一種高純度鉤藤堿單體的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于中藥活性成分分離純化技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高純度鉤藤堿單體的 制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 鉤藤為茜草科植物鉤藤Uncariarhynchophylla(Miq. )Miq.exHavil，大葉鉤藤 11.111&(31'〇卩117113此11.，毛鉤藤11.11；^811七3]^￥；[1.，華鉤藤11.8；[11611818(01；[￥.)]^￥；[1.，或無(wú) 柄果鉤藤U.sessilifructusRoxb.的干燥帶鉤莖枝。鉤藤性微寒，味甘，歸肝、心包經(jīng)，可 清熱平肝，熄風(fēng)定驚，具有清熱鎮(zhèn)驚、平肝熄風(fēng)的功效，藥理研宄表明鉤藤具有顯著的降壓 作用。
[0003] 鉤藤中主要有效成分為生物堿。其中鉤藤堿占總堿的28. 9%，毒性低，副作用小， 具有良好的藥用療效。近年來(lái)其藥理研宄報(bào)道大致可分為以下幾個(gè)方面：
[0004] 1、對(duì)心腦血管系統(tǒng)的藥理作用：降壓作用、抗心律失常、對(duì)腦缺氧缺血的保護(hù)作 用、逆轉(zhuǎn)心肌重構(gòu)等。
[0005] 2、對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)的作用：鎮(zhèn)靜、抗驚厥、抗癲癇、對(duì)腦的保護(hù)、對(duì)神經(jīng)細(xì)胞等的作 用。
[0006] 3、對(duì)血液系統(tǒng)的作用：鉤藤堿有明顯的抗血小板聚集和抗血栓形成的作用。
[0007] 4、抗癌作用。
[0008]目前國(guó)內(nèi)外多采用萃取、硅膠柱色譜和制備液相等傳統(tǒng)方法分離純化鉤藤堿單 體，過(guò)程復(fù)雜、分離效率低、分離時(shí)間長(zhǎng)、溶劑消耗量大。在我國(guó)，鉤藤的開(kāi)發(fā)利用主要是制 成鉤藤片、鉤藤茶口服液等單方制劑，或鉤藤與天麻等多種中藥組成的復(fù)方制劑。中國(guó)專(zhuān)利 CN102311435A、CN102093359A等中描述的技術(shù)得到的產(chǎn)品均只是一種鉤藤堿單體，目前尚 未見(jiàn)到同時(shí)制備出兩種高純度鉤藤堿單體的報(bào)道。
[0009] 基于上述情況，我們發(fā)明了高純度鉤藤堿單體的分離制備技術(shù)，采用硅膠柱色譜 進(jìn)行富集，然后利用pH區(qū)帶精制逆流色譜技術(shù)一步分離就可得到純度大于96%的鉤藤堿 和去氫鉤藤堿單體。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟： a、 將鉤藤堿提取物上樣于硅膠柱色譜，采用鹵代烷烴-醇系統(tǒng)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液， 濃縮，得鉤藤堿粗品； b、 量取惰性溶劑、酯、醇和水，混合后，得分離溶劑；將所述鉤藤堿粗品用加有三乙胺溶 液的所述分離溶劑進(jìn)行溶解，得鉤藤堿粗品溶解液；所述分離溶劑靜置分層，上層液加入三 乙胺溶液備用，下層液加入鹽酸溶液備用；將所述鉤藤堿粗品溶解液上樣于高速逆流色譜 儀，以加有三乙胺溶液的上層液作為固定相，加有鹽酸溶液的下層液作為流動(dòng)相，對(duì)所述鉤 藤堿粗品溶解液進(jìn)行分離純化，即分別得鉤藤堿和去氫鉤藤堿。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，所述步驟a中 鹵代烷烴-醇系統(tǒng)，鹵代烷烴選自四氯化碳、三氯甲烷或二氯甲烷中的一種，或它們?nèi)我鈨?個(gè)的混合物；醇選自甲醇或乙醇中一種。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，在采用鹵代 燒徑-醇系統(tǒng)進(jìn)彳丁洗脫時(shí)，按體積比，依次米用氣仿 -甲醇比例為50: 1、30: 1、20: 1、10:1來(lái) 進(jìn)行洗脫。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，所述步驟b中 惰性溶劑選自石油醚、環(huán)己烷或正己烷中的一種，或它們的任意兩個(gè)的混合物；所述步驟b 中酯選自乙酸乙酯；所述步驟b中醇選自甲醇、乙醇或異丙醇中的一種，或它們的任意兩個(gè) 的混合物。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，所述步驟b中 分離溶劑由惰性溶劑：酯：醇：水的體積比為1. 5-3. 5:5-7:2-4:7-11進(jìn)行混合后制得。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，所述步驟a中 鉤藤堿提取物由鉤藤經(jīng)乙醇提取，濃縮制得。
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，在所述濃縮 得浸膏后，還包括將浸膏用水溶解，調(diào)節(jié)pH為9~10,再用氯仿萃取，將氯仿萃取液濃縮，得 鉤藤堿提取物。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，所述乙醇的 質(zhì)量百分比濃度為90%以上的乙醇溶液；所述提取的次數(shù)為1~5次，提取的時(shí)間為1~5 小時(shí)，提取的方式采用回流提取或浸提的方式來(lái)進(jìn)行。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，其特征在于，所述乙醇的 質(zhì)量百分比濃度為95%的乙醇溶液；所述提取的次數(shù)為3次，提取的時(shí)間為1~2小時(shí)。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種高純度鉤藤堿單體的制備方法，屬于中藥活性成分分離純化技術(shù)領(lǐng)域。它包括以下步驟a、將鉤藤堿提取物上樣于硅膠柱色譜，采用鹵代烷烴-醇系統(tǒng)進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，濃縮，得鉤藤堿粗品；b、將所述鉤藤堿粗品溶解液上樣于高速逆流色譜儀，即分別得鉤藤堿和去氫鉤藤堿單體。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：能有效制備出純度在96％以上的鉤藤堿和去氫鉤藤堿兩種單體。
【IPC分類(lèi)】C07D471-20
【公開(kāi)號(hào)】CN104628725
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510042326
【發(fā)明人】張清海, 林昌虎, 譚紅, 林紹霞, 洪江, 羅文敏, 蔣影, 張繼東, 宋光林
【申請(qǐng)人】貴州省分析測(cè)試研究院
【公開(kāi)日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2015年1月28日