原液體積的四分之一，然后結(jié)晶，最 后離心收集賴氨酸晶體和廢液；合并上述截留物、濃縮液和廢液，得到廢母液；其中，微濾 膜為無機陶瓷膜，截留分子量為3000 Da，微濾溫度為36°C;超濾膜截留分子量為300 Da， 超濾溫度為36°C ; 2) 將廢母液進行加熱，使溫度達到KKTC，保溫lOmin，得到變性后的菌體溶液，然后 冷卻至室溫，將變性后的菌體溶液泵入碟式離心機中，以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心12min后， 收集下層菌體和上層液體；然后將菌體置于40°C真空干燥箱中烘至恒重，然后紫外線照射 5min，菌體厚度為10cm，紫外線強度為2000uW/cm 2;然后將菌體添加到攪拌反應(yīng)器中，并加 入IM的鹽酸溶液，100轉(zhuǎn)/min攪拌反應(yīng)15min，隨后用碟片分離機以3000r/min的轉(zhuǎn)速離 心5min去除細胞壁，收集上清液，濃縮成膏狀物，最后通過噴霧造粒流化床干燥，得到顆粒 蛋白；其中，菌體和鹽酸溶液的質(zhì)量比為1 :2 ; 3) 將步驟1)所得固體纖維物質(zhì)、步驟2)所得上層液體以及步驟2)所得細胞壁合并， 自然沉降固液分離，得上清液和沉淀物；將沉淀物、稻糠、雞蛋殼粉以及麥麩按照5 :2 :1 :1 的質(zhì)量比混合，加入占混合物質(zhì)量3%的氨水，添加純凈水調(diào)整含水率至50%質(zhì)量分數(shù)，混合 均勻，置于密閉環(huán)境下氨化72小時；調(diào)整氨化后的混合物的pH為5. 0,加入占混合物質(zhì)量 的2%的纖維素酶和1%的木聚糖酶，混合均勻，酶解20h ;100°C滅酶5min，最后30°C通風(fēng)干 燥，粉碎得到飼料； 所述纖維素酶和木聚糖酶的酶活分別為5000U/g和10000U/g ; 4) 往步驟3)所得上清液中添加腐植酸鉀、硅藻土以及秸桿粉，攪拌均勻，靜置12小時， 然后加入氨水，攪拌均勻，置于密閉環(huán)境下氨化72小時，得到主料；將主料、磷酸一銨、聚天 冬氨酸以及硫酸鋅按照200 :10 :1 :1的質(zhì)量比混合均勻，加入到雙螺桿擠出造粒機中，造粒 包裝制得復(fù)混肥；其中，步驟3)所得上清液、腐植酸鉀、硅藻土、秸桿粉以及氨水的質(zhì)量比 為 50 :20 :12 :10 :5。 實施例2 本發(fā)明將實施例1制備的顆粒蛋白，純度可達到85%以上，替代市售標準Yro培養(yǎng)基中 的酵母粉，其余成分不變，在相同條件下培養(yǎng)釀酒酵母和畢赤酵母，通過比較細胞的生長情 況（0D600)評價產(chǎn)品的培養(yǎng)效果。具體見表1 : 表1
【主權(quán)項】
1. 一種利用賴氨酸廢母液生產(chǎn)顆粒蛋白的方法，其特征在于，所述方法包括如下步 驟： 步驟1):賴氨酸發(fā)酵液經(jīng)過孔徑為Imm的過濾器，收集濾液A和固體纖維物質(zhì)；濾液A經(jīng)微濾膜過濾，分別收集截留物和濾液B;然后將濾液B繼續(xù)進行超濾膜過濾，收集濃縮液 和濾液C;濾液C經(jīng)過蒸發(fā)器濃縮至原液體積的四分之一，然后結(jié)晶，最后離心收集賴氨酸 晶體和廢液；合并上述截留物、濃縮液和廢液，得到廢母液； 步驟2):將廢母液進行加熱，使溫度達到KKTC，保溫lOmin，得到變性后的菌體溶液， 然后冷卻至室溫，將變性后的菌體溶液泵入碟式離心機中，以4000r/min的轉(zhuǎn)速離心12min 后，收集下層菌體和上層液體；然后將菌體置于40°C真空干燥箱中烘至恒重，隨后紫外線 照射5min;然后將菌體添加到攪拌反應(yīng)器中，并加入相當于菌體兩倍質(zhì)量的IM的鹽酸溶 液，100轉(zhuǎn)/min攪拌反應(yīng)15min，再用碟片分離機以3000r/min的轉(zhuǎn)速離心5min去除細胞 壁，收集上清液，濃縮成膏狀物，最后通過噴霧造粒流化床干燥，得到顆粒蛋白； 步驟3):將步驟1)所得固體纖維物質(zhì)、步驟2)所得上層液體以及步驟2)所得細胞壁 合并，自然沉降固液分離，得上清液和沉淀物；將沉淀物、稻糠、雞蛋殼粉以及麥麩按照5 : 2 :1 :1的質(zhì)量比混合，加入占混合物質(zhì)量3%的氨水，添加純凈水調(diào)整含水率至50%，混合均 勻，置于密閉環(huán)境下氨化72小時；調(diào)整氨化后的混合物的pH為5. 0,加入占混合物質(zhì)量的 2%的纖維素酶和1%的木聚糖酶，混合均勻，酶解20h;100°C滅酶5min，最后30°C通風(fēng)干燥， 粉碎得到飼料； 步驟4):往步驟3)所得上清液中添加腐植酸鉀、硅藻土以及秸桿粉，攪拌均勻，靜置 12小時，然后加入氨水，攪拌均勾，置于密閉環(huán)境下氨化72小時，得到主料；將主料、磷酸一 銨、聚天冬氨酸以及硫酸鋅按照200 :10 :1 :1的質(zhì)量比混合均勻，加入到雙螺桿擠出造粒機 中，造粒包裝即得。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述步驟1)中，微濾膜為無機陶瓷膜，截 留分子量為3000Da，微濾溫度為36°C;超濾膜截留分子量為300Da，超濾溫度為36°C。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述紫外線的強度為2000uW/cm2。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述噴霧造粒流化床由1套噴霧造粒流 化床主機1#床、1套干燥冷卻流化床2#床、進風(fēng)系統(tǒng)、出風(fēng)系統(tǒng)、產(chǎn)品處理系統(tǒng)及料漿處理 系統(tǒng)組成；1#床干燥進風(fēng)溫度150-165°C、料漿溫度50°C、每個噴槍流量0. 4m3/h、床層壓差 8. 3-8. 8KPa;2#床干燥進風(fēng)溫度彡150°C、冷卻進風(fēng)20°C、床層壓差3. 5-5.OKPa。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1-3任其一所述的方法，其特征在于，所述纖維素酶和木聚糖酶的酶 活分別為 5000U/g和 10000U/g。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1-4任其一所述的方法，其特征在于，所述步驟4)中，步驟3)所得上 清液、腐植酸鉀、硅藻土、秸桿粉以及氨水的質(zhì)量比為50 :20 :12 :10 :5。
【專利摘要】本發(fā)明屬于生物發(fā)酵行業(yè)發(fā)酵廢液處理領(lǐng)域，公開了一種利用賴氨酸廢母液生產(chǎn)顆粒蛋白的方法，該方法包括收集賴氨酸晶體和廢母液，離心水解制備顆粒蛋白，以及利用廢料制備飼料和復(fù)混肥。本發(fā)明方法制備的顆粒蛋白純度高，可替代市售酵母粉產(chǎn)品，培養(yǎng)效果更佳，能給企業(yè)帶來巨大的經(jīng)濟效益。
【IPC分類】C12N1-00, A23K1-10, C07C227-40, A23K1-14, A23K1-00, C05G3-00, C07C229-26
【公開號】CN104726335
【申請?zhí)枴緾N201510171657
【發(fā)明人】汲廣習(xí), 嚴紀文, 趙鳳良, 白紅兵
【申請人】呼倫貝爾東北阜豐生物科技有限公司
【公開日】2015年6月24日
【申請日】2015年4月13日...