抗病毒藥物及其藥物組合物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種抗病毒藥物及其藥物組合物，具體涉及抗人類免疫缺乏病毒 (HIV)的藥物及其藥物組合物，特別是涉及一種可作為逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶抑制劑的藥物，該 逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶抑制劑具有式I所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
【背景技術(shù)】
[0002] 人類免疫缺乏病毒（HIV)是一種導(dǎo)致AIDS及其相關(guān)病變的病原性反轉(zhuǎn)錄病毒。 由于HIV的發(fā)現(xiàn)，對(duì)抗AIDS的抗病毒化學(xué)療法的發(fā)展已成為積極研究重點(diǎn)。有關(guān)AIDS 的分子目標(biāo)的研究參見Mitsua等人的文獻(xiàn)（Science, 1990,pp. 1533-154)。HIV蛋白酶 (HIVPR)及天門冬胺酰基蛋白酶首先被克拉瑪（Kramer)等人（Science231，1580(1986)) 認(rèn)為是AIDS療法的可能目標(biāo)。從此以后，即廣泛地確認(rèn)HIVPR抑制劑在治療AIDS時(shí)作 為有效制劑的潛在用途，有關(guān)HIVPR的醫(yī)療用途參見托馬希里（Tomaselli)等人的文獻(xiàn) (〇1址。&，(^81，1991年5月，口口.6-27)及1?.胡弗〇11^〇等人的文獻(xiàn)〇.]^(1.〇16111.34， 2341-2327(1991))。在傳統(tǒng)模擬天門冬胺?；鞍酌傅倪^渡狀態(tài)中，羥基乙烯、二羥基乙 烯、羥基乙胺和次膦酸電子等排物（Bostere)似乎和HIVPR具有最大親合力。許多HIVPR 的抑制劑已在不同細(xì)胞系統(tǒng)中，在毫微摩爾范圍的濃度呈現(xiàn)抗病毒活性，且已說明在專利 文獻(xiàn)中。
[0003] HIV蛋白酶在病毒復(fù)制過程中的主要作用是將gag和gag-pol基因產(chǎn)物裂解成病 毒成熟所需要的結(jié)構(gòu)蛋白（基質(zhì)、殼、核殼）和酶類（蛋白酶、整合酶、逆轉(zhuǎn)錄酶），從而進(jìn)一 步完善病毒結(jié)構(gòu)。蛋白酶抑制劑（PI)就是阻止前體蛋白質(zhì)裂解，導(dǎo)致無感染病毒顆粒的堆 積。
[0004] 藥效構(gòu)象研究表明，這類化合物的作用機(jī)制是主要以氫健的方式分別與蛋白酶的 Asp25,Cly27和Asp29殘基相互作用，與蛋白酶活性基團(tuán)中的氨基酸殘基形成體相互作用， 從而達(dá)到抑制蛋白酶活性的目的，進(jìn)而阻遏了艾滋病病毒的復(fù)制，達(dá)到抗病毒作用。蛋白酶 抑制劑可進(jìn)入包括外周血在內(nèi)的多種組織器官而發(fā)揮抗病毒作用，因而療效深入而持久。
[0005] 目前，已在臨床廣泛應(yīng)用的HIV蛋白酶抑制劑有：沙奎那韋（saquinavir)、茚地那 韋（indinavir)、利托那韋（ritonavir)、奈非那韋（nelfinavir)、安普那韋（amprenavir)和 洛匹那韋（lopinavir)。2003年又有atazanavir和fosamprenavir兩個(gè)新的蛋白酶抑制 劑通過了美國FDA的審批。由Bristol-MyersSquibb公司研發(fā)的atazanavir是一種每天 只需服用一次的全新的蛋白酶抑制劑。它對(duì)胰島素和脂肪代謝影響非常小，病人沒有腹瀉 等副作用。能輕度增加膽紅素水平，個(gè)別患者出現(xiàn)黃疸等，但病人很少因此而停止用藥。
[0006] 這些蛋白酶抑制劑雖然能抑制HIV復(fù)制，但不能徹底消滅體內(nèi)的病毒，也不能阻 止體內(nèi)耐藥毒株的出現(xiàn)和傳播。蛋白酶抑制劑PI應(yīng)用后不僅體內(nèi)病毒的數(shù)量明顯下降，同 時(shí)淋巴細(xì)胞中T輔助細(xì)胞-CD4細(xì)胞則有所增加。然后長期使用這些蛋白酶抑制劑產(chǎn)生明顯 的毒副作用和耐藥性。脂代謝紊亂是多種副作用中最突出且最復(fù)雜的，臨床表現(xiàn)為面部和 外周脂肪消耗，腹、背、胸部脂肪積聚。病人出現(xiàn)高甘油三酯血癥和高膽固醇血癥、乳酸和 血糖升高、對(duì)胰島素產(chǎn)生耐藥性等。其次是耐藥性，尤其是交叉耐藥性是導(dǎo)致臨床治療失敗 的一個(gè)主要原因。研究表明，發(fā)生PI耐藥的機(jī)制比NRIT和NNRTI更復(fù)雜，往往涉及多點(diǎn)基 因突變。一般來說，蛋白酶底物結(jié)合區(qū)單一突變，可使病毒對(duì)藥物的耐受性增加10倍。若 蛋白酶S1亞區(qū)82位纈氨酸或84位異亮氨酸被取代，則耐受性可增至30倍，如果82與84 位殘基同時(shí)突變，可使藥物治療效果下降100倍。使高劑量PI會(huì)比使用低劑量PI延遲耐 藥性的產(chǎn)生，與核苷類藥物的聯(lián)合應(yīng)用也能減少耐藥性的產(chǎn)生。還有耐藥性的產(chǎn)生也由于 高的病毒復(fù)制速率，逆轉(zhuǎn)錄酶在逆轉(zhuǎn)錄過程中的出錯(cuò)和在蛋白酶抑制劑的選擇性作用下的 進(jìn)化結(jié)果。另外PI其復(fù)雜的服用方法、心血管疾病高風(fēng)險(xiǎn)使它不適應(yīng)于依從性差、糖尿病、 心血管疾病的患者。
[0007] 已知以下式I化合物是一種有效的逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶抑制劑
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種藥用原料藥，其活性成分為以下式I化合物：
2. 根據(jù)權(quán)利要求1的藥用原料藥，其中含有97%以上的式I化合物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1的藥用原料藥，其中還含有作為雜質(zhì)存在的以下式Ia化合物：
4. 根據(jù)權(quán)利要求1的藥用原料藥，其中還含有作為雜質(zhì)存在的以下式Ib化合物：
5. -種藥物組合物，其是由權(quán)利要求1所述藥用原料藥和藥用輔料一起制備得到的。
6. -種藥物組合物，其中包括作為活性成分的如下式I化合物
在制備用于檢測(cè)以如下式I化合物為活性成分的藥用原料藥
或者以該式I化合物為活性成分制成的（例如由該藥用原料藥制成的）藥物組合物的 對(duì)照品中的應(yīng)用。
8. 如下式Ib化合物
或者以該式I化合物為活性成分制成的（例如由該藥用原料藥制成的）藥物組合物的 對(duì)照品中的應(yīng)用。
9. 控制藥品質(zhì)量的方法，所述的藥品是以式I化合物為活性成分的藥用原料藥或者由 該藥用原料藥制備成的藥物組合物，該方法包括使該藥品中的雜質(zhì)式Ib化合物控制在一 定范圍內(nèi)，以使該藥品在長期貯藏過程中雜質(zhì)式Ia化合物呈現(xiàn)低的增長。
10. 制備本發(fā)明第一方面任一實(shí)施方案所述藥用原料藥的方法，該方法包括以下步 驟： (1)向N-喹啉?；?L-天門冬氨酸、3-異丙基-3-[ (2S，3S) -2-羥基-3-(苯基甲氧基 羰基）氨基-4-苯基丁基]肼基甲酸叔丁酯、苯并三唑-1-基氧三（二甲基氨基）鱗氟磷 酸鹽和1-羥基苯并三唑的無水二甲基甲酰胺的攪拌溶液中加入N，N-二異丙基乙胺，在室 溫下攪拌使反應(yīng)完全，反應(yīng)物用乙酸乙酯稀釋，并用水、2%硫酸氫鉀、5%碳酸氫鈉和飽和 氯化鈉水溶液洗滌，經(jīng)無水硫酸鎂干燥，減壓蒸發(fā)溶劑，用硅膠柱色譜以乙酸乙酯提純，得 到3-異丙基-3-[ (2S，3S) -2-羥基-3- (N-喹啉?；?L-天門冬?；┌被?4-苯基丁基] 肼基甲酸叔丁酯（即式Ia化合物）
(2) 在室溫、氮?dú)夥障?，使二環(huán)己基碳化二亞胺、3-異丙基-3-[ (2S，3S) -2-羥 基-3-(N-喹啉?；?L-天門冬酰基）氨基-4-苯基丁基]肼基甲酸叔丁酯（即式Ia化合 物）、無水亞磷酸在無水吡啶中混合，在60°C攪拌反應(yīng)后，減壓蒸發(fā)溶劑，以碳酸氫鈉水溶 液處理，于室溫下激烈攪拌1小吋，濾出沉淀物，以水洗滌，以濃鹽酸酸化濾液至約pHl. 5 ; 以乙酸乙酯萃取吸收產(chǎn)物，有機(jī)物經(jīng)無水硫酸鎂脫水，溶劑蒸發(fā)，得到3-異丙基-3-[ (2S， 3S)-2-次膦羧氧基-3-(N-喹啉?；?L-天門冬?；┌被?4-苯基丁基]肼基甲酸叔丁 酯（即式Ib化合物）
(3) 使3-異丙基-3-[(2S，3S)-2-次膦羧氧基-3-(N-喹啉?；?L-天門冬?；┌?基-4-苯基丁基]肼基甲酸叔丁酯（即式Ib化合物）在六甲基二硅胺烷中的懸浮液于 120±5°C下攪拌使反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)呈均質(zhì)化，添加雙（三甲硅烷基）過氧化物，接著在上述 溫度下攪拌1小吋；反應(yīng)混合物冷卻至室溫后，真空蒸發(fā)至干；殘余物溶于甲醇中，減壓蒸 發(fā)至干，再溶于0.IM碳酸氫鈉水溶液中，所得混合物以濃鹽酸酸化至約pHl. 5,經(jīng)氯化鈉飽 和，以乙酸乙酯萃取。合并的有機(jī)相經(jīng)無水硫酸鎂脫水，蒸發(fā)至干，得到3-異丙基-3-[(2S， 3S)-2-膦羧氧基-3-(N-喹啉酰基-L-天門冬?；┌被?4-苯基丁基]肼基甲酸叔丁酯
⑷在室溫下將3_異丙基-3_[ (2S，3S) _2_勝竣氧基-3_ (N-喧琳醜基-L-天門冬 ?；┌被?4-苯基丁基]肼基甲酸叔丁酯加至碳酸氫鈉水溶液中，攪拌直至溶液變澄 清；加異丙醇，攪拌混合物，過濾；所得濾液在55-60°C真空下蒸餾去除溶剤；使物料冷卻 至25-35°C，添加異丙醇，升溫至55-60°C，真空蒸餾除溶劑，干燥，所得固體用異丙醇洗滌， 再在70-75°C的真空下蒸發(fā)至干燥，即得式I所示二鈉鹽化合物為3-異丙基-3-[(2S， 3S)-2-膦羧氧基-3-(N-喹啉?；?L-天門冬?；┌被?4-苯基丁基肼基甲酸叔丁酯二 鈉
(5)純化：使步驟⑷所得產(chǎn)物加至庚烷：乙酸乙酯=10 : 2~5的混合溶劑中， 在70-75°C下攪拌1-3小時(shí)，冷卻至室溫，濾出固體析出物，用庚烷20ml分2次洗滌，再在 60°C、真空下蒸發(fā)至干燥，即得；任選地根據(jù)需要重復(fù)本步驟（5)。
【專利摘要】本發(fā)明涉及抗病毒藥物及其藥物組合物，具體涉及抗人類免疫缺乏病毒(HIV)的藥物及其藥物組合物，特別是涉及一種可作為逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶抑制劑的藥物，該逆轉(zhuǎn)錄病毒蛋白酶抑制劑具有式I所示的化學(xué)結(jié)構(gòu)。
【IPC分類】C07F9-60, C07D215-48, G01N30-02, A61K31-675, A61P31-18
【公開號(hào)】CN104628771
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410399934
【發(fā)明人】夏桂民, 楊東元, 伊恩·雷諾茲, 楊潔
【申請(qǐng)人】赫斯（西安）生物科技有限公司
【公開日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2014年8月14日