發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于發(fā)酵技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 赤蘚糖醇是天然零熱量的甜味劑，食用時(shí)有清涼感，口味獨(dú)特。由于赤蘚糖醇不參 與糖代謝和血糖變化，適宜糖尿病人食用。赤蘚糖醇不致齲齒，耐受量比木糖醇高，吸收快， 幾乎無(wú)導(dǎo)致腸胃不適的可能。在食用糖醇中，赤蘚糖醇是唯一采用發(fā)酵法制取的，更接近于 天然轉(zhuǎn)化和提取。隨著生活水平的提高，人們?cè)絹?lái)越注重食品保健，赤蘚糖醇作為一種品質(zhì) 優(yōu)越的保健糖，其需求量將常年遞增。目前，國(guó)內(nèi)發(fā)酵產(chǎn)赤蘚糖醇菌種多數(shù)為解脂假絲酵 母。傳統(tǒng)方法大致流程為：種子斜面培養(yǎng)一斜面轉(zhuǎn)搖瓶擴(kuò)培一搖瓶菌液合并到種子瓶一一 級(jí)種子擴(kuò)大培養(yǎng)一二級(jí)種子擴(kuò)大培養(yǎng)一發(fā)酵一提取赤蘚糖醇。由于一級(jí)種子接種量大，種 子瓶一般需合并200個(gè)搖瓶，操作時(shí)間長(zhǎng)，耗時(shí)耗力且染菌幾率高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了解決上述的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種操作時(shí)間短、節(jié)約時(shí)間和體力并且 可以有效降低染菌機(jī)率的方法。
[0004] 發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，包括如下步驟： 將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到多個(gè)茄子瓶中，斜面培養(yǎng)基為下述重量份數(shù)的成 分：葡萄糖150-250份，酵母膏5-15份，尿素0. 5-1. 5份，瓊脂15-25份，自來(lái)水800-1200 份，調(diào)節(jié)pH值為6. 0,于28-32°C下培養(yǎng)45-50h后向每個(gè)茄子瓶中加入80-120份的無(wú)菌 水，將洗下的菌苔全部接入滅菌的含20L培養(yǎng)基發(fā)酵罐中培養(yǎng)15-22h，然后全部接入一級(jí) 種子罐，再經(jīng)二級(jí)種子罐、發(fā)酵罐產(chǎn)赤蘚糖醇。
[0005] 優(yōu)選的，上述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，包括如下步驟： 將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到10個(gè)茄子瓶中，斜面培養(yǎng)基成分為：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素 l.Og，瓊脂20g，自來(lái)水1000mL，pH6.0,于30°C下培養(yǎng)48h后向每 個(gè)茄子瓶中加入IOOmL無(wú)菌水，將洗下的菌苔全部接入滅菌的含20L培養(yǎng)基發(fā)酵罐中培養(yǎng) 18h，然后全部接入一級(jí)種子罐，再經(jīng)二級(jí)種子罐、發(fā)酵罐產(chǎn)赤蘚糖醇。
[0006] 上述的發(fā)酵罐中培養(yǎng)基的成分為：葡萄糖210份，酵母膏11份，尿素 I. 1份，鹽 酸硫胺5 X KT3份，生物素0. 12 X KT3份，氯化鈣29 X ΚΓ3,硫酸亞鐵15 X ΚΓ3,自來(lái)水1000 份，0. 2份消泡劑，pH值為6. 2。
[0007] 茄子瓶接種發(fā)酵罐后，在轉(zhuǎn)速300-800r/min，通氣量0. 5-1. 0WM，罐壓0. 8Mpa，溶 氧30%，溫度30°C，pH6. 0條件下培養(yǎng)18h，全部接入一級(jí)種子罐。
[0008] 茄子瓶接種發(fā)酵罐后，0_3h轉(zhuǎn)速控制為300r/min，3-10h轉(zhuǎn)速逐步提升為800r/ min〇
[0009] 茄子瓶接種發(fā)酵罐后，0_3h控制通氣量為0. 5VVM，3-12小時(shí)控制通氣量為 0· 5-1. OVVM0
[0010] 發(fā)酵罐取樣口與一級(jí)種子罐相連接。
[0011] 在轉(zhuǎn)種時(shí)，關(guān)閉發(fā)酵罐排氣閥，且保持發(fā)酵罐罐內(nèi)壓力大于一級(jí)種子罐。
[0012] 本發(fā)明的有益效果在于，采用本發(fā)明的方法用發(fā)酵罐代替種子瓶制備種子液，產(chǎn) 赤蘚糖醇，既節(jié)約人力時(shí)間又大大降低染菌幾率。而且本發(fā)明的方法生產(chǎn)赤蘚糖醇，相對(duì)于 現(xiàn)有的種子瓶制備種子液，產(chǎn)赤蘚糖醇，在降低能耗、人力和時(shí)間消耗的條件下，產(chǎn)量要高 出 1%-2%。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作更進(jìn)一步的說(shuō)明，以便本領(lǐng)域的技術(shù)人員更了解 本發(fā)明，但并不因此限制本發(fā)明。
[0014] 實(shí)施例1 將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到10個(gè)茄子瓶中（斜面培養(yǎng)基成分為：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素 l.Og，瓊脂20g，自來(lái)水1000mL，pH6.0)，30°C培養(yǎng)48h后向每個(gè) 茄子瓶中加入IOOmL無(wú)菌水，把洗下的菌苔全部接入已經(jīng)過(guò)滅菌的含20L培養(yǎng)基的發(fā)酵罐 中培養(yǎng)18h，然后全部接入一級(jí)種子罐，接種量為1%，20h后接入二級(jí)種子罐，接種量為10%， IOh后接入發(fā)酵罐，接種量為10%，發(fā)酵120h后測(cè)得赤蘚糖醇含量為160g/L。
[0015] 對(duì)比例1 將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到10個(gè)茄子瓶中（斜面培養(yǎng)基成分為：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素 l.Og，瓊脂20g，自來(lái)水1000mL，pH6.0)，30°C培養(yǎng)48h后向每個(gè)茄 子瓶中加入IOOmL無(wú)菌水，把洗下的菌苔全部接入200個(gè)1000 mL搖瓶中，每個(gè)搖瓶裝液量 為100mL，接入5mL菌液，30°C，180r/min培養(yǎng)24h后全部合并到一個(gè)種子瓶中，種子瓶菌液 全部接入一級(jí)種子罐，接種量為1%，20h后接入二級(jí)種子罐，接種量為10%，IOh后接入發(fā)酵 罐，接種量為10%，發(fā)酵120h后測(cè)得赤蘚糖醇含量為157g/L。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，包括如下步驟： 將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到多個(gè)茄子瓶中，斜面培養(yǎng)基為下述重量份數(shù)的成 分：葡萄糖150-250份，酵母膏5-15份，尿素0. 5-1. 5份，瓊脂15-25份，自來(lái)水800-1200 份，調(diào)節(jié)pH值為6. 0,于28-32°C下培養(yǎng)45-50h后向每個(gè)茄子瓶中加入80-120份的無(wú)菌 水，將洗下的菌苔全部接入滅菌的含20L培養(yǎng)基發(fā)酵罐中培養(yǎng)15-22h，全部接入一級(jí)種子 罐，再經(jīng)二級(jí)種子罐、發(fā)酵罐產(chǎn)赤蘚糖醇，上述的份為重量份數(shù)。
2. 如權(quán)利要求1所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，包括如下步驟： 將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到10個(gè)茄子瓶中，斜面培養(yǎng)基成分為：葡萄糖 200g，酵母膏10g，尿素l.Og，瓊脂20g，自來(lái)水1000mL，pH6.0,于30°C下培養(yǎng)48h后向每 個(gè)茄子瓶中加入IOOmL無(wú)菌水，將洗下的菌苔全部接入滅菌的含20L培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中培 養(yǎng)18h，全部接入一級(jí)種子罐，再經(jīng)二級(jí)種子罐、發(fā)酵罐產(chǎn)赤蘚糖醇。
3. 如權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：發(fā)酵罐 中培養(yǎng)基的成分為：葡萄糖210份，酵母膏11份，尿素1.1份，鹽酸硫胺5XKT3份，生物 素0. 12X10_3份，氯化鈣29X10_3,硫酸亞鐵15X10_3,自來(lái)水1000份，0. 2份消泡劑，pH值 為 6. 2。
4. 如權(quán)利要求3所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接種發(fā)酵 罐后，在轉(zhuǎn)速 300-800r/min，通氣量 0. 5-1. 0VVM，罐壓 0. 8Mpa，溶氧 30%，溫度 28-32°C， pH5. 5-6. 5條件下培養(yǎng)18h，全部接入一級(jí)種子罐。
5. 如權(quán)利要求4所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接種發(fā)酵罐 后，在轉(zhuǎn)速 300-800r/min，通氣量 0. 5-1. 0VVM，罐壓 0. 8Mpa，溶氧 30%，溫度 30°C，pH6. 0 條 件下培養(yǎng)18h，全部接入一級(jí)種子罐。
6. 如權(quán)利要求5所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接種發(fā)酵罐 后，〇-3h轉(zhuǎn)速控制為300r/min，3-10h轉(zhuǎn)速逐步提升為800r/min。
7. 如權(quán)利要求6所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：茄子瓶接種發(fā)酵罐 后，0-3h控制通氣量為0. 5VVM，3-12小時(shí)控制通氣量為0. 5-1. 0VVM。
8. 如權(quán)利要求7所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：發(fā)酵罐取樣口與一 級(jí)種子罐相連接。
9. 如權(quán)利要求8所述的發(fā)酵罐生產(chǎn)赤蘚糖醇的方法，其特征在于：轉(zhuǎn)種時(shí)，關(guān)閉發(fā)酵罐 排氣閥，且保持發(fā)酵罐罐內(nèi)壓力大于一級(jí)種子罐。
【專利摘要】本發(fā)明涉及微生物領(lǐng)域，尤其是涉及一種發(fā)酵罐代替種子瓶接種產(chǎn)赤蘚糖醇的方法。本發(fā)明的方法包括如下步驟：將產(chǎn)赤蘚糖醇的解脂假絲酵母接種到多個(gè)茄子瓶中，斜面培養(yǎng)基為下述重量份數(shù)的成分：葡萄糖150-250份,酵母膏5-15份,尿素0.5-1.5份,瓊脂15-25份,自來(lái)水800-1200份,調(diào)節(jié)pH值為6.0，于28-32℃下培養(yǎng)45-50h后向每個(gè)茄子瓶中加入80-120份的無(wú)菌水，將洗下的菌苔全部接入滅菌的含20L培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中培養(yǎng)15-22h，全部接入一級(jí)種子罐，再經(jīng)二級(jí)種子罐、發(fā)酵罐產(chǎn)赤蘚糖醇。本發(fā)明的目的是用發(fā)酵罐代替種子瓶接種產(chǎn)赤蘚糖醇，既節(jié)約人力時(shí)間又大大降低染菌的幾率。
【IPC分類(lèi)】C12P7-18, C12R1-73
【公開(kāi)號(hào)】CN104726503
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510156469
【發(fā)明人】王松江, 王榮峰
【申請(qǐng)人】諸城東曉生物科技有限公司
【公開(kāi)日】2015年6月24日
【申請(qǐng)日】2015年4月3日