抗il-17a/il-17f交叉反應(yīng)性抗體及其使用方法
【專利說明】抗IL-17A/IL-17F交叉反應(yīng)性抗體及其使用方法
[0001] 本申請是申請日為2009年05月05日、中國申請?zhí)枮?00980126177. 3、發(fā)明名稱 為"抗IL-17A/IL-17F交叉反應(yīng)性抗體及其使用方法"的發(fā)明申請的分案申請。
[0002] 相關(guān)申請
[0003] 本申請要求2008年5月5日提交的美國臨時(shí)申請No. 61/126,465和2008年9月 19日提交的美國臨時(shí)申請No. 61/098, 369的權(quán)益，通過述及將每一篇的內(nèi)容完整收入本 文。 發(fā)明領(lǐng)域
[0004] 本發(fā)明一般涉及識(shí)別IL-17F的單克隆抗體（例如完全人的單克隆抗體）、識(shí)別異 二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合物的單克隆抗體（例如完全人的單克隆抗體）、和識(shí)別未復(fù)合在 一起的IL-17F和IL-17A二者的單克隆抗體（例如完全人的交叉反應(yīng)性抗體）的生成，及 作為治療劑使用所述單克隆抗體的方法。
[0005] 發(fā)明背景
[0006] IL-17A(最初叫作CTL-8,而且也稱作IL-17)是IL-17細(xì)胞因子家族的古典/創(chuàng) 立成員。在IL-17A之外，IL-17細(xì)胞因子家族的成員目前包括共享保守C端區(qū)但N端區(qū)段 不同的蛋白質(zhì) IL-17B、IL-17C、IL-17D、IL-17E(也叫作 IL-25)和 IL-17F。
[0007] IL-17A和IL-17F是該家族在序列和生物學(xué)特性這兩個(gè)方面最密切相關(guān)的兩個(gè)成 員。IL-17F與IL-17A在氨基酸水平共享55%序列同一性。IL-17A和IL-17F都是作為二 硫化物連接的同二聚體分泌的，經(jīng)由受體IL-17R、IL-17RC、或由IL-17R和IL-17RC構(gòu)成的 多聚體受體復(fù)合物來發(fā)信號(hào)。二者還在相同的T細(xì)胞子集（主要是Thl7CD4+T細(xì)胞）上共 表達(dá)。
[0008] 此外，二者已經(jīng)相似地被暗示為人類中和人類疾病的小鼠模型中多種炎性和自身 免疫性疾病的進(jìn)展和病理的促成因子。具體而言，IL-17A和IL-17F已經(jīng)被暗示為觸發(fā)炎 癥應(yīng)答并由此促成多種自身炎性疾病，包括多發(fā)性硬化、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、和炎性腸病及癌 癥的主要效應(yīng)器細(xì)胞因子。
[0009] IL-17A和IL-17F二者已證明的體內(nèi)活性闡釋了 IL-17A和IL-17F拮抗劑的臨床 和/或治療潛力，及對IL-17A和IL-17F拮抗劑的需要。具體而言，結(jié)合IL-17A和IL-17F 二者并抑制（拮抗性抗體）IL-17A和I1-17F二者的一種或多種免疫學(xué)活性的抗體會(huì)是有 益的。如此，本領(lǐng)域仍然需要與IL-17A和IL-17F二者和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物 起交叉反應(yīng)的拮抗劑。
[0010] 發(fā)明概述
[0011] 本發(fā)明提供特異性結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、IL-17A、IL-17A同二聚體和/ 或異二聚體IL-17A/IL-17F復(fù)合物的單克隆抗體，諸如完全人的單克隆抗體。本發(fā)明的抗 體能夠調(diào)控（例如阻斷、抑制、降低、拮抗、中和或以其它方式干擾）IL-17、IL-17A和/或 IL-17A/IL-17F介導(dǎo)的促炎性細(xì)胞因子和/或趨化因子生成。
[0012] 本發(fā)明的例示性單克隆抗體包括例如30D12抗體、29D8抗體、1E4抗體、31A3抗 體、39F12抗體、12B12抗體、15B7抗體、4H11抗體、4B11抗體、8B11抗體、38B1抗體、15E6抗 體、5E12抗體、41B10抗體、及其變體。此類抗體的變體包括30D12BF抗體（具有經(jīng)過修飾 的重鏈可變區(qū)的30D12抗體變體）、39F12A抗體（具有經(jīng)過修飾的重鏈可變區(qū)的39F12抗 體變體）、和15E6FK抗體（具有經(jīng)過修飾的輕鏈可變區(qū)的15E6抗體變體）。或者，單克隆 抗體是與30D12抗體、29D8抗體、1E4抗體、31A3抗體、39F12抗體、12B12抗體、15B7抗體、 4H11抗體、4B11抗體、8B11抗體、38B1抗體、15E6抗體、5E12抗體、41B10抗體，及其變體包 括30D12BF抗體、39F12A抗體和15E6FK抗體結(jié)合相同表位的抗體。每一種這些抗體在本文 中分別稱作"huIL-17A/F"抗體。huIL-17A/F抗體包括完全人的單克隆抗體，以及人源化單 克隆抗體和嵌合抗體。優(yōu)選的是，抗體是IgGl。
[0013] 這些抗體顯示對人IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的特異 性，而且它們已經(jīng)顯示出抑制IL-17F、IL-17A和/或IL-17A/IL-17F介導(dǎo)的細(xì)胞因子生成。 這些抗體具有獨(dú)特的特異性。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的huIL-17A/F抗體特異性結(jié)合單 獨(dú)的IL-17F和IL-17A二者（即未復(fù)合在一起）。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的huIL-17A/ F抗體特異性結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。在一些實(shí) 施方案中，本發(fā)明的huIL-17A/F抗體特異性結(jié)合IL-17F、IL-17F同二聚體、IL-17A、IL-17A 同二聚體、和 IL-17A/IL-17F 異二聚體復(fù)合物。例如，30D12、29D8、1E4、31A3、39F12、12B12、 1587、紐11、3881、15￡6、300128?、4811、15￡6?1(、和39?12六結(jié)合11-17?并與11-17六交叉反 應(yīng)，而且這些抗體還結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物。5E12和41B10抗體結(jié)合IL-17F 和IL-17F同二聚體，但是不結(jié)合IL-17A或IL-17A同二聚體。41B10抗體還結(jié)合IL-17A/ IL-17F異二聚體復(fù)合物。
[0014] 本發(fā)明的完全人的抗體含有重鏈可變區(qū)，其具有氨基酸序列SEQ ID N0:2、6、8、 10、14、18、20、24、28、32、34、38、44、48、52、和54。本發(fā)明的完全人的抗體含有輕鏈可變區(qū)， 其具有氨基酸序列SEQ ID勵(lì):4、12、16、22、26、30、36、40、46、和56。三個(gè)重鏈〇)1?包括包 含與選自 SEQ IDN0:57、60、66、69、76、79、82、85 和 90 的序列至少 90%、92%、95%、97%、 98%、99%或更多相同的氨基酸序列的CDR1區(qū)；包含與選自SEQ ID N0:58、61、63、65、67、 70、72、74、77、80、83、86、88、91、93和94的序列至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或更 多相同的氨基酸序列的CDR2區(qū)；和包含與選自SEQ ID N0:59、62、64、68、71、73、75、78、81、 84、87、89、92、和95的序列至少90%、92%、95%、97%、98%、99%或更多相同的氨基酸序 列的CDR3區(qū)。三個(gè)輕鏈CDR包括包含與選自SEQ ID勵(lì):96、101、104、107和110的序列至 少90%、92%、95%、97%98%、99%或更多相同的氨基酸序列的^1?1區(qū) ；包含與選自5￡0 ID N0:97、102、105和108的序列至少90%、92%、95%、97% 98%、99%或更多相同的氨基 酸序列的 CDR2 區(qū)；和包含與選自 SEQ ID N0:98、99、100、103、106、109、lll、112 和 113 的序 列至少90 %、92 %、95 %、97 % 98 %、99 %或更多相同的氨基酸序列的⑶R3區(qū)。
[0015] 本發(fā)明特異性結(jié)合IL-17F、IL-17A和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物的抗體識(shí)別 并結(jié)合IL-17F和IL-17A共享的表位。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合異二聚體IL-17A/IL-17F 復(fù)合物，其中該抗體結(jié)合包括人IL-17F、IL-17A或二者上一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的表位。 本發(fā)明的抗體免疫特異性結(jié)合IL-17F，其中抗體結(jié)合包括人IL-17F上一個(gè)或多個(gè)氨基酸 殘基的表位。本發(fā)明的抗體特異性結(jié)合IL-17A，其中抗體結(jié)合包括人IL-17F、IL-17A或二 者上一個(gè)或多個(gè)氨基酸殘基的表位。
[0016] huIL-17A/F 抗體結(jié)合在 IL-17F 同二聚體、IL-17A 同二聚體和 IL-17A/IL-17F 異 二聚體復(fù)合物二者上找到的共同表位。與結(jié)合界面處的或以其它方式橫跨IL-17A/IL-17F 異二聚體復(fù)合物的表位的抗體不同，huIL-17A/F抗體特異性結(jié)合IL-17A/IL-17F異二聚體 復(fù)合物，而且還識(shí)別并結(jié)合未復(fù)合在一起的IL-17F和IL-17A。如此，huIL-17A/F抗體不需 要IL-17A/IL-17F復(fù)合物形成來識(shí)別IL-17F和/或IL-17A。
[0017] huIL-17A/F 抗體展現(xiàn)中和能力并抑制 IL-17F、IL-17A 和 / 或 IL-17A/IL-17F 異二 聚體復(fù)合物的一種或多種生物學(xué)功能。huIL-17A/F抗體能夠結(jié)合IL-17F (包括IL-17F同 二聚體）、IL-17A (包括IL-17A同二聚體）、和IL-17A/IL-17F異二聚體復(fù)合物中每一項(xiàng)。
[0018] huIL-17A/IL-17F抗體結(jié)合IL-17A同二聚體、IL