由泰樂(lè)菌素發(fā)酵物濾液直接合成替米考星的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種由泰樂(lè)菌素發(fā)酵物濾液直接合成替米考星的方法，屬于生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]替米考星(Tilmicosin)是一種較新的由泰樂(lè)菌素半合成的大環(huán)內(nèi)酯類畜禽專用抗生素，八十年代由英國(guó)Elanco動(dòng)物保健品公司開(kāi)發(fā)成功。由于其特殊的抗菌活性和藥動(dòng)學(xué)特征，該藥已被批準(zhǔn)臨床用于牛、山羊、綿羊、奶牛、豬、雞等動(dòng)物感染性疾病的防治，特別是畜禽呼吸道疾病，如家畜放線桿菌性胸膜肺炎、巴氏桿菌病和雞霉形體病等及泌乳動(dòng)物乳房炎的治療。但傳統(tǒng)合成工藝是由磷酸泰樂(lè)菌素開(kāi)始合成，生產(chǎn)成本較高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題在于在于克服替米考星的現(xiàn)有工藝中的不足之處，設(shè)計(jì)一種提取收率高，環(huán)境污染少以及成本低廉的合成方法。
[0004]本發(fā)明提供了一種由泰樂(lè)菌素發(fā)酵物濾液直接合成替米考星的方法，該方法包括下列步驟:
(一)發(fā)酵液預(yù)處理
1.發(fā)酵液加入1%硅聚合氯化鋁處理后，板框過(guò)濾，待濾液較少流出時(shí)，向板框里頂水洗濾餅。
[0005]2.頂洗至濾液效價(jià)500，停止頂洗。
[0006]3.壓榨至基本沒(méi)有濾液流出。
[0007]( 二 )除雜
1.用截留分子量20000的陶瓷膜進(jìn)行除雜操作。
[0008]2.待濾液剩余原濾液體積的10%時(shí)，向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
3.繼續(xù)除雜操作
4.待濾液又剩余原濾液體積的10%時(shí)，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
5.繼續(xù)除雜操作
6.待濾液又剩余原濾液體積的10%時(shí)，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
7.繼續(xù)除雜操作至慮出液效價(jià)低于500。
[0009]8.放掉剩余殘留雜質(zhì) 9.清洗陶瓷膜系統(tǒng)。
[0010](三)濃縮
1.用截留分子量300?500的納濾膜進(jìn)行濃縮操作。
[0011]2，打開(kāi)物料進(jìn)料閥，待分離料液進(jìn)入物料罐，使罐內(nèi)料液能夠滿足連續(xù)分離時(shí)的流量值和緩沖體積。打開(kāi)料分離管道上所有閥門(mén)，使液體能夠流經(jīng)閥、泵、浮子流量計(jì)流到濃縮罐。低頻率啟動(dòng)保安泵和輸料泵(若有)，并調(diào)節(jié)頻率控制電磁流量計(jì)滿足設(shè)定值，物料流過(guò)進(jìn)料管至濃縮液罐(此時(shí)應(yīng)為系統(tǒng)內(nèi)的存水)。
[0012]3，當(dāng)物料流動(dòng)穩(wěn)定后，逐級(jí)打開(kāi)進(jìn)入組件的閥門(mén)，使物料進(jìn)入膜組件，同時(shí)低頻率啟動(dòng)組件循環(huán)泵。在滿足內(nèi)外循環(huán)流量的前提下調(diào)節(jié)各泵頻率和調(diào)壓閥，使濾液從滲透液管中透出，流經(jīng)浮子流量計(jì)和轉(zhuǎn)換閥，流到濾液罐。物料罐內(nèi)液面下降時(shí)需及時(shí)補(bǔ)充保持液面高度，直至待分離物料全部加完。
[0013]4，溶液開(kāi)始濃縮，繼續(xù)調(diào)節(jié)各泵頻率和調(diào)壓閥，使濾液流量滿足設(shè)定值(當(dāng)壓力達(dá)到設(shè)計(jì)值而濾液流量未達(dá)到時(shí)，以壓力值為操作點(diǎn))。
[0014]5，系統(tǒng)正在濃縮，排出滲透液及濃縮液，直至被分離物料過(guò)濾完成，關(guān)機(jī)停止運(yùn)行。
[0015]6，當(dāng)濃縮結(jié)束時(shí)，打開(kāi)清洗進(jìn)水閥并啟動(dòng)清洗泵，停止保安泵和進(jìn)料泵(若有) 并關(guān)閉進(jìn)料閥，用CIP罐內(nèi)的純水將系統(tǒng)中的濃縮液頂出系統(tǒng)至物料罐中
7，當(dāng)系統(tǒng)內(nèi)濃縮液已被頂出系統(tǒng)，閥門(mén)轉(zhuǎn)入水循環(huán)狀態(tài)。
[0016]8，當(dāng)系統(tǒng)中的濃縮液尚未頂凈，而CIP罐內(nèi)的純水不足時(shí)，要及時(shí)補(bǔ)充純水，防止空氣進(jìn)入系統(tǒng)中。
[0017](四)轉(zhuǎn)相
將醋酸丁酯，液堿，濃縮液經(jīng)混合器混合后，PH在10.5?11.0，直接進(jìn)入碟片式分離機(jī)，收集丁酯相，水洗后干燥。
[0018](五)胺化反應(yīng)
在醋酸丁酯相中，攪拌狀態(tài)下加入定量的3，5—二甲基哌啶和甲酸。然后保持該溫度攪拌反應(yīng)2小時(shí)，取樣經(jīng)HPLC分析。泰樂(lè)菌素含量< 1.5%視為反應(yīng)完全，將反應(yīng)液降溫到22?26如果泰樂(lè)菌素含量>1.5%，則繼續(xù)保溫反應(yīng)，多次取樣分析，直到泰樂(lè)菌素含量〈1.5%為止。氨化結(jié)束，加入藥用活性炭，脫色40分鐘，經(jīng)鈦棒過(guò)濾器過(guò)濾。
[0019](六)水解反應(yīng)
攪拌狀態(tài)下，向濃縮液中緩慢滴加15%的鹽酸調(diào)PH值，溫度保持在20?25 '調(diào)好pH后緩慢升溫至60°C，保溫反應(yīng)4小時(shí)，取樣經(jīng)液相分析。如果泰樂(lè)菌素B組分氨化物含量^ 1.5% (峰面積計(jì))，則繼續(xù)保持60°C反應(yīng)，直到泰樂(lè)菌素B組分氨化物含量小于1.5%然后把反應(yīng)液降到22?26
[0020](七)結(jié)晶離心
保持22?26 ，攪拌狀態(tài)下滴加氫氧化鈉溶液，調(diào)節(jié)pH值至有少量結(jié)晶物出現(xiàn)，保溫20分鐘，繼續(xù)滴加液堿至ρΗΙΟ.5?11.0，調(diào)好pH后保溫?cái)嚢?0分鐘，經(jīng)轉(zhuǎn)鼓離心機(jī)離心分離，然后用純化水洗滌，甩干，晶體烘干后粉碎包裝。
[0021]本發(fā)明的有益好處是:合成效果好，產(chǎn)品純度高，收率高，可以大量減少有機(jī)溶劑的使用，降低了生產(chǎn)成本，減輕了環(huán)保壓力，適合于規(guī)?；I(yè)生產(chǎn)。
[0022]【具體實(shí)施方式】:
一，發(fā)酵液預(yù)處理
1.發(fā)酵液加入1%硅聚合氯化鋁處理后，板框過(guò)濾，待濾液較少流出時(shí)，向板框里頂水洗濾餅。
[0023]2.頂洗至濾液效價(jià)500，停止頂洗。
[0024]3.壓榨至基本沒(méi)有濾液流出。
[0025]二，除雜
1.用截留分子量20000的陶瓷膜進(jìn)行除雜操作。
[0026]2.待濾液剩余原濾液體積的10%時(shí)，向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
3.繼續(xù)除雜操作
4.待濾液又剩余原濾液體積的10%時(shí)，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
5.繼續(xù)除雜操作
6.待濾液又剩余原濾液體積的10%時(shí)，再向剩余濾液中加入原濾液10%的清水
7.繼續(xù)除雜操作至慮出液效價(jià)低于500。
[0027]8.放掉剩余殘留雜質(zhì) 9.清洗陶瓷膜系統(tǒng)。
[0028]三，濃縮
1.用截留分子量300?500的納濾膜進(jìn)行濃縮操作。
[0029]2.打開(kāi)物料進(jìn)料閥，待分離料液進(jìn)入物料罐，使罐內(nèi)料液能夠滿足連續(xù)分離時(shí)的流量值和緩沖體積。打開(kāi)料分離管道上所有閥門(mén)，使液體能夠流經(jīng)閥、泵、浮子流量計(jì)流到濃縮罐。低頻率啟動(dòng)保安泵和輸料泵(若有)，并調(diào)節(jié)頻率控制電磁流量計(jì)滿足設(shè)定值，物料流過(guò)進(jìn)料管至濃縮液罐(此時(shí)應(yīng)為系統(tǒng)內(nèi)的存水)。
[0030]3.當(dāng)物料流動(dòng)穩(wěn)定后，逐級(jí)打開(kāi)進(jìn)入組件的閥門(mén)，使物料進(jìn)入膜組件，同時(shí)低頻率啟動(dòng)組件