一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠及檢測板的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及微生物學(xué)檢驗領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 隨著社會經(jīng)濟的發(fā)展和人們生活水平的不斷提升，人們對生活品質(zhì)的要求越來越 高，食品安全問題也越來越受到重視。在食品生產(chǎn)、加工、存儲、運輸、銷售等各個環(huán)節(jié)都可 能被微生物污染。特別是近年來隨著環(huán)境污染的加劇和生態(tài)平衡的不斷破壞，可導(dǎo)致人類 感染的致病菌的種類越來越多，病原微生物對人類的威脅越來越大。由微生物污染造成的 食品衛(wèi)生質(zhì)量問題備受關(guān)注，采用適當(dāng)?shù)奈⑸餀z驗方法是預(yù)防食源性中毒的重要手段。 而傳統(tǒng)的微生物檢測方法涉及的試驗較多、操作繁瑣、成本較高、需要時間較長、準(zhǔn)備和收 尾工作繁重，且要大量人員參與。運用現(xiàn)代生化技術(shù)成果發(fā)展起來的微生物快速測試片發(fā) 是近年來不斷取得進展的一種新型檢測方法。
[0003] 快速測試片法是指以紙片、膠片、紙膜等作為培養(yǎng)基載體的培養(yǎng)基和顯色物質(zhì)附 著在上面，通過微生物在上面生長，而顯示出特定的顏色來測定食品中微生物的方法。近年 來以濾紙和Petrifilm為載體的測試片已開始被廣泛應(yīng)用。而目前以濾紙為載體的測試片 多采用不透明的紙質(zhì)底板，紙板上為粉末狀吸水凝膠層，吸水凝膠層上貼含有微生物顯色 培養(yǎng)基的濾紙，最上層加透明上蓋膜。而由于濾紙、吸水凝膠層和底板都是不透明的，生長 在濾紙下側(cè)、吸水凝膠層和底板之間的微生物就難以計數(shù)，易引起食品微生物檢出率偏低。 以Petrifilm載體為代表的測試片，采用了透明的吸水凝膠，而該吸水凝膠劑吸水性能不 好，稀釋液在凝膠層上擴散不規(guī)則，往往成股流動，容易溢出測試片，造成檢測結(jié)果偏低。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠。
[0005] 本發(fā)明的另一目的在于提供一種快速透明微生物檢測板。
[0006]本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是： 一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，所述透明吸水凝膠的固形物由聚丙烯酸樹脂、 羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉組成。
[0007]進一步的，上述用于微生物檢測的透明吸水凝膠中，聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素 鈉和聚丙烯酸鈉的質(zhì)量比為1: (1~2) : (4~8)。
[0008] 進一步的，上述用于微生物檢測的透明吸水凝膠中，聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素 鈉和聚丙烯酸鈉的質(zhì)量比為1:1:4、1:1:8、1:2:4或1:2:8。
[0009] 進一步的，上述用于微生物檢測的透明吸水凝膠中，聚丙烯酸樹脂的數(shù)均分子量 為 260000 ~500000。
[0010] 進一步的，上述用于微生物檢測的透明吸水凝膠中，羧甲基纖維素鈉的數(shù)均分子 量為5400~7400。
[0011] 進一步的，上述用于微生物檢測的透明吸水凝膠中，聚丙烯酸鈉的數(shù)均分子量為 100000 ~2000000。
[0012] 進一步的，微生物選自單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和大腸 桿菌0157。
[0013] -種快速透明微生物檢測板，其使用的透明吸水凝膠如上所述。
[0014] 本發(fā)明的有益效果是： 本發(fā)明的透明吸水凝膠，具有快速吸水保水的特性，稀釋液會被凝膠快速吸收，分布均 勻，不易在凝膠表面成股流動；同時，凝膠的凝固性好，透明度高，對微生物生長無明顯抑制 作用等優(yōu)點，有利于準(zhǔn)確讀數(shù)，獲得更為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。
[0015] 利用本發(fā)明的透明吸水凝膠，成功研制單增李斯特菌檢測板、金黃色葡萄球菌檢 測板、沙門氏菌檢測板和大腸桿菌（大腸埃希氏菌）檢測板等一系列產(chǎn)品，能快速檢測出食 品及環(huán)境中的病原微生物。
【附圖說明】
[0016] 圖1是OXOID李斯特菌顯色培養(yǎng)基平板檢測圖對照； 圖2是本發(fā)明單增李斯特菌檢測板的檢測圖； 圖3是科瑪嘉金黃色葡萄球菌顯色培養(yǎng)基平板檢測圖對照； 圖4是本發(fā)明金黃色葡萄球菌檢測板的檢測圖。
【具體實施方式】
[0017] 一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，所述透明吸水凝膠的固形物由聚丙烯酸樹 月旨、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉組成。
[0018] 進一步的，聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉的質(zhì)量比為1: (1~ 2) : (4 ~8)〇
[0019] 進一步的，聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉的質(zhì)量比為1:1:4、 1:1:8、1:2:4 或 1:2:8〇
[0020] 不同分子量的聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉均具有較好的吸水性 和凝固性，均可用于制備透明吸水凝膠。均數(shù)均分子量為260000~500000的聚丙烯酸樹 月旨，數(shù)均分子量為5400~7400的羧甲基纖維素鈉和數(shù)均分子量為100000~2000000的聚 丙烯酸鈉更為常見，成本相對低廉一點，因為制備工藝成熟，質(zhì)量相對更為穩(wěn)定，優(yōu)選上述 分子量范圍內(nèi)的三種高分子材料為原料。
[0021] 以下結(jié)合具體實驗對本發(fā)明作進一步的說明，但并不局限于此。
[0022] 吸水凝膠復(fù)合配方各項參數(shù)的測定 按照聚丙烯酸樹脂：羧甲基纖維素鈉：聚丙烯酸鈉質(zhì)量比為1:1:1，1:1:4,1:1:8， 1:1:12,1:2:1，1:2:4,1:2:8,1:2:12,1:3:1，1:3:4,1:3:8,1:3:12 進行混合，得到混合凝膠 粉末。
[0023] 分別稱取各種混合粉末1. 0g于潔凈燒杯中，加入50mL 0. 90%生理鹽水，混勻后 吸收5min ;用80目篩瀝水，測瀝出水質(zhì)量（每種樣品做三次重復(fù)求平均值），用下面公式計 算吸水率：吸水率=(加入的總液體質(zhì)量一濾出的液體質(zhì)量）/固體物質(zhì)的質(zhì)量。
[0024]分別稱取各種混合粉末1. 0g，加入50mL去離子水，并同時加入李斯特菌顯色培養(yǎng) 基沸水浴20min，制成含李斯特菌顯色培養(yǎng)基的凝膠溶液，將冷卻的凝膠溶液按照5mL/板 加入有凹槽的透明吸塑模具中，烘干后觀察單增李斯特菌檢測板的透明度（+透明，一不透 明）和平整度（+平整，一不平整包括褶皺和未完全覆蓋檢測板凹槽）。
[0025] 分別取制作好的單增李斯特菌檢測板，接種lmL單增生李斯特氏菌ATCC19115菌 懸液，靜置5min觀察檢測板的吸水情況（+完全吸水，一未完全吸水）及平整度（+平整，一 不平整包括褶皺和未完全覆蓋檢測板凹槽），然后倒置于37°C恒溫箱培養(yǎng)24~48h，觀察檢 測板的保水性（+完全保水，一未完全保水）及菌株在檢測板上的生長情況（" + "表示陽性 結(jié)果，目標(biāo)菌長出呈藍(lán)綠色菌落帶白色暈環(huán)，"一"表示陰性結(jié)果，目標(biāo)菌未長出）。
[0026] 結(jié)果如表1所示：
【主權(quán)項】
1. 一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：所述透明吸水凝膠的固形物由 聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉組成。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：聚丙烯 酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉的質(zhì)量比為1: (1~2) : (4~8)。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：聚丙烯 酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉的質(zhì)量比為1:1:4、1 :1:8、1:2:4或1:2:8。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：聚丙烯 酸樹脂的數(shù)均分子量為260000~500000。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：羧甲基 纖維素鈉的數(shù)均分子量為5400~7400。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：聚丙烯 酸鈉的數(shù)均分子量為100000~2000000。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠，其特征在于：所述微 生物選自單核細(xì)胞增生李斯特菌、金黃色葡萄球菌、沙門氏菌和大腸桿菌0157。
8. -種快速透明微生物檢測板，其特征在于：檢測板使用的透明吸水凝膠的組成如權(quán) 利要求1~7任意一項所述。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種用于微生物檢測的透明吸水凝膠及檢測板，透明吸水凝膠的固形物由聚丙烯酸樹脂、羧甲基纖維素鈉和聚丙烯酸鈉組成。本發(fā)明的透明吸水凝膠，具有快速吸水保水的特性，稀釋液會被凝膠快速吸收，分布均勻，不易在凝膠表面成股流動；同時，凝膠的凝固性好，透明度高，對微生物生長無明顯抑制作用等優(yōu)點，有利于準(zhǔn)確讀數(shù)，獲得更為準(zhǔn)確的檢測結(jié)果。利用本發(fā)明的透明吸水凝膠，成功研制單增李斯特菌檢測板、金黃色葡萄球菌檢測板、沙門氏菌檢測板和大腸桿菌O157檢測板等一系列產(chǎn)品，能快速檢測出食品及環(huán)境中的病原微生物。
【IPC分類】C12Q1-14, C12Q1-10, C12Q1-04
【公開號】CN104673876
【申請?zhí)枴緾N201510069871
【發(fā)明人】范俊, 盧新, 肖劍, 陳娟麗, 孫霞, 梁智安, 易云婷, 蔣廉華
【申請人】廣州綠洲生化科技股份有限公司
【公開日】2015年6月3日
【申請日】2015年2月9日