明的實施方式，在封閉系統(tǒng)內擴增/生長細胞以及濃縮細胞的過程。流程1200起始于開始操作1204，并且繼續(xù)進行至步驟1208，在步驟1208中，細胞被加載至細胞擴增系統(tǒng)中。細胞可被加載至流體中，該流體攜帶進入細胞生長腔室中。如上參照CES100、CES500、CES600所述，CES可具有多個組件，其包括流體流動組件，諸如閥、泵、傳感器、空氣去除腔室、氣體運輸模塊等。步驟1208可涉及CES的這些組件的一個或多個的運行。
[0244]流程1200從1208開始進行至步驟1212。在步驟1212中，細胞在細胞生長腔室中擴增，細胞生長腔室為CES的一部分。步驟1212也可涉及CES的多個部件的運行。例如，不同的流體可循環(huán)遍及CES，包括細胞生長腔室。流體可含有用于促進細胞生長的營養(yǎng)物。
[0245]在步驟1212之后，流程進行至步驟1216。在步驟1216中，在未暴露至周圍環(huán)境的情況下，將細胞從細胞生長腔室中移除。在實施方式中，細胞被移除在穿過細胞生長腔室循環(huán)的流體中。步驟1112可涉及使用封閉CES(例如，CES100、CES500和CES600)的一部分的泵、閥或其它流體流動控制裝置，引導流體排出可為封閉CES的一部分的細胞生長腔室。在一些實施方式中，從細胞生長腔室移除細胞可涉及使用釋放劑，以釋放可能粘附至生長腔室的細胞。如本領域技術人員可能知曉的，一些細胞類型為貼壁細胞并且在其粘附至表面諸如細胞生長腔室中的中空纖維時進行生長。因此，在將流體中的細胞移出細胞生長腔室之前，步驟1216可涉及多個步驟。
[0246]在步驟1220，在其未暴露至周圍環(huán)境的情況下，使從細胞生長腔室移除的含有細胞的流體再次循環(huán)穿越TFF。步驟1220也可通過泵、閥或封閉CES (例如，CES100、CES500和CES600)的其它組件進行，可將離開細胞生長腔室的流體的流動引導至TFF。
[0247]步驟1220的結果是得到兩種濃縮的流體組分。第一濃縮的細胞組分包括在步驟1216中從細胞生長腔室移除的細胞。第二濃縮的流體組分包括其它組分。
[0248]步驟1228為可選步驟，其涉及調節(jié)濃縮的流體組分或濃縮的細胞組分之一，并且可在流體組分未暴露至周圍環(huán)境的情況下進行。在一些實施方式中，當流體循環(huán)穿越TFF時，步驟1228可在步驟1220期間進行。在其它實施方式中，步驟1228可在步驟1220后進行。在又一實施方式中，步驟1228可涉及多個步驟，這些步驟可在步驟1220期間和在步驟1220之后進行。
[0249]在實施方式中，步驟1228的調節(jié)可涉及加入用于各種目的的材料。例如，在濃縮的細胞組分被冷凍之前，可將材料加入到濃縮的細胞組分中作為防凍保護劑。在其它實施方式中，在步驟1120中加入的材料可使得會影響濃縮的細胞組分中的細胞有效性的組分失活，諸如加入蛋白以使胰蛋白酶失活，胰蛋白酶在一些實施方式可用作細胞釋放劑。在另一實施方式中，材料可調節(jié)濃縮的細胞組分以用于治療或研宄的目的，諸如通過加入防腐劑。
[0250]在另一實施方式中，調節(jié)步驟1228可涉及洗滌步驟。在這些實施方式中，在步驟1228中加入的材料是移除或稀釋組分的材料。在一個實例中，可在步驟1228期間加入溶劑，其可步驟1220的同時進行。溶劑可溶解組分并且攜帶該組分溶質穿越TFF的膜而進入流體并且排出將被濃縮的細胞組分。在其它實施方式中，溶劑也可不溶解組分，而仍然攜帶組分跨過TFF的膜。
[0251]在可選步驟1232中，在濃縮的細胞組分未暴露至周圍環(huán)境的情況下，步驟1220中產(chǎn)生的濃縮的細胞組分被再循環(huán)至TFF。可進行步驟1124以進一步濃縮在濃縮的細胞組分中的細胞，并且可利用可為CES的一部分的泵、閥或其它流體流動控制裝置進行。
[0252]在一個實施方式中，步驟1232可作為步驟1228的洗滌步驟的一部分進行。在該實施方式中，重復步驟1220、步驟1228和步驟1232，也就是說，在1228中加入洗滌材料(例如，溶劑或稀釋劑)；在1232，具有洗滌材料的濃縮的流體被再循環(huán)回到TFF ;以及進行步驟1220以移除可含有從濃縮的流體中移除的組分的至少一些洗滌材料。這僅為一個實例，并且步驟1232可獨立于任何洗滌步驟進行。
[0253]在步驟1236，收集濃縮的流體組分，該濃縮的流體組分可選地已經(jīng)經(jīng)過了洗滌或調節(jié)。該收集在未暴露至周圍環(huán)境的情況下進行。
[0254]最后，圖13例示了基本計算系統(tǒng)1300的示例性部件，在計算系統(tǒng)1300上可執(zhí)行本公開的實施方式。在實施方式中，可使用計算系統(tǒng)1300，例如，在細胞擴增系統(tǒng)使用處理器執(zhí)行任務，諸如作為上述過程(諸如過程1100和1200)的一部分執(zhí)行的定制任務和預編程任務。例如，預編程任務可包括“濃縮和移除細胞產(chǎn)物”或“濃縮和移除細胞”。
[0255]計算系統(tǒng)1300可包括用戶界面1302，處理系統(tǒng)1304和/或存儲器1306。如本領域技術人員所理解的，用戶界面1302可包括輸出裝置1308和/或輸入裝置1310。輸出裝置1308可包括一個或多個觸摸屏，其中，觸摸屏可包括提供一個或多個應用窗口的顯示區(qū)域。觸摸屏也可包括輸入裝置1310，其例如可接收和/或捕獲用戶或操作者的物理觸摸事件。如本領域技術人員所理解的，觸摸屏可包括具有電容結構的液晶顯示器(LCD)，其允許處理系統(tǒng)1304演繹出觸摸事件的位置。隨后，處理系統(tǒng)1304可將觸摸事件的位置映射到應用窗口預定位置中顯示的Π元件。根據(jù)實施方式，觸摸屏也可通過一個或多個其它電子結構接收觸摸事件。其它輸出裝置1310可包括打印機、揚聲器等。如本領域技術人員所理解的，其它輸入裝置1308可包括鍵盤、其它觸摸輸入裝置、鼠標、語音輸入裝置等。
[0256]根據(jù)本公開的實施方式，處理系統(tǒng)1304可包括處理單元1312和/或存儲卡1314。處理單元1312可為通用處理器，可操作地執(zhí)行在存儲卡1314中存儲的指令。根據(jù)實施方式，處理單元1312可包括單個處理或多個處理器。進一步地，在實施方式中，每個處理器可為具有一個或多個核的多核處理器，以讀取和執(zhí)行獨立的指令。如本領域技術人員所理解的，處理器可包括通用處理器、專用集成電器(ASIC)、現(xiàn)場可編程門陣列(FPGA)、其它集成電路等。
[0257]根據(jù)實施方式，存儲卡1314可包括任意的用于數(shù)據(jù)的短期存儲器或長期存儲器，和/或可執(zhí)行的指令的處理器。如本領域技術人員所理解的，存儲卡1314可包括，例如隨機存取存取卡(RAM)、只讀存儲卡(ROM)或電可擦除可編程只讀存儲卡(EEPROM)。如本領域技術人員所理解的，其它存儲介質可以包括，例如，CD-ROM、磁帶、數(shù)字多功能盤(DVD)或其它光存儲器，磁帶、磁盤存儲、磁帶、其它磁存儲裝置等。
[0258]存儲器1306可為任意的長期數(shù)據(jù)存儲裝置或組件。根據(jù)實施方式，存儲器1306可包括一個或多個與存儲卡1314相關聯(lián)的系統(tǒng)。存儲器1306可為永久的或可擦除的。在實施方式中，存儲器1306存儲由處理系統(tǒng)1304產(chǎn)生或提供的數(shù)據(jù)。
[0259]對于本領域技術人員明顯的是，可對本文所述的裝置、系統(tǒng)和方法進行各種修改。因此，應當理解的是，實施方式并不用于限制說明書中所討論的主題。此外，本公開用于覆蓋修改、變體和/或等價體。作用、特征、結構和/或介質所公開的為用于實施權利要求的例示性實施方式。
[0260]在本文中，各種組件可被稱為“可操作地相聯(lián)”。如本文所使用的，“可操作地相聯(lián)”是指以能夠操作的方式連接在一起的部件，并且涵蓋組件之間直接聯(lián)接的實施例，以及在兩個相連的部件之間放置有額外的部件的實施方式。
[0261]前述討論的一個或多個本發(fā)明以解釋和說明的目的來呈現(xiàn)。上文并不用于將一個或多個本發(fā)明限制為所公開的一個或多個形式。該公開的方法并不被解釋為反映其中所要求保護的發(fā)明需要多個未記載在每個權利要求中特征的發(fā)明。此外，如下文權利要求所反映的，創(chuàng)造性方面較小地依賴于在前述的單一實施方式的所有特征。因此，將后附權利要求并入到該詳細說明中，其中每個權利要求代表一個或多個本發(fā)明的獨立的實施方式。
[0262]此外，盡管一個或多個本發(fā)明的描述已經(jīng)包括在一個或多個實施方式的描述中以及某些變型和修改中，其它變型或修改也在本發(fā)明的范圍內(例如，在理解本公開之后，其可包含在本領域的技能和知識的范圍內)。在不用于向公眾貢獻任何可專利性的主題的情況下，其用于獲得在一定范圍內允許的替代實施方式的權利，這些替代實施方式包括所包括的權利的可替代地、可互換的和/或等價的結構、功能、范圍或步驟，而無論這些可替代地、可互換的和/或等價的結構、功能、范圍或步驟是否被本文所公開。
[0263]對于本領域技術人員明顯的是，在不脫離本發(fā)明的范圍下，可對本文所述的方法和結構進行各種修改。因此，應當理解的是，實施方式并不用于限制說明書中所討論的主題。此外，本發(fā)明用于覆蓋在所附權利要求和它們等價的范圍內的修改和變體。
【主權項】
1.一種從細胞生長腔室內循環(huán)的流體中濃縮組分的方法，所述方法包括: 使細胞在細胞生長腔室內擴增； 利用第一流體，從所述細胞生長腔室內移除擴增的細胞； 使具有所述擴增的細胞的第一流體循環(huán)穿越與所述細胞生長腔室流體相連的切向流過濾器，以產(chǎn)生濃縮的流體組分和濃縮的細胞組分；以及將所述濃縮的流體組分的至少一部分收集在容器中。
2.一種從細胞生長腔室內循環(huán)的流體中濃縮組分的方法，所述方法包括: 使流體在細胞生長腔室內循環(huán)，其中，所述細胞生長腔室含有細胞； 從所述細胞生長腔室內移除第一流體； 使所述第一流體循環(huán)穿越與所述細胞生長腔室流體相連的切向流過濾器，以產(chǎn)生濃縮的流體組分；以及 將所述濃縮的流體組分的至少一部分收集在容器中。
3.根據(jù)權利要求1所述的方法，進一步包括: 使所述濃縮的細胞組分再循環(huán)穿越所述切向流過濾器，以濃縮在所述濃縮的細胞組分中的細胞。
4.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的方法，進一步包括: 在使所述第一流體循環(huán)穿越所述切向流過濾器之前，將第二流體加入至所述第一流體中。
5.根據(jù)權利要求1或3所述的方法，進一步包括: 在使所述濃縮的細胞組分再循環(huán)穿越所述切向流過濾器之前，將第二流體加入至所述濃縮的細胞組分中。
6.根據(jù)權利要求1、3或5所述的方法，其中，所述細胞生長腔室和所述切向流過濾器為封閉系統(tǒng)的一部分。
7.根據(jù)權利要求1、3、5或6所述的方法，其中，進行所述再循環(huán)，直至在所述濃縮的細胞組分中達到預定濃度的細胞。
8.根據(jù)權利要求1、3、5、6或7所述的方法，進一步包括: 將所述濃縮的細胞組分引回至所述細胞生長腔室中。
9.根據(jù)權利要求1、3、5、6、7或8所述的方法，其中，所述擴增包括: 使第一流體介質在所述細胞生長腔室中的內毛細管空間中循環(huán)；以及 使第二流體介質循環(huán)至所述細胞生長腔室中的外毛細管空間中，其中，所述外毛細管空間與氧合器流體連通。
10.根據(jù)權利要求1、3、5、6、7、8或9所述的方法，其中，所述擴增包括: 利用所述氧合器給所述第二流體介質充氧。
11.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述細胞生長腔室包括中空纖維膜 目.ο
12.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述切向流過濾器包括中空纖維膜 目.0
13.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的方法，其中，所述氧合器包括中空纖維膜裝置。
14.一種用于擴增多個細胞的系統(tǒng)，所述系統(tǒng)包括: 細胞生長腔室，所述細胞生長腔室包括: 至少具有相對兩端部的第一流體流動路徑，所述第一流體流動路徑的第一相對兩端部與中空纖維膜的第一端口流體相連，并且所述第一流體流動路徑的第二端部與所述中空纖維膜的第二端口流體相連，其中，所述第一流體流動路徑包括所述中空纖維膜的內毛細管部分；以及 至少具有相對兩端部的第二流體流動路徑，所述第二流體流動路徑的第一相對兩端部與所述中空纖維膜的第三端口流體相連，并且所述第二流體流動路徑的第二端部與所述中空纖維膜的第四端口流體相連，其中，所述第二流體流動路徑包括所述中空纖維膜的外毛細管部分； 切向流過濾器，所述切向流過濾器與所述細胞生長腔室的第一流體路徑流體相連；以及 第一泵，所述第一泵用于使流體在所述細胞生長腔室的第一流體流動路徑中循環(huán)。
15.根據(jù)權利要求14的系統(tǒng)，進一步包括: 氧合器，所述氧合器與所述第二流體流動路徑流體相連。
16.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的系統(tǒng)，進一步包括: 第二泵，所述第二泵用于使流體在所述細胞生長腔室的第二流體流動路徑中循環(huán)。
17.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的系統(tǒng)，其中，所述細胞生長腔室包括中空纖維膜 目.ο
18.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的系統(tǒng)，其中，所述切向流過濾器包括中空纖維膜 目.0
19.根據(jù)前述權利要求中任一項所述的系統(tǒng)，其中，所述氧合器包括中空纖維膜裝置。
【專利摘要】本發(fā)明描述了一個或多個實施方式，該實施方式涉及了用于濃縮穿過細胞生長腔室，諸如細胞生長腔室循環(huán)的流體的組分的方法和系統(tǒng)。相應的，實施方式包括利用切向流過濾器濃縮流體的組分的方法和系統(tǒng)，該流體在實施方式中含有擴增的細胞。在實施方式中，通過使含有擴增的細胞的流體流過切向流過濾器，產(chǎn)生濃縮的流體組分和濃縮的細胞組分?？墒?jié)饪s的細胞組分再循環(huán)至切向流過濾器，以達到一些期望濃度的細胞?？墒占瘽饪s的細胞組分，以利用在濃縮的流體組分中的細胞產(chǎn)生的成分。
【IPC分類】C12M1-00, B01D61-14, C12M1-12
【公開號】CN104583386
【申請?zhí)枴緾N201380043369
【發(fā)明人】布萊恩·J·南柯維斯, 托馬斯·G·迪羅倫佐, 邁克爾·E·肯奇, 馬克·E·瓊斯
【申請人】泰爾茂比司特公司
【公開日】2015年4月29日
【申請日】2013年8月20日
【公告號】EP2885392A1, US20140051167, WO2014031690A1