一種高純度多拉菌素的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于工業(yè)微生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種高純度的多拉菌素的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 寄生蟲病是目前最為嚴(yán)重的人畜共患病之一，嚴(yán)重影響著畜牧業(yè)的健康發(fā)展與 人類的生命安全。在眾多抗動(dòng)物體內(nèi)外寄生蟲藥物中，阿維菌素類藥物（Avermectins) 是目前最為優(yōu)良的一類廣譜高效獸用類抗寄生蟲藥，已商品化的有阿維菌素，伊維菌素 (Ivermectin)，多拉菌素（Doramectin)和埃普利諾菌素（Eprinomectin)。其中，多拉菌 素為20世紀(jì)90年代由美國輝瑞公司研制開發(fā)出的新一代大環(huán)內(nèi)酯類抗寄生蟲藥，是被 認(rèn)為目前阿維菌素類藥物中最優(yōu)秀的藥物之一。多拉菌素是由基因重組的阿維鏈霉菌 arenYi/is)新菌株通過添加環(huán)已甲酸為前體物質(zhì)發(fā)酵而成的一種十六 元大環(huán)內(nèi)酯類半合成抗生素，屬于第三代阿維菌類藥物，其結(jié)構(gòu)式如式1所示：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種高純度多拉菌素的制備方法，包括以下步驟： 1) 向發(fā)酵液中加入助濾劑、攪拌，板框壓濾得到菌絲渣； 2) 用極性溶劑對(duì)菌絲渣進(jìn)行浸提，過濾，得到浸提液； 3) 將浸提液濃縮成浸膏，對(duì)浸膏進(jìn)行打漿處理，靜置過濾，得到粗品A; 4) 用極性溶劑對(duì)粗品A進(jìn)行結(jié)晶，并用淋洗溶劑進(jìn)行淋洗，得到濕晶體； 5) 將濕晶體干燥得到多拉菌素精粉。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟1)中所述的助濾劑為珍珠巖或硅藻 土，其用量為每升發(fā)酵液使用15~45g助濾劑。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟2)中所述的極性溶劑為甲醇、乙醇 或乙酸丁酯或其中任意混合溶劑，加入量為每千克菌絲渣使用2~5L極性溶劑，浸提時(shí)間為 6~15h〇
4. 根據(jù)利要求1所述的方法，其特征在于步驟3)中所述的濃縮為旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，溫度為 45 ~60。。。
5. 根據(jù)利要求1所述的方法，其特征在于步驟3)中所述的打漿處理中打漿液為甲基叔 丁基醚和乙醇體積比1:2~2:1混合的混合液，用量為與浸膏等質(zhì)量。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于將步驟4)對(duì)粗品A進(jìn)行結(jié)晶、淋洗得到濕 晶體步驟，重復(fù)操作一次或多次。
7. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟4)所述的極性溶劑為甲醇、乙醇、丙 酮、異丁醇、異丙醇或其中任意的混合溶劑，用量為每克粗品A使用5-8ml極性溶劑；所述的 結(jié)晶時(shí)的溫度控制在2~I(TC，結(jié)晶時(shí)間為2~ 16h。
8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟4)所述的淋洗溶劑為冰乙醇或冰丙 酮，使用量為與步驟4)中極性溶劑的使用量體積比為0. 2~0. 3。
9. 根據(jù)權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于所述的淋洗溶劑為80%的冰乙醇或60%的 冰丙酮。
10. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于步驟5)所述的干燥為真空干燥，溫度控制 在4(T50°C，干燥時(shí)間為4~16h。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種多拉菌素的分離方法，該方法將發(fā)酵液經(jīng)過浸提、濃縮、打漿、結(jié)晶等步驟，得到高純度的多拉菌素。本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于采用打漿結(jié)晶工藝提取多拉菌素，工藝簡(jiǎn)單易行，收率高，產(chǎn)品質(zhì)量高、生產(chǎn)成本低，適宜于工業(yè)化生產(chǎn)。
【IPC分類】C07H1-08, C07H17-08
【公開號(hào)】CN104693254
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201310661993
【發(fā)明人】楊久林, 袁增良, 唐恒, 郭明, 袁建棟
【申請(qǐng)人】重慶乾泰生物醫(yī)藥有限公司, 博瑞生物醫(yī)藥技術(shù)(蘇州)有限公司
【公開日】2015年6月10日
【申請(qǐng)日】2013年12月10日