一種酶法非水相催化合成(r)-3-tbdmso戊二酸甲單酯及其衍生物的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[OOOU -種酶法非水相催化合成（時(shí)-3-TBDMSO戊二酸甲單醋及其衍生物，屬于生物工 程領(lǐng)域。本發(fā)明設(shè)及瑞舒伐他汀巧（Rosuvastatin)的制備，尤其是其中一關(guān)鍵中間體的制 備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] (時(shí)-3-TBDMSO戊二酸甲單醋中文全名為（時(shí)-3-叔了基二甲基娃氧基戊二酸甲單 醋，它是合成瑞舒伐他汀巧（Rosuvastatin)的關(guān)鍵中間體，其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下；
[0003]
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種酶法非水相催化合成（R)-3-TBDMS0戊二酸甲單酯及其衍生物，其制備過程用 以下反應(yīng)式表示：
上式中，R為甲基，乙基，丙基，丁基，或芐基，以及其它C1-Q^意取代烷基；底物為 3-TBDMS0戊二酸酐或3-TBDMS0戊二酸；其主要原理是在非水相（有機(jī)溶劑）中，利用脂肪 酶Novozyme435催化底物，使之醇解，實(shí)現(xiàn)二羧酸的單醋化，通過無機(jī)堿NaHCO 3調(diào)節(jié)pH值， 有機(jī)溶劑萃取，可以得到手性化合物（R) -3-TBDMS0戊二酸單酯。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所示的酶法合成（R) -3-TBDMS0戊二酸單酯及衍生物，其特征在于： 所述的醇選自甲醇、乙醇、丙醇、正丁醇、異丁醇、苯甲醇、苯乙醇，結(jié)合酶與產(chǎn)物的分子對(duì)接 結(jié)果，優(yōu)選價(jià)格較為便宜的甲醇作為輔底物。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所示的酶法合成（R)-3-TBDMS0戊二酸甲單酯（R-J6)及衍生物，其特 征在于：所述的有機(jī)溶劑選自甲基叔丁醚、異辛烷、正己烷、正辛烷；所述脂肪酶為下列之 一 ：1^口〇27111611頂、吣￥〇27111435、1'巧口8丨11;所述的底物選自3-了801^0戊二酸酐或3-了80皿50 戊二酸，為確保體系為較低含水量，優(yōu)選3-TBDMS0戊二酸酐。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所示的酶法合成（R) -3-TBDMS0戊二酸酐戊二酸單酯及衍生物，其特 征在于：所述的Novozym435預(yù)先用不同pH的緩沖溶液處理后真空干燥，使酶所"記憶"的 pH在7. 2-9. 5之間，而后用于酶的手性催化。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所示的酶法合成（R) -3-TBDMS0戊二酸單酯及衍生物，其特征在于： 所述的酶催化反應(yīng)體系中3-TBDMS0戊二酸酐（底物）濃度為160-250g/L ;輔底物（甲醇） 與底物的摩爾濃度比值為1 : 1-5 : 1;酶的添加濃度為20-90g/L;酶催化體系溫度維持在 35-50°C ;酶催化反應(yīng)時(shí)間6-45h ; (R)-3-TBDMS0戊二酸甲單酯的產(chǎn)量可達(dá)68. 87g/L，生產(chǎn) 強(qiáng)度為 2. 87 (g/L · h)。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所示的酶法合成（R) -3-TBDMS0戊二酸單酯（R-J 6)及其衍 生物，其特征在于：所述的R-J6及其衍生物檢測方法采用高效液相檢測法，其色譜柱 為 Daicel ChiralPak AD-H 5 ym(4.0X250mm)，流動(dòng)相為正己燒（n-Hexane):異丙醇 (Iso-propanol) = 96 : 4(0.02%三氟乙酸〇八)），用0.45以111濾膜過濾，柱溫為5-40<€， 檢測波長為210-350nm，進(jìn)樣量為5-30 μ 1，流速為0. 5-1. 5ml/min。
【專利摘要】本發(fā)明闡述了一種酶法非水相催化合成(R)-3-TBDMSO戊二酸甲單酯及其衍生物，屬于生物工程技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及瑞舒伐他汀鈣(Rosuvastatin)的制備，尤其是其中一關(guān)鍵中間體的制備方法。本發(fā)明公開一種采用Novozyme435酶法催化合成(R)-3-TBDMSO戊二酸單酯(R-J6)及其衍生物的方法，采用本方法對(duì)酶轉(zhuǎn)化條件進(jìn)行了優(yōu)化，反應(yīng)24h后R-J6產(chǎn)物含量可達(dá)67.1g/L，優(yōu)化后的R-J6的產(chǎn)量是優(yōu)化前(優(yōu)化前為4.5g/L)的14.倍；正交實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)酶催化的影響因素主次順序?yàn)椋旱孜餄舛龋敬剪柋龋久笣舛?；最?yōu)的酶轉(zhuǎn)化體系為底物濃度250g/L，酶濃度60g/L，醇酐摩爾比2∶1，溶劑為異辛烷，催化溫度為35℃，酶轉(zhuǎn)化24h后，轉(zhuǎn)化液中R-J6含量可達(dá)68.9g/L，生產(chǎn)強(qiáng)度2.87(g/L·h)。
【IPC分類】C12P9-00
【公開號(hào)】CN104630297
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410746816
【發(fā)明人】劉立明, 王鴻江
【申請(qǐng)人】江南大學(xué)
【公開日】2015年5月20日
【申請(qǐng)日】2014年12月10日