蘋果葉多酚的提取方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于植物活性成分提取技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及蘋果葉多酚的提取方法。
【背景技術(shù)】
[0002]蘋果葉為薔薇科植物蘋果的葉，性味苦寒，涼血解毒。我國(guó)是世界上最大的蘋果生產(chǎn)國(guó)，產(chǎn)量占世界總產(chǎn)量的40%，其中遼寧、河北、山西、陜西、甘肅、山東等為主要的蘋果產(chǎn)地，僅陜西一省的蘋果葉年產(chǎn)量就高達(dá)400萬(wàn)噸，大量蘋果葉掉落腐爛，造成資源的極大浪費(fèi)。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供一種蘋果葉多酚的提取方法，該方法制得的蘋果葉多酚純度高，收率大。
[0004]本發(fā)明提供的技術(shù)方案是提供一種蘋果葉多酚的提取方法，包括以下步驟:
[0005]I)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉；
[0006]2)用乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液；
[0007]3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液；
[0008]4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH值，然后上大孔樹(shù)脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，即為蘋果葉多酚。
[0009]上述步驟2)中，蘋果葉中含有蛋白質(zhì)和碳水化合物，采用乙醇為溶媒，不利于蛋白質(zhì)和碳水化合物的溶解，可減少雜質(zhì)成分的溶出，對(duì)后續(xù)純化有益。乙醇體積濃度為20?30%為佳，乙醇濃度過(guò)高會(huì)對(duì)蛋白質(zhì)產(chǎn)生凝聚作用，使得蛋白質(zhì)滯留在顆粒的內(nèi)部孔道中，反而增加蘋果葉多酚的擴(kuò)散阻力，降低終產(chǎn)品的收率。乙醇濃度過(guò)低則雜質(zhì)含量較大，影響終產(chǎn)品的純度。
[0010]上述步驟4)中，pH值至4?5。
[0011 ] 上述步驟4)中，乙醇的體積濃度為60?90 %。
[0012]上述步驟4)中，合并液的上樣流速為0.5BV/h ;水洗流速為2.5?3BV/h，水的洗脫量為5?6BV ;乙醇的洗脫流速為2?2.5BV/h，乙醇的洗脫量為4?5BV。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明制得的蘋果葉多酚純度在98%以上，收率在10%以上，且色澤較淺。
【具體實(shí)施方式】
[0014]以下具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡述，但不作為對(duì)本發(fā)明的限定。
[0015]實(shí)施例1
[0016]I)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉；
[0017]2)用20?30v%乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液；
[0018]3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液；
[0019]4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH至4?5值，然后上DA201大孔樹(shù)脂柱，上樣流速為0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速為2.5?3BV/h，水的洗脫量為5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脫，乙醇的洗脫流速為2?2.5BV/h，乙醇的洗脫量為4?5BV，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，即為11.1g蘋果葉多酚。經(jīng)HPLC檢測(cè)，成品中蘋果葉多酚的純度為98.2%。
[0020]實(shí)施例2
[0021]I)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉；
[0022]2)用20?30v%乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液；
[0023]3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液；
[0024]4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH至4?5值，然后上DA201大孔樹(shù)脂柱，上樣流速為0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速為2.5?3BV/h，水的洗脫量為5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脫，乙醇的洗脫流速為2?2.5BV/h，乙醇的洗脫量為4?5BV，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到10.5g蘋果葉多酚成品。經(jīng)HPLC檢測(cè)，成品中蘋果葉多酚的純度為98.0%。
[0025]實(shí)施例3
[0026]I)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉；
[0027]2)用20?30v%乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液；
[0028]3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液；
[0029]4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH至4?5值，然后上DM301大孔樹(shù)脂柱，上樣流速為0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速為2.5?3BV/h，水的洗脫量為5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脫，乙醇的洗脫流速為2?2.5BV/h，乙醇的洗脫量為4?5BV，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到10.Sg蘋果葉多酚成品。經(jīng)HPLC檢測(cè)，成品中蘋果葉多酚的純度為98.4%。
[0030]實(shí)施例4
[0031]I)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉；
[0032]2)用20?30v%乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液；
[0033]3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液；
[0034]4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH至4?5值，然后上DM301大孔樹(shù)脂柱，上樣流速為0.5BV/h，先水洗柱，水洗流速為2.5?3BV/h，水的洗脫量為5?6BV ;然后用60?90v%乙醇洗脫，乙醇的洗脫流速為2?2.5BV/h，乙醇的洗脫量為4?5BV，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，得到10.5g蘋果葉多酚成品。經(jīng)HPLC檢測(cè)，成品中蘋果葉多酚的純度為98.1%。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.蘋果葉多酚的提取方法，其特征在于:包括以下步驟: 1)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉； 2)用乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液； 3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液； 4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH值，然后上大孔樹(shù)脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，即為蘋果葉多酚。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果葉多酚的提取方法，其特征在于:步驟2)中，乙醇的體積濃度為20?30%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果葉多酚的提取方法，其特征在于:步驟4)中，pH值至4?5。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果葉多酚的提取方法，其特征在于:步驟4)中，乙醇的體積濃度為60?90%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘋果葉多酚的提取方法，其特征在于:步驟4)中，合并液的上樣流速為0.5BV/h ;水洗流速為2.5?3BV/h，水的洗脫量為5?6BV ;乙醇的洗脫流速為2?2.5BV/h，乙醇的洗脫量為4?5BV。
【專利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種蘋果葉多酚的提取方法，包括以下步驟：1)取蘋果葉清洗干凈，干燥，粉碎，得到蘋果葉干粉；2)用乙醇對(duì)蘋果葉干粉進(jìn)行超聲浸提，離心，收集上清液，減壓回收乙醇，得到粗提液；3)將粗提液經(jīng)孔徑為3000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第一次流出液，將第一次濃縮液過(guò)20000道爾頓的膜過(guò)濾裝置，收集第二次濃縮液；4)將第一次流出液和第二次濃縮液合并，調(diào)整pH值，然后上大孔樹(shù)脂柱，先水洗柱，然后乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，減壓濃縮，干燥，即為蘋果葉多酚。本方法制得的蘋果葉多酚純度高，收率大。
【IPC分類】C07G99-00
【公開(kāi)號(hào)】CN104530142
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410715237
【發(fā)明人】周冠旻
【申請(qǐng)人】桂林市和胤祥新型材料有限公司
【公開(kāi)日】2015年4月22日
【申請(qǐng)日】2014年11月28日