荸薺皮提取荸薺乙素的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種荸薺乙素的提取分離方法，特別是涉及 一種從荸薺皮中提取分離荸薺乙素的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 荸養(yǎng)（Eleocharis tuberosa)，又稱馬蹄，屬莎草科多年生淺水草本植物荸養(yǎng)的地 下球莖，我國大部分地區(qū)都有栽培。其中，廣西荸薺產(chǎn)量占全國70%，賀州荸薺產(chǎn)量占廣西 70%。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，荸薺有抗菌、抗腫瘤、防治呼吸道疾病、利腸通便和利尿排淋等作用；臨 床上可用于治療咽喉疼痛、痰熱咳嗽、熱病煩渴、小便不利、痢疾等癥。研宄表明，荸薺的活 性物質(zhì)主要富集在果皮和果肉之間。在荸薺加工過程中，被丟棄的荸薺皮質(zhì)量約占新鮮荸 薺質(zhì)量的25%，資源非常豐富。我們在荸薺皮活性成分提取分離研宄中發(fā)現(xiàn)荸薺乙素，屬于 二氫黃酮化合物。荸薺乙素為圣草酚的衍生物。該化合物具有抗氧化、抗炎、鎮(zhèn)痛等多種藥 理活性以及調(diào)節(jié)心血管系統(tǒng)、保護(hù)神經(jīng)系統(tǒng)、利尿、改善糖尿病等作用，在食品上常用作飲 料、食品和酒類的抗氧化劑。荸薺乙素結(jié)構(gòu)特別，屬于圣草酚的苯并吡喃衍生物。該類衍生 物因具有顯著的抗HIV、抗腫瘤等活性而受到廣泛的關(guān)注。荸薺乙素存在于莎草科植物荸薺 的果皮中。荸薺乙素是從荸薺皮中分離得到新化合物。
[0003] 目前，未見從荸薺皮中提取分離荸薺乙素的文獻(xiàn)報(bào)道。經(jīng)中國公開專利檢索，沒有 發(fā)現(xiàn)與本專利申請相同的技術(shù)方案。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于：提出一種荸薺皮提取荸薺乙素的方法。
[0005] 荸薺乙素化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：
[0006]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種荸薺皮提取荸薺乙素的方法，包括提取、萃取；其特征在于：其具體步驟如下： (1) 將新鮮的荸薺皮風(fēng)干，粉碎，備用；以重量計(jì)，稱取荸薺皮粉末1份加入提取罐中， 每次加入4-10份70%體積百分比的丙酮水溶液，在25°C下浸泡24h，浸泡3次；過濾，合并 濾液，減壓濃縮至膏狀，獲得提取物； (2) 以重量計(jì)，取步驟（1)的提取物1份，分散在5份水中，制成懸濁液，每次加入5-10 份乙酸乙酯萃取，萃取3次，合并萃取液，減壓濃縮至干，得萃取物； (3) 以重量計(jì)，取步驟（2)的萃取物1份，加入甲醇至完全溶解，用2-4份聚酰胺拌樣， 將甲醇揮發(fā)至干，裝柱，連接MCI柱進(jìn)行中壓分離，以甲醇水溶液為流動相梯度洗脫，薄層 色譜法檢測，收集合并流動相濃度為70-90%體積百分比的洗脫液，減壓濃縮至干，得粗品 A； (4) 以重量計(jì)，取步驟（3)的粗品A1份，加入甲醇至完全溶解，加入2-4份聚酰胺拌樣， 將甲醇揮發(fā)干，轉(zhuǎn)入聚酰胺色譜柱進(jìn)行分離，用體積比為5:1-2:1的氯仿-甲醇溶液洗脫， 以石油醚：乙酸乙酯：甲酸=50:49:1的混合液作展開劑，用薄層色譜法檢測，收集合并R f 為〇. 7的洗脫液，減壓濃縮至干，得粗品B ; (5) 以重量計(jì)，取步驟（4)的粗品B1份，溶于4-8份甲醇中，加入等甲醇體積的水制成 懸濁液，用S印hadex LH-20凝膠色譜柱純化，用甲醇洗脫，以石油醚：乙酸乙酯：甲酸= 50:49:1的混合液作展開劑，用薄層色譜法檢測，收集合并&為0. 7的洗脫液，減壓濃縮，得 粗品C ; (6) 以重量計(jì)，取步驟（5)的粗品C1份，溶于2-5份甲醇中，以280nm為紫外檢測波 長，以62-68%體積百分比的甲醇水溶液為流動相，用4. 6mmX25cm的ZorbaxSB-C18柱 進(jìn)行高效液相色譜分析，用9. 4mmX25cm的ZorbaxSB-C18柱進(jìn)行半制備純化，按21. 38- 32. 51min的出峰時(shí)間，收集色譜峰中閥值不小于20mAU的洗脫液，減壓濃縮，即得產(chǎn)品。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（3)中的所述的MCI柱規(guī)格 為70X460mm，填充材料為MCI-gel CHP-20P，柱色譜條件為：柱壓為80Psi，流動相流速為 50mL/min，檢測波長為245nm ;所述的流動相為40-100%體積百分比的甲醇水溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟（4)中所述的聚酰胺規(guī)格為 200-300目；所用洗脫液為體積比為5:1-3:1的氯仿-甲醇溶液。
【專利摘要】本發(fā)明的荸薺皮提取荸薺乙素的方法，屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域。其特征在于，以丙酮水溶液為溶劑，粗提物用乙酸乙酯萃取后，經(jīng)中壓MCI柱色譜和聚酰胺柱色譜分離，然后用Sephadex LH-20凝膠和半制備型高效液相色譜制備，重結(jié)晶輔助純化，所得產(chǎn)品含量在95％以上。本發(fā)明利用廢棄的荸薺皮為原料提取分離得到荸薺乙素，分離效果好，產(chǎn)品純度高，使荸薺皮變廢為寶，所選用的層析材料MCI、聚酰胺、凝膠均可反復(fù)使用，原料易得，資源豐富，生產(chǎn)成本低，具有較好的應(yīng)用前景。
【IPC分類】C07D493-04
【公開號】CN104530069
【申請?zhí)枴緾N201410834868
【發(fā)明人】羅楊合, 李行任, 伍淑婕, 郭婷, 徐健存
【申請人】賀州學(xué)院
【公開日】2015年4月22日
【申請日】2014年12月29日