以插入合適的間隔基，從而可以賦予具有抗血栓形成性能的側(cè)鏈以柔韌性。另外，聚合物可以是多個(gè)在側(cè)鏈結(jié)構(gòu)中具有本發(fā)明化合物的聚合化合物的嵌段共聚物。此外，除本發(fā)明化合物外，聚合物可以具有鍵于其上的抗血栓形式物質(zhì)，抗血栓形成物質(zhì)的實(shí)例是血栓形成抑制物質(zhì)如肝素，或溶栓酶如尿激酶。
當(dāng)然，本發(fā)明聚合物不受生產(chǎn)方法限制，且可采用任何方法，只要得到所需產(chǎn)物。各種方法可用于獲得本發(fā)明聚合物且這些方法可單獨(dú)或組合使用。這些生產(chǎn)方法對(duì)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員是公開已知的。例如，在本發(fā)明化合物鍵于將成為主鏈的聚合物用單體上之后，可進(jìn)行聚合反應(yīng)以形成主鏈聚合物。另外，本發(fā)明化合物可鍵于主鏈聚合物上。
在其結(jié)構(gòu)中，本發(fā)明化合物具有體組分(body component)的衍生物，如葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物。從這一事實(shí)可以理解，本發(fā)明化合物高度生物相容，且對(duì)活體的不利影響最小，即使本發(fā)明化合物從聚合物上斷開也僅對(duì)活體產(chǎn)生最小的不利影響。
〔本發(fā)明的涂敷劑和模塑制品及其生產(chǎn)方法〕本發(fā)明還提供含有至少一種本發(fā)明化合物作活性成分的涂敷劑以及含有至少一種本發(fā)明聚合物作活性成分的涂敷劑。該涂敷劑可通過在合適溶劑中溶解或分散本發(fā)明化合物或聚合物并通過諸如涂敷、浸漬或噴涂的方法將所得溶液或懸浮液施用于人造器官或醫(yī)學(xué)裝置上而涂敷。
本發(fā)明的模塑制品通過使用至少一種本發(fā)明化合物或聚合物作材料而生產(chǎn)，且根據(jù)使用目的制造。因此，該模塑制品可以由任何方法制備，除非該材料的基本性質(zhì)受損。為了獲得本發(fā)明的模塑制品，可以使用各種方法，如將化合物或聚合物涂敷于單獨(dú)生產(chǎn)的模塑制品上；將化合物鍵于單獨(dú)生產(chǎn)的模塑制品上；以及由含有該化合物或聚合物的材料直接模塑。這些方法可以單獨(dú)或組合使用。
因?yàn)楸景l(fā)明的模塑制品具有高抗血栓形成性能，因此可以用作人造器官或醫(yī)學(xué)裝置的組分，或可用作人造器官或醫(yī)學(xué)裝置本身。模塑制品的形狀取決于所用材料的性質(zhì)，且可以是下列之一薄膜、膜、管、板、網(wǎng)、纖維或布，這根據(jù)使用目的而變?！脖景l(fā)明的人造器官及其生產(chǎn)方法〕本發(fā)明的人造器官通過使用至少一種本發(fā)明化合物或聚合物作為材料而生產(chǎn)，或通過使用至少一種本發(fā)明模塑制品作組分生產(chǎn)。根據(jù)其使用目的而制造。也可通過將本發(fā)明涂敷劑涂敷于如此生產(chǎn)的人造器官或由其它方法生產(chǎn)的常規(guī)人造器官上而生產(chǎn)。因此，人造器官可以由任何方法生產(chǎn)，除非該材料或組分的基本性質(zhì)受損。
本發(fā)明人造器官的實(shí)例是人造血管、人造心臟、心臟起博器、假心臟瓣膜、人造腎、人造肺、人造心-肺機(jī)、人造胰、人造骨、人造關(guān)節(jié)和人造韌帶。
〔本發(fā)明的醫(yī)學(xué)裝置及其生產(chǎn)方法〕本發(fā)明的醫(yī)學(xué)裝置通過使用至少一種本發(fā)明的化合物或聚合物為材料生產(chǎn)，或通過使用至少一種本發(fā)明模塑制品為組分生產(chǎn)。根據(jù)使用目的進(jìn)行制造。因此，該醫(yī)學(xué)裝置可由任何方法生產(chǎn)，除非該材料或組分的基本性質(zhì)受損。
本發(fā)明醫(yī)學(xué)裝置的實(shí)例是注射器、注射針、用于透析的留置針、留置針、灌注設(shè)備、灌注/血液過濾器、血液袋、管狀導(dǎo)管(用于營養(yǎng)品、用于胃/食管、用于膽管、用于呼吸、用于泌尿科學(xué)、用于血管、用于心臟、用于引入/注射/引流等)、血液透析器殼、血液透析器中空紗線、血液透析膜、體外循環(huán)血液回路、外部支路、人造肺膜、傷口涂敷材料和斯藤特固定膜。
〔本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)組合物〕本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)組合物可以通過向常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)組合物中加入本發(fā)明化合物或具有至少一種本發(fā)明化合物作側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物而生產(chǎn)。其中加入本發(fā)明化合物或具有至少一種本發(fā)明化合物作側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物的細(xì)胞培養(yǎng)用培養(yǎng)基的實(shí)例是(但不限于)199培養(yǎng)基，MEM(Eagle極限必需培養(yǎng)基)、BME(Eagle基礎(chǔ)培養(yǎng)基)、DMEM(Dulbecco改性的Eagle培養(yǎng)基)、RPMI 1640、Ham’s F12培養(yǎng)基、MCDB 104和MCDB 153。可使用本發(fā)膽細(xì)胞培養(yǎng)組合物培養(yǎng)的細(xì)胞包括但不限于脊椎動(dòng)物細(xì)胞，如魚細(xì)胞、兩棲動(dòng)物細(xì)胞、鳥細(xì)胞和哺乳動(dòng)物細(xì)胞。本發(fā)明化合物具有顯著的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用和顯著的血管生成促進(jìn)作用。因此，本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)組合物可用于培養(yǎng)哺乳動(dòng)物細(xì)胞，尤其是血管內(nèi)皮細(xì)胞，用于試驗(yàn)和研究的培養(yǎng)目的。該組合物也可用于生產(chǎn)有用物質(zhì)如細(xì)胞生長(zhǎng)因子(如VEGF)，以及用于生產(chǎn)治療組織，發(fā)用于治愈燒傷的人工培養(yǎng)的皮膚。〔本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備〕本發(fā)明的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備通過使用至少一種本發(fā)明化合物或聚合物作材料而生產(chǎn)或使用至少一種本發(fā)明模塑制品作組分而生產(chǎn)。根據(jù)其應(yīng)用目的進(jìn)行制造。也可通過將本發(fā)明涂敷劑涂敷于如此生產(chǎn)的細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備或由其他方法生產(chǎn)的常規(guī)細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備上而生產(chǎn)。因此，該設(shè)備可以由任何方法生產(chǎn)，除非該材料或組分的基本性質(zhì)受損。
本發(fā)明細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備的實(shí)例是陪替氏皿、燒瓶、微量培養(yǎng)板和瓶?！脖景l(fā)明化合物和聚合物的血小板聚集抑制作用和血小板附著抑制作用〕本發(fā)明化合物(實(shí)施例1,2,3,4,6,8,10的化合物)的血小板聚集抑制作用按Born和O′Brien的方法(Born,G.,V.,R.:《自然》(London),194,924(1962),O′Brien,J.,R.:J.Clin.Pathol.,15,556(1962))使用兔的富血小板血漿測(cè)量。作為對(duì)比用對(duì)照物，在鹽酸塞氯匹定(抗血小板藥)上進(jìn)行相同試驗(yàn)。結(jié)果本發(fā)明化合物均在低濃度下顯示顯著的血小板聚集抑制作用。
使用兔的富血小板血漿通過微球柱法(Kataoka,K.,Maeda,M.,Nishimura,T.,Nitadori,Y.,Tsuruta,T.,Akaike,T.,Sakurai,Y.:J.Biomed.Mater.Res.,14,817(1980))評(píng)價(jià)具有本發(fā)明化合物作側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合化合物(實(shí)施例2-4的聚合物)的血小板附著抑制作用。結(jié)果本發(fā)明聚合物顯示顯著的血小板附著抑制作用。
此外，其上固定有本發(fā)明化合物的模塑制品通過使本發(fā)明化合物與聚乙烯亞胺活化的聚乙烯管反應(yīng)而得到，且測(cè)量模塑制品的血小板附著率。根本未檢測(cè)到血小板附著，與未固定有本發(fā)明化合物的未處理管相比較而言。發(fā)現(xiàn)該模塑制品顯示優(yōu)異的抗血栓形成性能。
〔本發(fā)明化合物和聚合物的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用〕使用牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞測(cè)量本發(fā)明化合物的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。結(jié)果用于該試驗(yàn)中的本發(fā)明化合物均在低濃度下顯示優(yōu)異的生長(zhǎng)促進(jìn)作用。本發(fā)明化合物還與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)-一種已知特異性作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞上且促進(jìn)這些細(xì)胞生長(zhǎng)的細(xì)胞因子-協(xié)同作用，從而顯示較好的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。這證實(shí)了本發(fā)明化合物與體源性固有VEGF和外部VEGF的協(xié)同作用，后者一直用于治療目的而給藥或誘導(dǎo)，從而顯示較好的血管內(nèi)皮細(xì)胞長(zhǎng)促進(jìn)作用。
牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞在微量培養(yǎng)板中培養(yǎng)，該培養(yǎng)板用用于本發(fā)明中的上述聚合物涂敷，且測(cè)量血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。結(jié)果，本發(fā)明的聚合物(本發(fā)明的模塑制品)均具有優(yōu)異的生長(zhǎng)促進(jìn)作用。
使用牛主動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞測(cè)量本發(fā)明化合物的血管生成促進(jìn)作用。結(jié)果，本發(fā)明化合物均具有優(yōu)異的血管生成促進(jìn)作用。
本發(fā)明的效果通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物具有優(yōu)異的血小板附著/聚集抑制作用，且基于該作用可以用作治療劑，即用作抗血小板藥。具體而言，它們可用于抑制血栓形成的進(jìn)展，防止復(fù)發(fā)，在具有血栓形成危險(xiǎn)因素的患者中輔助預(yù)防血栓形成，且在健康人中主要預(yù)防血栓形成。更具體而言，它們可以有效治療和預(yù)防心血管疾病(急性心肌梗塞、不穩(wěn)定的心絞痛、慢性的穩(wěn)定心絞痛、老年性(old)心肌梗塞、因房顫引起的血栓栓塞、彌散性血管內(nèi)凝血綜合征(DIC)、冠狀動(dòng)脈分流手術(shù)后的移植梗阻(graftobstruction)、經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動(dòng)脈血管形成術(shù)(PTCA)后的冠狀動(dòng)脈狹窄和梗阻、假心臟瓣膜替換后的血栓形成并發(fā)癥(血栓栓塞、形成血栓的瓣膜)、肺血栓栓塞、體外循環(huán)血液中血小板的活化)、腦血管疾病(一過性腦缺血發(fā)作(TIA)、腦梗塞)、外周動(dòng)脈梗阻(阻塞性動(dòng)脈硬化、阻塞性血栓血管炎、換血管術(shù)后的梗阻)、小球性腎炎、腎病綜合征和其它血栓形成(原發(fā)性血小板增多、血栓形成性血小板減少性紫癜(TPP)、溶血性尿毒癥綜合征、抗磷脂抗體綜合征、川崎病、驚厥、貝赫切特綜合征)。本發(fā)明還提供一種可用于生產(chǎn)這些優(yōu)異化合物的生產(chǎn)方法。
通式(1)的化合物、尤其是通式(16)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用和優(yōu)異的血管生成促進(jìn)作用?；谶@些作用，它們可用作治療劑。具體而言，它們可以用作用于血管內(nèi)皮再生治療或血管生成治療的治療藥和預(yù)防藥(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑，血管生成促進(jìn)劑)。更具體而言，它們可以有效治療和預(yù)防心血管疾病(急性心肌梗塞、不穩(wěn)定的心絞痛、慢性的穩(wěn)定心絞痛、老年性心肌梗塞、因房顫引起的血栓栓塞、彌散性血管內(nèi)凝血綜合征(DIC)、冠狀動(dòng)脈分流手術(shù)后的移植梗阻、經(jīng)皮經(jīng)腔冠狀動(dòng)脈血管形成術(shù)(PTCA)后的冠狀動(dòng)脈狹窄和梗阻、假心臟瓣膜替換后的血栓形成并發(fā)癥(血栓栓塞、形成血栓的瓣膜)、肺血栓栓塞、腦血管疾病(一過性腦缺血發(fā)作(TIA)、腦梗塞)、外周動(dòng)脈梗阻(阻塞性動(dòng)脈硬化、阻塞性血栓血管炎、換血管術(shù)后的梗阻)、小球性腎炎、腎病綜合征和其它血栓形成(原發(fā)性血小板增多、血栓形成性血小板減少性紫癜(TPP)、溶血性尿毒癥綜合征、抗磷脂抗體綜合征、川崎病、驚厥、貝赫切特綜合征)；以及治療創(chuàng)傷(慢性皮膚潰瘍，包括褥瘡、糖尿病性潰瘍、燒傷、角膜創(chuàng)傷、接受化療或放射療法的癌癥患者的口腔粘膜炎、各種手術(shù)如皮膚移植后的創(chuàng)傷、胃腸組織損傷等)。
本發(fā)明化合物和聚合物具有優(yōu)異的抗血栓形成性能。因此，它們可以用作制備要求抗血栓形成性能的模塑制品的材料或涂敷劑。
本發(fā)明的化合物、聚合物和模塑制品具有優(yōu)異的抗血栓形成性能。因此，它們可以用作要求抗血栓形成性能的人造器官和醫(yī)學(xué)裝置，或用作人造器官或醫(yī)學(xué)裝置本身。具體而言，它們可以用作人造器官如人造血管、人造心臟、心臟起博器、假心臟瓣膜、人造腎、人造肺、人造心-肺機(jī)、人造胰、人造骨、人造關(guān)節(jié)和人造韌帶；以及醫(yī)學(xué)裝置如注射器、注射針、用于透析的留置針、留置針、灌注設(shè)備、灌注/血液過濾器、血液袋、管狀導(dǎo)管(用于營養(yǎng)品、用于胃/食管、用于膽管、用于呼吸、用于泌尿科學(xué)、用于血管、用于心臟、用于引入/注射/引流等)、血液透析器殼、血液透析器中空紗線、血液透析膜、體外循環(huán)血液回路、外部支路、人造肺膜、傷口涂敷材料和斯藤特固定膜的材料和組分。
本發(fā)明化合物和具有它們作為側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用，且促進(jìn)用血管內(nèi)皮細(xì)胞的涂敷。因此，它們可以用作制備要求抗血栓形成性能的模塑制品的材料或涂敷劑。此外，這些化合物、聚合物和模塑制品具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用，且促進(jìn)用血管內(nèi)皮細(xì)胞的涂敷。因此，它們可以用作要求抗血栓形成性能的人造器官和醫(yī)學(xué)裝置的組分或用作人造器官和醫(yī)學(xué)裝置本身。
此外，本發(fā)明化合物或具有至少一種該化合物作為側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物可用作細(xì)胞培養(yǎng)組合物的成分。本發(fā)明化合物和具有該化合物作為側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物可以預(yù)期用于細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)備中。
實(shí)施例在下列實(shí)施例中，通過化合物生產(chǎn)實(shí)施例、聚合物生產(chǎn)實(shí)施例、模塑制品生產(chǎn)實(shí)施例、抗血栓形成作用試驗(yàn)和制劑生產(chǎn)實(shí)施例更詳細(xì)說明本發(fā)明。不用說，本發(fā)明并不限于下列實(shí)施例所述的物質(zhì)、配方和方法，且包括所有包含在本發(fā)明權(quán)利要求書中的物質(zhì)、配方和方法。
實(shí)施例1化合物生產(chǎn)實(shí)施例1生產(chǎn)4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基(hexa-4-enepyranuronosyl)-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基(glucopyranosyl)-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基(glucopyranuronosyl)-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc(實(shí)施例1的化合物)]，4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖[ΔHexAβ1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc(實(shí)施例2的化合物)]，4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc β1→4GlcAβ1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc(實(shí)施例3的化合物)]和4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc β1→4GlcAβ1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc(實(shí)施例4的化合物)]將30g透明質(zhì)酸鈉(KIBUN FOOD CHEMIFA的產(chǎn)品；商標(biāo)名“透明質(zhì)酸FCH”)溶解于3L蒸餾水中，并將該溶液加熱到40℃。用0.1M氫氧化鈉水溶液將該溶液的pH調(diào)節(jié)為6.0。然后加入來源于Streptomyces hyalurolyticus的透明質(zhì)酸酶(Amano Pharmaceutical的產(chǎn)品；商標(biāo)名“透明質(zhì)酸酶“Amano””)至濁度下降單位為0.5/mg透明質(zhì)酸鈉，且該反應(yīng)在40℃下進(jìn)行100小時(shí)。反應(yīng)之后，通過公稱分子截止為10K的親水性聚醚砜的超濾膜(Millipore的產(chǎn)品)從溶液中除去酶。通過凍干除去溶劑以得到解聚產(chǎn)物(27.4g)。
將解聚產(chǎn)物通過陰離子交換色譜法(柱YMC-PackIEC-AX，洗脫液A；水，B；0.4M NaCl；線性梯度(30分鐘)，檢測(cè)UV(232nm))分級(jí)(實(shí)施例1,2,3和4的化合物以此順序洗脫)，得到含有實(shí)施例1-4的化合物的級(jí)分。將各級(jí)分通過凝膠過濾脫鹽(凝膠SephadexG-10，洗脫液水)，然后凍干得到化合物1-4(白色粉末)。產(chǎn)量分別為實(shí)施例1的化合物1.7g，實(shí)施例2的化合物5.9g，實(shí)施例3的化合物3.4g和實(shí)施例4的化合物2.2g。各化合物以鈉鹽形式得到。
實(shí)施例1-4的化合物是下式(20)所示的化合物，其中n表示1-4的整數(shù)。該式在n為1時(shí)代表實(shí)施例1的化合物，在n為2時(shí)代表實(shí)施例2的化合物，在n為3時(shí)代表實(shí)施例3的化合物且在n為4時(shí)代表實(shí)施例4的化合物。式(20) 通過高效液相色譜法(柱TSK凝膠DEAE-5PW，洗脫液A；水，B；0.3M NaCl；線性梯度(20min)，檢測(cè)UV(232nm)；面積百分?jǐn)?shù)法)測(cè)得各化合物的純度為97％或更高。實(shí)施例1-4各化合物的糖醛酸含量通過Bitter和Muir的方法(Bitter,T.,Muir,H.:Anal.Biochem.,4,330(1962))使用葡糖醛酸內(nèi)酯作為標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)物分析。實(shí)施例1-4各化合物的氨基己糖含量通過Boas的方法(無樹脂處理；Boas,N.,F.:J.Biol.Chem.,204,553(1953))使用葡糖胺鹽酸鹽作為標(biāo)準(zhǔn)產(chǎn)品在3N鹽酸中于100℃下水解16小時(shí)后分析。通過分析測(cè)得的各實(shí)施例化合物的值幾乎與理論值一致。實(shí)施例2化合物生產(chǎn)實(shí)施例2生產(chǎn)4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖[ΔHexA β1→3GlcNAcβ1→4GlcA β1→3GlcNAc(實(shí)施例1的化合物)]和4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖[AHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcAβ1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc(實(shí)施例2的化合物)]將60g透明質(zhì)酸鈉(KIBUN FOOD CHEMIFA的產(chǎn)品；商標(biāo)名“透明質(zhì)酸FCH”)溶解于3L蒸餾水中，并將該溶液加熱到40℃。用0.1M氫氧化鈉水溶液將該溶液的pH調(diào)節(jié)為6.0。然后加入來源于Streptomyces hyalurolyticus的透明質(zhì)酸酶(Amano Pharmaceutical的產(chǎn)品；商標(biāo)名“透明質(zhì)酸酶“Amano””)至濁度下降單位為1/mg透明質(zhì)酸鈉，且該反應(yīng)在40℃下進(jìn)行100小時(shí)。反應(yīng)之后，通過公稱分子截止為10K的親水性聚醚砜的超濾膜(Millipore的產(chǎn)品)從溶液中除去酶。通過凍干除去溶劑以得到解聚產(chǎn)物(53.7g)。
將解聚產(chǎn)物通過陰離子交換色譜法(柱TSK凝膠DEAE-5PW，洗脫液A；水，B；0.5M乙酸鈉的水溶液；線性梯度(A/B(90/10)→A/B(60/40),40分鐘)，檢測(cè)UV(232nm))分級(jí)(實(shí)施例1和2的化合物以此順序)，得到含有實(shí)施例1和2的化合物的級(jí)分。將各級(jí)分凍干以除去水。將凍干的級(jí)分用用于脫鹽的乙醇洗滌，再次溶解于水中，然后凍干得到實(shí)施例1和2的化合物(白色粉末)。產(chǎn)量分別為實(shí)施例1的化合物18.1g和實(shí)施例2的化合物29.5g。各化合物以鈉鹽形式得到。
通過高效液相色譜法(柱TSK凝膠Amide-80，洗脫液乙腈/水/乙酸/三乙胺(65/35/2/1,v/v)，流速1.0mL/min，柱溫80℃，檢測(cè)UV(232nm)；面積百分?jǐn)?shù)法)測(cè)得各化合物的純度為97％或更高。實(shí)施例1和2各化合物的糖醛酸含量和氨基己糖含量通過實(shí)施例1所示方法分析。測(cè)得的值幾乎與理論值一致。實(shí)施例3化合物生產(chǎn)實(shí)施例3生產(chǎn)4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖醇(glucopyranitol)[ΔHexAβ1→3 GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc OH(實(shí)施例5的化合物)]和4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖醇[ΔHexA β1→3GlcNAcβ1→4GlcA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAc OH(實(shí)施例6的化合物)]將50mg實(shí)施例1的化合物溶解于50ml 3mg/ml硼氫化鈉水溶液中，并將該溶液在室溫下處理1小時(shí)。加入5m16M乙酸以終止該反應(yīng)。加入50ml甲醇后，通過蒸發(fā)器將混合物蒸發(fā)至于。此外，加入50ml甲醇和蒸發(fā)至干重復(fù)兩次。蒸發(fā)至干后殘余的固體物質(zhì)溶解于5ml水中。通過以與實(shí)施例1相同的方式進(jìn)行凝膠過濾而使該溶液脫鹽，然后凍干得到實(shí)施例5的化合物(白色粉末44.7mg)。
以相同的方式使用實(shí)施例2的化合物作為原料得到實(shí)施例6的化合物。
實(shí)施例5的化合物和實(shí)施例6的化合物是式(21)所示的化合物，其中n表示1或2的整數(shù)。該式在n為1時(shí)表示化合物5，且在n為2時(shí)表示化合物6。式(21) 通過實(shí)施例2所示方法測(cè)量化合物5和6各自的純度，且發(fā)現(xiàn)其為98％或更高。這些化合物的糖醛酸含量和氨基己糖含量通過實(shí)施例1所示方法分析。測(cè)得的值幾乎與理論值一致。實(shí)施例4化合物生產(chǎn)實(shí)施例4生產(chǎn)4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸(glucopyranuronic acid)[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA(實(shí)施例7的化合物)]和4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAcβ1→4GlcA(實(shí)施例8的化合物)]按Reissig等(Reissig,J.,L.,Strominger,J.,L.,Leloir,L.,F.:J.Biol.Chem.,217,959(1953))的方法將實(shí)施例1的化合物在pH9的硼酸鹽緩沖液中加熱。以與實(shí)施例3相同的方式將反應(yīng)混合物中硼酸以硼酸甲酯除去。通過以與實(shí)施例1相同的方式進(jìn)行凝膠過濾而使該剩余的混合物脫鹽，然后凍干得到實(shí)施例7的化合物(白色粉末)。當(dāng)50mg實(shí)施例1的化合物用作原料時(shí)，得到43.1mg實(shí)施例7的化合物。
類似地，當(dāng)以50mg實(shí)施例2的化合物作為原料時(shí)，得到44.8mg實(shí)施例8的化合物(白色粉末)。
實(shí)施例7的化合物和實(shí)施例8的化合物是式(22)所示的化合物，其中n表示0或1的整數(shù)。該式在n為0時(shí)表示化合物7，且在n為1時(shí)表示化合物8。式(22) 通過實(shí)施例2所示方法測(cè)量實(shí)施例7和8各化合物的純度，且發(fā)現(xiàn)其為98％或更高。這些化合物的糖醛酸含量和氨基己糖含量通過實(shí)施例1所示方法分析。測(cè)得的值幾乎與理論值一致。實(shí)施例5化合物生產(chǎn)實(shí)施例5生產(chǎn)4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛醇(glucopyranuronito1)[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA OH(買施例9的化合物)]和4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛醇[ΔHexA β1→3GlcNAc β1→4GlcA β1→3GlcNAcβ1→4GlcA OH(實(shí)施例10的化合物)]以與實(shí)施例3相同的方式處理實(shí)施例7的化合物，得到實(shí)施例9的化合物(白色粉末)。當(dāng)使用20mg實(shí)施例7的化合物作為原料時(shí)，得到15.9mg實(shí)施例9的化合物。
類似地，當(dāng)以20mg實(shí)施例8的化合物作為原料時(shí)，得到17.8mg實(shí)施例10的化合物(白色粉末)。
實(shí)施例9的化合物和實(shí)施例10的化合物是式(23)所示的化合物，其中n表示0或1的整數(shù)。該式在n為0時(shí)表示化合物9，且在n為1時(shí)表示化合物10。式(23) 通過實(shí)施例2所示方法測(cè)量化合物9和10各自的純度，且發(fā)現(xiàn)其為98％或更高。這些化合物的糖醛酸含量和氨基己糖含量通過實(shí)施例1所示方法分析。測(cè)得的值幾乎與理論值一致。實(shí)施例6聚合化合物生產(chǎn)實(shí)施例生產(chǎn)聚(N-對(duì)乙烯基芐基-[O-4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-0-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-葡糖酸酰胺(gluconamide)(聚合物實(shí)施例1)，聚(N-對(duì)乙烯基芐基-[O-4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-葡糖酸酰胺(聚合物實(shí)施例2)，聚(N-對(duì)乙烯基芐基-[O-4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-葡糖酸酰胺(聚合物實(shí)施例3)和聚(N-對(duì)乙烯基芐基-[O-4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-葡糖酸酰胺(聚合物將7g內(nèi)酯化的實(shí)施例1化合物溶解于50ml甲醇中，并在加熱回流下加入對(duì)氨基甲基苯乙烯的甲醇溶液(2.5g/0.5ml)。加熱回流120分鐘后，加入200ml丙酮以進(jìn)行結(jié)晶。將晶體在甲醇中重結(jié)晶兩次，得到提純的晶體(N-對(duì)乙烯基芐基-[O-4-脫氧-α-L-蘇-吡喃己-4-烯糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-吡喃葡萄糖基-(1→4)-3-O-β-D-吡喃葡糖醛酸基-(1→3)-O-2-乙酰胺-2-脫氧-β-D-葡糖酸酰胺]；3.3g)。
將2g提純的晶體溶解于2ml水中，并加入過氧二硫酸鉀(0.2mol％)作為聚合引發(fā)劑?；旌衔镌诘?dú)饬髦杏?0℃下加熱24小時(shí)以進(jìn)行聚合反應(yīng)。聚合之后將液體傾入甲醇中以沉淀所得聚合物。通過潷析除去甲醇以分離聚合物。將聚合物進(jìn)行再沉淀，其中聚合物溶解于水中并從甲醇中結(jié)晶。結(jié)果提純聚合物得到實(shí)施例1的聚合物(1.4g)。
以相同方式使用實(shí)施例2的化合物為原料得到實(shí)施例2的聚合物，使用實(shí)施例3的化合物為原料得到實(shí)施例3的聚合物且使用實(shí)施例4的化合物為原料得到實(shí)施例4的聚合物。
實(shí)施例1-4的聚合物為式(24)所示的化合物，其中n為1-4的整數(shù)。該式在n為1時(shí)表示實(shí)施例1的聚合物，在n為2時(shí)表示實(shí)施例2的聚合物，在n為3時(shí)表示實(shí)施例3的聚合物和在n為4時(shí)表示通過光散射法測(cè)量實(shí)施例1-4的聚合物的重均分子量，測(cè)得其為約40000。式(24) 實(shí)施例7模塑制品生產(chǎn)實(shí)施例實(shí)施例1-4的化合物固定于其上的聚乙烯管的生產(chǎn)(模塑制品實(shí)施例1-4)按照Larm等的方法(Larm,O.,Lasson,R.,Olsson,P.:Biomat.Med.Dev.Org.,11,161(1983))進(jìn)行生產(chǎn)。將實(shí)施例1的化合物和聚乙烯亞胺活化的聚乙烯管(1.8mmID×100cmL)與NaB(CN)H3在0.15M NaCl中于50℃和pH3.5下反應(yīng)2小時(shí)，得到固定有實(shí)施例1化合物的聚乙烯管(模塑制品實(shí)施例1)。
以相同的方法使用實(shí)施例2的化合物為原料得到模塑制品實(shí)施例2，使用實(shí)施例3的化合物為原料得到模塑制品實(shí)施例3且使用實(shí)施例4的化合物為原料得到模塑制品實(shí)施例4。實(shí)施例8本發(fā)明化合物的血小板聚集抑制作用以9體積血液/體積3.8％檸檬酸鈉水溶液的量從兔主動(dòng)脈取出血液。將血液樣品立即離心(50×g,10min，室溫)，得到富含血小板的血漿(PRP)作為上層清液。向100μlPRP中加入10μl本發(fā)明各化合物1-7的各種濃度的溶液。將混合物在37℃下保持1分鐘，然后加入10μl的10μg/mL膠原蛋白(牛腱膠原蛋白Meiji Yakuhin的產(chǎn)品)作為聚集誘導(dǎo)劑。在加入后記錄7分鐘的聚集曲線。按照Born和O’Brien(Born,G.,V.,R.:自然(London),194,924(1962),O’Brien,J.,R.:J.Clin.Pathol.,15,556(1962))的方法使用聚集測(cè)試器(MC Medical生產(chǎn))進(jìn)行血小板聚集的測(cè)量。作為用于對(duì)比的對(duì)照樣，在作為代表性抗血栓形成藥的鹽酸塞氯匹定上進(jìn)行相同的測(cè)試。結(jié)果示于表1中。
表1

如表1所示，本發(fā)明化合物具有優(yōu)異的血小板聚集抑制作用。實(shí)施例9本發(fā)明化合物的急性毒性使用大鼠(重300-400g,Wistar，雄性)測(cè)試本發(fā)明化合物的代表性實(shí)例(即實(shí)施例1-10的化合物)的急性毒性。它們的LD50值為500mg/kg或更大。實(shí)施例10本發(fā)明聚合物的血小板附著抑制作用通過微球柱法(Kataoka,K.,Maeda,M.,Nishimura,T.,Nitadori,Y.,Tsuruta,T.,Akaike,T.,Sakurai,Y.:J.Biomed.Mater.Res.,14,817(1980))評(píng)價(jià)聚合物實(shí)施例2-4的血小板附著抑制作用。以與實(shí)施例8相同的方式得到的PRP通過在1200G下進(jìn)行兩次7分鐘的離心而用Dubecco PBS洗滌，以制備最終濃度為1×105血小板/μL的血小板懸浮液。將不同濃度的各聚合物水溶液傾入填充了聚苯乙烯珠粒(直徑150μm,20％二乙烯基苯交聯(lián)的，無孔)的微球柱(Teflon柱(3Idmm×50mmL)中并吸附。吸附之后，將柱用蒸餾水徹底漂洗。將血小板懸浮液通過該柱(流速0.5mL/min，室溫)。測(cè)量通過之后的懸浮液中血小板濃度并計(jì)算血小板附著率。結(jié)果示于表2-4中。
表2實(shí)施例2的聚合物

表3實(shí)施例3的聚合物


表4實(shí)施例4的聚合物

如表2-4所示，本發(fā)明化合物具有優(yōu)異的血小板附著抑制作用。實(shí)施例11本發(fā)明模塑制品的抗血栓形成性能評(píng)價(jià)模塑制品實(shí)施例2-4的抗血栓形成性能。以與實(shí)施例10相同的方式制備最終濃度為1×105血小板/μL的血小板懸浮液。將該血小板懸浮液通過模塑制品實(shí)施例2-4和未處理的聚乙烯管(未處理管)(流速0.5mL/min，1小時(shí)，室溫)并通過其循環(huán)。
測(cè)量通過之后的溶液中血小板數(shù)目和濃度，并計(jì)算未處理管和模塑制品實(shí)施例2-4的血小板附著率。結(jié)果示于表5中。
表5

如表5所示，模塑制品實(shí)施例2-4的血小板附著率明顯低于未處理管。該結(jié)果證實(shí)本發(fā)明的模塑制品具有優(yōu)異的抗血栓形成性能。實(shí)施例12本發(fā)明化合物的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用1該試驗(yàn)使用牛主動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(傳代數(shù)3)作為細(xì)胞，并使用含10％FCS(胎牛血清)、100單位/mL青霉素G和10μg/mL鏈霉素的MEM作為培養(yǎng)基。96孔微量培養(yǎng)板用這些細(xì)胞以4×103細(xì)胞/孔的量接種(4×104/mL,100μL)，并以預(yù)定的最終濃度(0,0.1,0.5,1,2,10μg/mL)各自加入式(1)化合物(化合物實(shí)施例1-10)(10μL；溶解于培養(yǎng)基中)。在37℃和20％CO2下培養(yǎng)20小時(shí)，然后使用“細(xì)胞生長(zhǎng)ELISA,BrdU顯色試劑盒”(BoehringerMannheim)(采用5-溴脫氧尿苷(BrdU)的攝取作為指示劑)測(cè)量該化合物對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
作為對(duì)照，將對(duì)比化合物1和2進(jìn)行相同的試驗(yàn)。對(duì)比化合物為式(25)所示的化合物，其中n表示1或2的整數(shù)。該式在n為1時(shí)表示對(duì)比化合物1(下表中的Comp.1)和在n為2時(shí)表示對(duì)比化合物2(下表中的Comp.2)。對(duì)比化合物1和2按照實(shí)施例2制備。然而，透明質(zhì)酸酶來源于牛睪丸且檢測(cè)在206nm下進(jìn)行。各化合物的純度為97％或更高。糖醛酸含量和氨基己糖含量幾乎與理論值一致。式(25)

各化合物的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用由如下方程評(píng)價(jià)促進(jìn)率(％)={(化合物加入試驗(yàn)中BrdU攝取的增加)/(對(duì)照試驗(yàn)中BrdU攝取的增加)}×100結(jié)果示于表6中。
表6


如表6所示，實(shí)施例1-10的化合物均具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。實(shí)施例13本發(fā)明化合物的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用2進(jìn)行試驗(yàn)以研究本發(fā)明化合物與血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子(VEGF)的相互作用。作為VEGF，使用人重組VEGF(血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子，人，重組，用于生化應(yīng)用Wako Pure Chemical Industries的產(chǎn)品)。
以與實(shí)施例12相同的方式進(jìn)行試驗(yàn)，但在加入該化合物的同時(shí)加入VEGF(最終濃度為10ng/ml)。作為對(duì)比試驗(yàn)，進(jìn)行VEGF單獨(dú)加入試驗(yàn)(其中僅加入VEGF的試驗(yàn))和負(fù)對(duì)照試驗(yàn)(其中既不加該化合物也不加VEGF的試驗(yàn))。以與實(shí)施例12相同的方式測(cè)量對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)的作用。
各化合物的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用由如下方程評(píng)價(jià)促進(jìn)率(％)={(化合物加入試驗(yàn)中BrdU攝取的增加)/(對(duì)照試驗(yàn)中BrdU攝取的增加)}×100
結(jié)果示于表7中。
表7

在表7中，示于化合物濃度為0欄的促進(jìn)率表示當(dāng)僅加入VEGF時(shí)得到的促進(jìn)率?；谡f明本發(fā)明化合物單獨(dú)加入試驗(yàn)結(jié)果的表6和表7，試驗(yàn)化合物均與VEGF協(xié)同作用，且顯示優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。實(shí)施例14本發(fā)明化合物的血管生成促進(jìn)作用1將1體積的重組緩沖液(500mM NaOH,260mM NaHCO3,200mMHEPES)與1體積的不含NaHCO3的1/10濃縮的MEM混合，在冰水中冷卻。然后加入8體積的膠原蛋白的0.3％鹽酸溶液(pH3.0)，然后徹底混合，以制備膠原蛋白溶液。將膠原蛋白溶液(0.5ml)分配到24孔微量培養(yǎng)板中并在37℃下溫育30分鐘以膠凝。在膠原蛋白凝膠上以5×104個(gè)細(xì)胞/孔的量接種牛主動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(傳代數(shù)3-8)。在37℃下培養(yǎng)約3小時(shí)以引起細(xì)胞附著。然后除去培養(yǎng)基，并涂上0.5ml膠原蛋白溶液，然后在37℃下溫育30分鐘，以膠凝該體系。然后加入1ml/孔的含不同濃度的實(shí)施例1-4各化合物的2％FBS-MEM培養(yǎng)基。該混合物在CO2溫育器中于37℃培養(yǎng)3天。培養(yǎng)3天后，在相差顯微鏡下放大100倍拍攝所形成的血管狀腔(新生血管)。掃描照片并使用 Microcomputer Imaging Device(Neuroscience的產(chǎn)品)分析圖象以測(cè)量每單位面積的血管狀腔長(zhǎng)度。作為對(duì)照試驗(yàn)，以相同方式測(cè)量在不含該化合物的培養(yǎng)基中培養(yǎng)的細(xì)胞的血管狀腔長(zhǎng)度。
由下列方程評(píng)價(jià)各化合物的血管生成促進(jìn)作用促進(jìn)率(％)={[(各試驗(yàn)中的腔長(zhǎng)度)-(對(duì)照試驗(yàn)中的腔長(zhǎng)度)]/(對(duì)照試驗(yàn)中的腔長(zhǎng)度)}×100結(jié)果示于表8中。
表8

如表8所示，化合物1-4均具有優(yōu)異的血管生成促進(jìn)作用。實(shí)施例15本發(fā)明化合物的血管生成促進(jìn)作用2通過使用大鼠的擴(kuò)散盒法評(píng)價(jià)實(shí)施例1和2的化合物的血管生成促進(jìn)作用。也就是說，裝配擴(kuò)散盒(膜孔徑0.45μm；Millipore的產(chǎn)品)并在其中密封200μl不同濃度(0,10-8,10-7,10-6,10-5M)化合物1和2各自的生理鹽水溶液。
通過腹膜內(nèi)給藥戊巴比妥(10mg/動(dòng)物)而麻醉Wistar大鼠(雄性，體重200-250g)。然后刮去該動(dòng)物的背部毛，并用稀碘酊消毒。切開皮膚但不損傷肌肉，并將上述封有溶液的擴(kuò)散盒移植在皮下區(qū)域和筋膜之間。縫合切開部位并喂養(yǎng)該動(dòng)物一周。然后切開被麻醉大鼠的背部以暴露該盒。觀察到存在血管生成后，沿肌肉切除該盒并固定在福爾馬林中。
結(jié)果示于表4中。在該表中，+,±和-代表血管生成的誘導(dǎo)分別為正、假正(false positive)和負(fù)。
表9

如該表所示，化合物1和2均具有優(yōu)異的血管生成促進(jìn)作用。實(shí)施例16由聚合化合物生產(chǎn)的模塑制品的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用制備實(shí)施例1-4的各聚合物的0.01w/v％水溶液，并以0.5ml/L的量分配到96孔聚苯乙烯微量培養(yǎng)板中。使該微量培養(yǎng)板室溫放置一夜，然后除去溶液以涂敷該板。使用被涂敷板來以與實(shí)施例8相同的方式培養(yǎng)牛主動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞。作為對(duì)照試驗(yàn)，使用未涂敷板進(jìn)行培養(yǎng)。以與實(shí)施例12相同的方式測(cè)量生長(zhǎng)促進(jìn)作用，并使用下列方程評(píng)價(jià)各實(shí)施例聚合物(模塑制品)的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用促進(jìn)率(％)={(各試驗(yàn)中BrdU攝取的增加)/(對(duì)照試驗(yàn)中BrdU攝取的增加)}×100結(jié)果如表10所示。
表10

如表10所示，實(shí)施例1-4的聚合物都具有優(yōu)異的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)作用。實(shí)施例16制劑生產(chǎn)實(shí)施例片劑生產(chǎn)1實(shí)施例1化合物10g聚乙二醇6000 10g月桂基硫酸鈉 1.5g玉米淀粉 3g乳糖 25g硬脂酸鎂 0.5g稱重上述成分。將聚乙二醇6000加熱到70-80℃，并與實(shí)施例1的化合物、月桂基硫酸鈉、玉米淀粉和乳糖混合，然后冷卻。通過研磨機(jī)將固化的混合物造粒，得到顆粒。將該顆粒與硬脂酸鎂混合，然后壓片形成重250mg的片劑。片劑生產(chǎn)2實(shí)施例2化合物30g乳糖 55g土豆淀粉 12g聚乙烯醇 1.5g硬脂酸鎂 1.5g稱重上述成分。均勻混合實(shí)施例2的化合物、乳糖和土豆淀粉。將聚乙烯醇的水溶液加入該混合物中，并通過濕造粒將所得混合物制成顆粒。干燥該顆粒并與硬脂酸鎂混合。然后將該混合物壓片形成重200mg的片劑。膠囊的生產(chǎn)實(shí)施例3化合物10g乳糖 25g玉米淀粉 5g微晶纖維素 9.5g硬脂酸鎂 0.5g
稱重上述成分。將除硬脂酸鎂以外的四種成分均勻混合。加入硬脂酸鎂，然后進(jìn)一步混合各成分幾分鐘。以200mg/膠囊的量將混合物填充到1號(hào)硬膠囊中，形成膠囊。粉劑的生產(chǎn)實(shí)施例4化合物20g乳糖 79g硬脂酸鎂 1g稱重上述成分。將所有成分均勻混合形成20％的粉劑。栓劑的生產(chǎn)實(shí)施例2化合物 10g聚乙二醇150018g聚乙二醇400072g將實(shí)施例2的化合物在研缽中徹底研磨，得到細(xì)粉，通過熔融方法制成1g直腸用栓劑。注射液的生產(chǎn)實(shí)施例6化合物0.1g氯化鈉 0.9g氫氧化鈉 適量注射用水 100ml稱量上述成分。將三種成分溶于注射用水中，并通過過濾使溶液消毒。然后以5ml/安瓿的量將該溶液分配到10ml安瓿中。將安瓿熱封以形成注射液。
權(quán)利要求
1．在其結(jié)構(gòu)中具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的如下通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物式(1) 其中R1表示保護(hù)性基團(tuán)，或下式(2)-(5)中的任一個(gè)，其中R10表示氫原子、保護(hù)性基團(tuán)、或下式(6)-(8)中的任一個(gè)，且R11表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，條件是當(dāng)R10和R11各自為氫原子或保護(hù)性基團(tuán)時(shí)，R1可以相對(duì)于COOR4以反式或順式鍵合，式(2)-OR10式(3)-NHR11式(4)-CH2R12式(5)-SR11式(6) 式(7) 式(8) 或當(dāng)R10為式(6)-(8)中的任一個(gè)時(shí)，在式(6)-(8)中的R12-R28，除R13,R17和R26外，是相同或不同的且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，且R13,R17和R26各自表示疊氮基或下式(9)式(9) -NR29R30其中R29和R30是相同或不同的，且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，R2-R8是相同或不同的，且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，R9表示氫原子、保護(hù)性基團(tuán)或下式(10)或(11)式(10) 式(11) 其中R31-R37是相同或不同的，且各自表示氫原子或保護(hù)性基團(tuán)，以及n表示0-25的整數(shù)，條件是當(dāng)n為0時(shí)，R1為式(2)的基團(tuán)，R10為式(8)的基團(tuán)，且R9為式(10)或(11)的基團(tuán)，條件是在式(1),(6)-(8)和(10)-(11)中，保護(hù)性基團(tuán)是相同或不同的，且各自表示具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈烷基、具有2-8個(gè)碳原子的任選被取代的直鏈或支鏈鏈烯基、具有1-8個(gè)碳原子的任選被取代的?；?、任選被取代的芳族?；蛉芜x被取代的芳族烷基，除R13,R17和R26外，作為R2-R37的保護(hù)性基團(tuán)中的任何兩個(gè)可以一起形成具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的亞烷基、具有3-8個(gè)碳原子的任選被取代的環(huán)狀亞烷基、任選被取代的亞芐基或任選被取代的鄰苯二甲?；彤?dāng)n為2或更大時(shí)，R2-R8在各重復(fù)單元中可以是相同或不同的。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中n為0-10。
3．根據(jù)權(quán)利要求2的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R9為式(11)。
4．根據(jù)權(quán)利要求3的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R1為式(2)，且R10為式(6)。
5．根據(jù)權(quán)利要求3的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R1為式(2)，且R10為式(7)。
6．根據(jù)權(quán)利要求3的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R1為式(2)，且R10為式(8)。
7．根據(jù)權(quán)利要求4的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R13為式(9)。
8．根據(jù)權(quán)利要求5的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R17為式(9)。
9．根據(jù)權(quán)利要求6的具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物，其中R26為式(9)。
10．一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其特征在于包括解聚透明質(zhì)酸或其鹽的步驟。
11．根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其特征在于將酶用于解聚。
12．根據(jù)權(quán)利要求11的方法，其特征在于酶衍生于微生物。
13．根據(jù)權(quán)利要求12的方法，其特征在于微生物為Streptomyceshyalurolyticus。
14．根據(jù)權(quán)利要求10-13中任一項(xiàng)的方法，其特征在于解聚在基本不含鹽的溶液、基本不含非揮發(fā)性鹽的溶液或基本不含不溶于有機(jī)溶劑中的鹽的溶液中進(jìn)行。
15．根據(jù)權(quán)利要求10-14中任一項(xiàng)的方法，其特征在于包括通過陰離子交換色譜分級(jí)和提純解聚的物質(zhì)的步驟。
16．根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其特征在于使用基本僅含揮發(fā)性鹽作為鹽的洗脫液。
17．根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其特征在于該鹽為銨鹽。
18．根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其特征在于該銨鹽為乙酸銨。
19．根據(jù)權(quán)利要求15的方法，其特征在于使用基本僅含可溶于有機(jī)溶劑中的鹽的作為鹽的洗脫液。
20．根據(jù)權(quán)利要求19的方法，其特征在于該鹽為乙酸鹽。
21．根據(jù)權(quán)利要求20的方法，其特征在于乙酸鹽為乙酸銨或乙酸鈉。
22．一種藥物組合物，含有至少一種權(quán)利要求1的化合物作為活性成分。
23．一種抗血小板藥，含有至少一種權(quán)利要求1的化合物作為活性成分。
24．根據(jù)權(quán)利要求22的含有至少一種權(quán)利要求1的化合物的藥物組合物，用作治療和預(yù)防的藥物，所述藥物選自治療和預(yù)防血栓形成的藥物、治療和預(yù)防心血管疾病的藥物、治療和預(yù)防腦血管疾病的藥物以及治療和預(yù)防外周血管疾病的藥物。
25．一種血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑，含有權(quán)利要求1的化合物作為活性成分。
26．根據(jù)權(quán)利要求25的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑，含有下式(16)的化合物作為活性成分
27．根據(jù)權(quán)利要求25的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑，用作血管內(nèi)皮再生治療的治療藥或預(yù)防藥。
28．根據(jù)權(quán)利要求25的血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)促進(jìn)劑，用作血管生成治療的治療藥或預(yù)防藥。
29．聚合物，具有至少一種權(quán)利要求1的化合物作為側(cè)鏈結(jié)構(gòu)。
30．涂敷劑，含有至少一種權(quán)利要求1的化合物或權(quán)利要求29的聚合物作為活性成分。
31．模塑制品，使用至少一種權(quán)利要求29的聚合物作為材料。
32．模塑制品，使用至少一種權(quán)利要求30的涂敷劑生產(chǎn)。
33．人造器官，使用至少一種權(quán)利要求31或32的模塑制品作為組分。
34．權(quán)利要求32的人造器官，為體外循環(huán)型人造器官，或可植入的人造器官。
35．醫(yī)學(xué)裝置，使用至少一種權(quán)利要求31或32的模塑制品作為組分。
36．權(quán)利要求35的醫(yī)學(xué)裝置，為體外醫(yī)學(xué)裝置，連于體內(nèi)的體外醫(yī)學(xué)裝置或可植入的醫(yī)學(xué)裝置。
37．一種用于細(xì)胞培養(yǎng)的組合物，含有權(quán)利要求29的聚合物作為活性成分。
38．用于細(xì)胞培養(yǎng)的設(shè)備，使用權(quán)利要求31的模塑制品和/或權(quán)利要求30的涂敷劑生產(chǎn)。
全文摘要
1)在其結(jié)構(gòu)中具有葡糖醛酸衍生物和葡糖胺衍生物的如下通式(1)的化合物、該化合物的可藥用鹽和溶劑化物或該鹽的溶劑化物,2)一種制備化合物1)的方法,3)一種含有化合物1)的藥物組合物,4)具有至少一種化合物1)作為側(cè)鏈結(jié)構(gòu)的聚合物,5)含有化合物1)或聚合物作為活性成分之一的涂敷劑以及6)模塑制品、人造器官、醫(yī)學(xué)裝置和用于細(xì)胞培養(yǎng)的設(shè)備,其通過使用聚合物4)和/或涂敷劑5)生產(chǎn)。
文檔編號(hào)C08B37/08GK1303443SQ99806757
公開日2001年7月11日 申請(qǐng)日期1999年4月30日 優(yōu)先權(quán)日1998年4月30日
發(fā)明者八塚信明, 佐藤信行, 森山茂, 玉井忠和, 西川正純 申請(qǐng)人:嗎魯哈株式會(huì)社