抗體和蛋白質(zhì)制劑的制作方法
【專利說(shuō)明】抗體和蛋白質(zhì)制劑
[0001] 本申請(qǐng)于2013年8月28日作為PCT國(guó)際專利申請(qǐng)?zhí)峤唬⑶乙笥?012年8月 31日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?3/601,598和于2013年3月15日提交的美國(guó)專利申請(qǐng)?zhí)?13/843, 780的優(yōu)先權(quán)，所述美國(guó)專利申請(qǐng)的公開(kāi)內(nèi)容在此通過(guò)引用全文并入本文。
[0002] 背景 本公開(kāi)內(nèi)容一般涉及等滲且具有低粘度的抗體及其他蛋白質(zhì)制劑，包括用于注射和一 般施用的制劑。
[0003] 血友病患者患有出血障礙，這導(dǎo)致在損傷或手術(shù)后延遲的血液凝固。延長(zhǎng)出血由 一種或多種血液凝固因子中的遺傳缺陷引起。兩類常見(jiàn)的血友病是已知的--血友病A和 血友病B。血友病A由因子VIII中的缺陷引起，而血友病B由因子IX中的缺陷引起?？傃?友病患者中的約75-80%患有血友病A。
[0004] 組織因子途徑抑制劑（TFPI)是血液凝固的外源性途徑的人抑制劑并在抗凝中起 效。針對(duì)TFPI的抗體包括抗TFPI單克隆抗體（aTFPImAb)在阻斷TFPI功能的努力中得 到開(kāi)發(fā)。一種此類aTFPImAb是人IgG2抗TFPImAb，其開(kāi)發(fā)用于治療血友病A和B患者。 [0005] 抗體及其他蛋白質(zhì)可以經(jīng)由靜脈內(nèi)、肌內(nèi)和/或皮下注射施用于患者。為了確保 患者依從性，希望皮下注射劑型是等滲的且包括小注射體積（〈2.0ml/注射部位)。為了 降低注射體積，蛋白質(zhì)通常在1mg/ml- 150mg/ml的范圍內(nèi)施用。
[0006] 雖然液體和凍干劑型兩者均用于目前銷售的基于抗體及其他蛋白質(zhì)的藥物產(chǎn)品， 但凍干形式更頻繁用于具有高蛋白質(zhì)濃度的蛋白質(zhì)和抗體藥物產(chǎn)品。
[0007] 蛋白質(zhì)和抗體劑型可以呈現(xiàn)制劑開(kāi)發(fā)中的許多挑戰(zhàn)，尤其是對(duì)于液體制劑。對(duì)于 其中蛋白質(zhì)濃度接近其表觀溶解度限制的制劑，相分離可以通過(guò)沉淀、膠凝和/或結(jié)晶而 發(fā)生。在高蛋白質(zhì)濃度時(shí)，由于可溶性和不溶性蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)聚集體的形成，抗體或其他 蛋白質(zhì)的穩(wěn)定性可以變得成問(wèn)題。高度濃縮的蛋白質(zhì)制劑通常是高度粘稠的，這呈現(xiàn)加工 例如超濾和無(wú)菌過(guò)濾以及劑量溶液注射的困難。并且在對(duì)于預(yù)期用于肌內(nèi)或皮下施用的制 劑希望的蛋白質(zhì)濃度時(shí)，需要高濃度的穩(wěn)定劑例如鹿糖和氯化鈉，以實(shí)現(xiàn)長(zhǎng)期蛋白質(zhì)穩(wěn)定 性。所得到的高滲溶液通常由于組織損害而引起注射疼痛。因此，對(duì)于高蛋白質(zhì)濃度制劑 的穩(wěn)定性和滲透壓摩爾濃度平衡穩(wěn)定劑的量是關(guān)鍵的。
[0008] 出于這些原因，本領(lǐng)域存在對(duì)以液體形式的基于抗體及其他蛋白質(zhì)的治療制劑的 需要，所述治療制劑顯示出高蛋白質(zhì)濃度，而無(wú)顯著增加的蛋白質(zhì)聚集、滲透壓摩爾濃度或 粘度和/或蛋白質(zhì)穩(wěn)定性減少的問(wèn)題。因此，希望基于抗體及其他蛋白質(zhì)的制劑含有有限 量的賦形劑和小體積以便于治療施用或遞送。進(jìn)一步希望基于抗體及其他蛋白質(zhì)的治療制 劑可順應(yīng)于凍干，以增強(qiáng)在延長(zhǎng)貯存條件下的蛋白質(zhì)穩(wěn)定性。
[0009] 概述 本公開(kāi)內(nèi)容提供了液體和凍干的基于抗體和蛋白質(zhì)的制劑，其基本上是等滲和低粘度 的，并且基本上不含無(wú)機(jī)鹽。本文呈現(xiàn)的抗體及其他蛋白質(zhì)制劑在約pH4.0 -約pH6.0 的pH下含有約0mM-約30mM組氨酸；約50ppm-約200ppm非離子型表面活性劑例 如聚山梨酯（Tween?)80或聚山梨酯（Tween?)20;約88mM-約292mM糖或糖醇例如甘露 糖醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖；約0mM-約50mM精氨酸；約0mM-約50mM賴氨酸；約〇mM_約133mM甘氨酸或丙氨酸；約0mM-約10mM甲硫氨酸；和約1mg/ ml-約150mg/ml的蛋白質(zhì)。本文公開(kāi)的制劑顯示出范圍為在22°C下約1mPa-S-約20 mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 15mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 10mPa-S，或 在22°C下約1mPa-S-約8mPa-S或在22°C下約1mPa-S-約6mPa-S的粘度和范圍為 約240 -約380mmol/kg的滲透壓摩爾濃度。
[0010] 在進(jìn)一步方面內(nèi)，本公開(kāi)內(nèi)容提供了用于治療患者中的病癥的方法，其包括給患 者施用治療有效量的本文描述的一種或多種制劑。例如，提供的是用于治療患者中的病癥 的方法，其包括給患者施用治療有效量的如本文更詳細(xì)地描述的抗體或其他蛋白質(zhì)制劑。
[0011] 本文教導(dǎo)的這些及其他特點(diǎn)在本文中闡述。
[0012] 附圖簡(jiǎn)述 技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解下文描述的附圖僅用于舉例說(shuō)明目的。附圖不預(yù)期以任何方式限制 本文教導(dǎo)的范圍。
[0013] 圖1是顯示氯化鈉（NaCl)濃度對(duì)20mg/ml以pH5. 5的抗TFPImAb制劑的濁度 的作用的圖示。
[0014] 圖2是顯示pH對(duì)抗TFPImAb藥品的濁度的作用的圖示。
[0015] 多種實(shí)施方案的描述 如上所述，本公開(kāi)內(nèi)容提供了抗體及其他蛋白質(zhì)制劑，其在預(yù)期貯存條件下以液體形 式或凍干形式穩(wěn)定抗體或其他蛋白質(zhì)。本文描述的制劑包括一種或多種藥學(xué)上可接受的賦 形劑或穩(wěn)定劑，并且包含在以合適pH的緩沖介質(zhì)中，并且與生理溶液基本上等滲。對(duì)于全 身施用，注射是一種施用途徑，包括肌內(nèi)、靜脈內(nèi)、腹膜內(nèi)和皮下注射。
[0016] 由于其低粘度，本文公開(kāi)的蛋白質(zhì)制劑可以方便地經(jīng)由例如超濾和無(wú)菌過(guò)濾進(jìn)行 加工，并且可以經(jīng)由注射包括皮下注射施用于患者。此外，因?yàn)樗鼈兓旧鲜堑葷B的，所以 本文公開(kāi)的抗體和蛋白質(zhì)制劑降低組織損害或其他不利生理效應(yīng)，并且從而實(shí)現(xiàn)有利的患 者耐受和增加的患者依從性。
[0017] 本文描述的制劑的特征在于基本上不存在添加的鹽，其提供增加其他穩(wěn)定劑例如 蔗糖的濃度的靈活性，同時(shí)維持制劑的滲透壓摩爾濃度用于改善的體內(nèi)耐受性和因而增加 的患者依從性。此外，本文描述的制劑的低粘度允許方便加工，包括但不限于超濾和無(wú)菌過(guò) 濾，和通過(guò)針注射藥物產(chǎn)品溶液。
[0018] 如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"粘度"指例如當(dāng)在施用于患者期間通過(guò)注射針注射時(shí)，液體 制劑對(duì)流動(dòng)的抗性。粘度測(cè)量可以通過(guò)錐板技術(shù)用在限定溫度例如如本文描述的22°C下設(shè) 定的泊爾帖元件（Peltierelement)完成。通常，將明確限定的剪切應(yīng)力梯度應(yīng)用于液體 制劑，并測(cè)量所得到的剪切速率。粘度是剪切應(yīng)力與剪切速率的比。如本文使用的，粘度以 在22°C下的mPa-S單位表示，其中1mPa-S= 1cP。本文公開(kāi)的低粘度、基本上等滲的制 劑通常特征在于具有范圍為在22°C下約1mPa-S-約20mPa-S，或在22°C下約1mPa-S-約 15mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 10mPa-S，或在 22°C下約 1mPa-S-約 8mPa-S 或在22°C下約1mPa-S-約6mPa-S的粘度。
[0019] 如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"滲透壓摩爾濃度"指定義為每kg溶液的溶質(zhì)mmole數(shù)的溶 質(zhì)濃度量度。所需滲透壓摩爾濃度水平可以通過(guò)添加一種或多種穩(wěn)定劑來(lái)實(shí)現(xiàn)，所述穩(wěn)定 劑例如糖或糖醇，包括但不限于甘露糖醇、右旋糖、葡萄糖、海藻糖和/或蔗糖。適合于提 供滲透壓摩爾濃度的另外穩(wěn)定劑在參考文獻(xiàn)例如PharmaceuticalExcipients(第四版， RoyalPharmaceuticalSocietyofGreatBritain，Science&PracticePublishers) 或Remingtons: TheScienceandPracticeofPharmacy(第十九版，MackPublishing Company)的手冊(cè)中描述。
[0020] 如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"約"指提供的單位值的+/- 10%。如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"基本 上"指顯示出總計(jì)或近似程度的目的特征或特性的定性狀況。生物學(xué)領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 應(yīng)當(dāng)理解生物學(xué)和化學(xué)現(xiàn)象很少(如果有的話)實(shí)現(xiàn)或避免絕對(duì)結(jié)果。術(shù)語(yǔ)基本上因此在本 文中用于捕獲許多生物學(xué)和化學(xué)現(xiàn)象中固有的完全性的潛在缺乏。如本文使用的，術(shù)語(yǔ)"等 滲的"和"等張的"可與術(shù)語(yǔ)"基本上等滲的"和"基本上等張的"互換使用，并且指特征在于 具有的滲透壓與另一種溶液的滲透壓相同或至少基本上相等